Artículo de método

Aislamiento de microglía de lesiones desmielinizantes del cerebro de ratón mediante clasificación de células activadas magnéticamente

8 de julio de 2025

En este artículo

Resumen

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Fuente: Zhang, H. et al. Aislamiento de microglía primaria de ratón mediante clasificación de células activadas magnéticamente en modelos animales de desmielinización. J. Vis. Exp. (2022).

Este video muestra un protocolo para extraer células microgliales de lesiones desmielinizantes en cerebros de ratones utilizando la clasificación magnética de células. El protocolo consiste en diseccionar el tejido cerebral lesionado que contiene células microgliales, tratar el tejido con enzimas específicas para obtener una suspensión unicelular y utilizar perlas magnéticas específicas del receptor microglial para aislar las células microgliales.

Protocolo

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Todos los procedimientos que involucran muestras de animales han sido revisados y aprobados por el comité de revisión ética animal apropiado.

1. Materiales

  1. Prepare las siguientes soluciones antes de comenzar el protocolo:
    1. Prepare el tampón de carga añadiendo suero fetal bovino (FBS, 2%) a solución salina tamponada con fosfato (PBS).
    2. Agregue tinte rojo neutro (NR) (1% final) al PBS.
  2. Prepare las siguientes soluciones utilizando el Kit de Disociación Cerebral para Adultos disponible en el mercado (consulte la Tabla de Materiales).
    1. Para p....

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Resultados

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Figura 1: Imágenes de las lesiones desmielinizantes focales marcadas por el tinte rojo neutro.

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Figura 2: Imágenes de las tres capas formadas por centrifugación. Las dos capas superiores (capa 1 + capa 2) deben eliminarse en el proceso de eliminación de.......

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Divulgaciones

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No se han declarado conflictos de interés.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Tubos de microcentrífuga de 1,5 mlBIOFILCFT001015
Tubos de centrífuga de 15 mLBIOFILCFT011150
Tubos de centrífuga de 50 mLBIOFILCFT011500
Filtro de 70 μmMiltenyi Biotec130-095-823
Kit de disociación cerebral para adultos, ratón y rataMiltenyi Biotec130-107-677
Ratones C57BL/6JLaboratorios SJA
CD11b (Microglía) Perlas, humanas y de ratónMiltenyi Biotec130-093-634
Suero Fetal BovinoBOSTERPYG0001
MACS MultiStandMiltenyi Biotec130-042-303
Separador MiniMACSMiltenyi BiotecTeléfono 130-042-102
Columnas MSMiltenyi Biotec130-042-201
Rojo neutroSigma-Aldrich1013690025
PbsBOSTERPYG0021
PentobarbitalSigma-AldrichP-010
Microscopio estereoscópicoMshOtMZ62

Reimpresiones y permisos

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Etiquetas

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