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Artículo de método
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8 de julio de 2025
Fuente: Wickham, R. J., et al. Infusión y Estimulación Combinadas con Voltammetría Cíclica de Barrido Rápido (CIS-FSCV) para Evaluar la Regulación del Receptor del Área Tegmental Ventral de la Dopamina Fásica. J. Vis. Exp. (2020).
Este video muestra la implantación de electrodos y cánulas en una rata anestesiada para medir la liberación de dopamina en el núcleo accumbens utilizando un potenciostato y la infusión de fármacos para modular la actividad dopaminérgica en el área tegmental ventral.
Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado de animales y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
1. Preparaciones prequirúrgicas
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Figura 1: Cronología del registro antes y después de la microinfusión de VTA.
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| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Solución/suministros de llenado de electrodos | |||
| micropipeta | Instrumentos de precisión mundial | MF286-5 (calibre 28) | |
| Acetato de potasio | sigma | 236497-100G | |
| Cloruro de potasio | sigma | P3911-25G | |
| Suministros de electrodos | |||
| Fibra de carbono | Espina | T650 | |
| Extractor de electrodos | Narishige Internacional | PE-22 | Nota: también se pueden utilizar tiradores horizontales |
| Capilar de vidrio | Sistemas A-M | 626000 | |
| Cables aislados para electrodos | Weico Alambre y Cable Incorporado | UL 1423 | Longitud; 10 cm; diámetro, 0,4 mm; debe hacerse a medida; el material aislante debe cubrir 5 cm del cable |
| Microscopio óptico (para ver y cortar electrodos) | Fischer Científico | M3700 | |
| anclar | Empresas Fénix | HWS1646 | Para soldar en el cable del electrodo aislado y el electrodo de referencia; se conecta a la etapa de la cabeza |
| masilla | Alcolin | 23922-1003 | Se utiliza para colocar el electrodo mientras se corta la fibra de carbono |
| Hoja de bisturí | Instrumentos de precisión mundial | 500239 | Para cortar fibra de carbono a la longitud adecuada |
| Alambre de plata | sigma | 327026-4G | |
| FSCV Hardware/Software | |||
| Jaula de Faraday | Línea en U | H-3618 (36" x 24" x 42") | |
| Potenciostato | Univ. de Carolina del Norte, Instalación de Electrónica | ||
| Electrodo estimulante | PlásticosUno | MS303/2-A/SPC | Al realizar el pedido, solicite un corte de 22 mm por debajo del pedestal |
| Software TarHeel HDCV | Universidad de Carolina del Norte-Chapel Hill | - | https://chem.unc.edu/critcl-main/criticl-electronics/criticl-electronics-hardware/ para la información sobre pedidos |
| Caja de conexiones UEI | Univ. de Carolina del Norte, Instalación de Electrónica | https://chem.unc.edu/critcl-main/criticl-electronics/criticl-electronics-hardware/ para la información sobre pedidos | |
| Fuente de alimentación UEI | Univ. de Carolina del Norte, Instalación de Electrónica | https://chem.unc.edu/critcl-main/criticl-electronics/criticl-electronics-hardware/ para la información sobre pedidos | |
| Hardware del estimulador | |||
| Aislador de estímulos neurólogos | Digitimer Ltd. | DS4 | Neurólogo 800A |
| Suministros de infusión/estimulación | |||
| Bomba de infusión | Bomba de jeringa New Era | NE-300 | |
| Cánula interna | PlásticosUno | C315I/SPC INTERNO 33GA | |
| Jeringa de microlitros | Hamilton | 80308 | |
| tubería | PlásticosUno | C313CT/ TUBO PKG 023 X 050 PE50 | |
| Suministros quirúrgicos | |||
| Soporte de cánula | Instrumentos Kopf | 1776 P-1 | |
| Aplicadores de punta de algodón | Vitalidad Médica | Artículo 806 | |
| Portaelectrodo | Instrumentos Kopf | Año 1770 | |
| Almohadilla térmica | Kent Científico | RT-0501 | |
| Povidona yodada | Vitalidad Médica | 29906-004 | |
| Tornillos | Guardando | Tornillos de anclaje óseo/paquete de 100 | 1,59 mm de diámetro exterior, 3,2 mm de largo |
| Referencia de alambre de plata con AgCl | Métrica InVivo | E255A | |
| Gasa cuadrada | Vitalidad Médica | 441408 | |
| Estereotasa | Instrumentos Kopf | Modelo 902 (barra de brazo doble) | |
| Medicamentos para infusiones | |||
| Ácido ((2R)-amino-5-fosfonovalérico | Sigma Aldrich | A5282 | |
| N-metil-D-aspartato | Sigma Aldrich | M3262 | |
| Clorhidrato de mecamilamina (M9020-5mg) | Sigma Aldrich | M9020 | |
| Hidrobromuro de escopolamina (S0929-1g) | Sigma Aldrich | S0929 |
