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Evaluación de redes neuronales en cortes de médula espinal de ratón mediante matrices de microelectrodos

July 8th, 2025

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fuente: Iredale, J. A., et al. Registro de la actividad de la red en circuitos nociceptivos espinales utilizando matrices de microelectrodos. J. Vis. Exp. (2022).

Este video muestra un ensayo basado en una matriz de microelectrodos para estudiar la actividad de la red neuronal en secciones de la médula espinal de ratón. En primer lugar, se registra la actividad electrofisiológica del asta dorsal superficial (SDH) del corte. Luego, se introduce un inhibidor del canal de potasio para prolongar la despolarización, lo que resulta en una actividad rítmica sincrónica a través de la red neuronal.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Todos los procedimientos relacionados con la recolección de muestras se han realizado de acuerdo con las directrices del IRB del instituto.

1. Electrofisiología in vitro

  1. Preparación de soluciones para la preparación y registro de cortes de médula espinal
    1. Líquido cefalorraquídeo artificial
      nota: El líquido cefalorraquídeo artificial (aCSF) se utiliza en una cámara de incubación interfaz, donde se almacenan los cortes hasta que comienza el registro y durante los experimentos como perfusor y diluyente para los fármacos. Consulte la Tabla 1 para ver la c....

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Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

figure-results-1
Figura 1: Orientaciones de los cortes de la médula espinal, métodos de montaje y corte. (A) Las rebanadas transversales requieren un bloque de corte de espuma de poliestireno con una ranura de soporte cortada en él. La médula espinal se apoya contra el bloque en el surco de soporte, con el lado dorsal de la médula en dirección opuesta al bloqueo. El bloque y el cordón se pegan en una.......

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
No se han declarado conflictos de interés.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
4-aminopiridinaSigma-Aldrich275875-5G
100% etanolTermo FisherAJA214-2.5LPL
CaCl2 1MBanksia Científica0430/1L
Carbonox (Carbógeno - 95% O2, 5% CO2)Coregas219122
Tijeras de resorte de mango largo curvoHerramientas de Bellas Ciencias15015-11
Cámara de incubación de interfaz de aire hecha a medida
Suero fetal bovinoTermo Fisher10091130
Pinzas Dumont #5Herramientas de Bellas Ciencias11251-30
glucosaTermo FisherAJA783-500G
Suero de caballoTermo Fisher16050130
Microscopio invertidoZeissAxiovert10
KclTermo FisherAJA383-500G
ketaminaCevaKETALAB04
Tijeras quirúrgicas grandesHerramientas de Bellas Ciencias14007-14
Loctite 454 Adhesivo InstantáneoPernos y suministros industrialesL4543G
MATLABObras de matemáticasR2018b
MEAs, 3-DimensionalSistemas multicanal60-3DMEA100/12/40iR-Ti, 60-3DMEA200/12/50iR-Ti60 electrodos de nitruro de titanio (TiN) con 1 electrodo de referencia interno, dispuestos en una cuadrícula cuadrada de 8x8. Los electrodos tienen 12 μm de diámetro, 40 μm (100/12/40) o 50 μm (200/12/50) de altura y están espaciados equidistantemente a 100 μm (100/12/40) o 200 μm (200/12/50) de distancia.
Cabecera de MEASistemas multicanalMEA2100-HS60
Placa de interfaz MEASistemas multicanalMCS-IFB 3.0 Arranque múltiple
Red MEASistemas multicanalALA HSG-MEA-5BD
Sistema de perfusión MEASistemas multicanalPPS2
AMUMA, PlanarSistemas multicanal60MEA200/30iR-Ti, 60MEA500/30iR-Ti60 electrodos de nitruro de titanio (TiN) con 1 electrodo de referencia interno, dispuestos en una rejilla cuadrada de 8x8 (200/30) o en una rejilla rectangular de 6x10 (500/30). Los electrodos tienen 30 μm de diámetro y están espaciados equidistantemente a 200 μm (200/30) o 500 μm (500/30) de distancia.
MgCl2Termo FisherAJA296-500G
Cámara microscópicaMoticMoticam X Wi-Fi
Software de análisis multicanalSistemas multicanalV 2.17.4
Software Multi Channel ExperimenterSistemas multicanalV 2.17.4
NaClTermo FisherAJA465-500G
NaHCO3Termo FisherAJA475-500G
NaH2PO4Termo FisherACR207805000
RongeursHerramientas de Bellas Ciencias16021-14
Tijeras de muelle pequeñasHerramientas de Bellas Ciencias91500-09
Tijeras quirúrgicas pequeñasHerramientas de Bellas Ciencias14060-09
sacarosaTermo FisherAJA530-500G
Superpegamentoadhesivo de cianoacrilato
TetrodotoxinaAbcamAB120055
Mesa de aislamiento de vibracionesNewportVH3048W-OPT
Microtomo vibratorioLeicaVT1200 S

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Microelectrode ArrayNeuronal NetworkMouse Spinal CordSuperficial Dorsal HornPotassium Channel Inhibitor4 AminopyridineAction Potential RecordingElectrophysiological ActivitySynchronous Rhythmic ActivityArtificial CSF Perfusion

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