Registro de las respuestas sinápticas de CA3-CA1 en un corte de hipocampo de rata

Resumen

Fuente: Shetty, M. S. et al., Investigación de Marcado/Captura Sináptica y Captura Cruzada utilizando Cortes Agudos de Hipocampo de Roedores.J. Vis. exp. (2015).

Este video muestra un método para registrar las respuestas sinápticas de CA3-CA1 en un corte de hipocampo de rata. Describe los pasos involucrados en la colocación de los electrodos estimulantes y de registro en el corte del hipocampo y la medición del potencial postsináptico excitador de campo (fEPSP) para evaluar la fuerza de la respuesta sináptica.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran muestras de animales han sido revisados y aprobados por el comité de revisión ética animal apropiado.

1. Registro de las respuestas sinápticas CA3-CA1

NOTA: La configuración de electrofisiología utilizada para el registro de potencial de campo se muestra en la Figura 1A. Se recomienda encarecidamente una jaula de Faraday si la interferencia eléctrica está más allá del control después de la conexión a tierra adecuada de los ajustes eléctricos. Hay muchos tipos diferentes de cámaras sumergibles y de interfaz disponibles en el m....

Resultados

Figura 1.Configuración electrofisiológica para registros de potencial de campo que consta de: (A) estimuladores, (b) un amplificador diferencial, (c) un convertidor de analógico a digital, (d) osciloscopio, (e) computadora con software de adquisición, (f) microscopio de mesa resistente a las vibraciones, (g) con aumento de >4x, (h) interfaz, cámara de corte de cerebro, (i) un sist.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
I. Productos químicos componentes de ACSF
1. Cloruro de sodio (NaCl)	Sigma-Aldrich	S5886
2. Cloruro de potasio (KCl)	Sigma-Aldrich	P9541
3. Sulfato de magnesio heptahidratado (MgSO4.7H20)	Sigma-Aldrich	M1880
4. Cloruro de calcio dihidratado (CaCl2.2H2O)	Sigma-Aldrich	C3881
5. Fosfato de potasio monobásico (KH2PO4)	Sigma-Aldrich	P9791
6. Bicarbonato de sodio (NaHCO3)	Sigma-Aldrich	S5761
7. D-glucosa anhidra (C6H12O6)	Sigma-Aldrich	G7021
II. Instrumentos de electrofisiología
1. Microscopio	Olimpo, Japón	Modelo SZ61
2. Controlador de temperatura	Diseño de Sistemas Científicos Inc. Canadá	PTC03
3. Amplificador de CA diferencial	AM Systems, EE. UU.	Modelo 1700
4. Estimulador de pulso aislado	AM Systems, EE. UU.	Modelo 2100
5. Osciloscopio	Rhode & Schwarz	HM0722
6. Convertidor digital-analógico	Cambridge Electronic Design Ltd. Cambridge, Reino Unido	Potencia CED 1401-3
7. Cámara de corte de cerebro de interfaz	Diseño de Sistemas Científicos Inc. Canadá	BSC01
8. Bomba de tubería	Ismatec, Idex Salud y Ciencia, Alemania	REGLO-Analógico
9. Caudalímetro de carbógeno	Cole-Parmer	03220-44
10. Iluminador de luz de fibra	Industrias Dolan-Jenner	Fibra Lite MI-150
11. Micromanipuladores	Marzhauser Wetzlar, Alemania	00-42-101-0000 (MM-33)
		00-42-102-0000 (MM-32)
12. Electrodos	AM Systems, EE. UU.	571000 (Acero inoxidable; 0,010, 5MΩ, 8 grados)