Registros de pinzamiento de parche de célula completa en ganglios de la raíz dorsal de rata intacta

Resumen

Fuente: Gong, K.,et al. Grabaciones de pinza de parche en ganglios de raíz dorsal intactos de ratas adultas. J. Vis. Exp. (2016)

Este video demuestra el examen de la excitabilidad de las neuronas sensoriales en los ganglios de la raíz dorsal utilizando la técnica de pinza de parche para medir la reobase y el potencial de membrana, analizando las respuestas de las neuronas a las inyecciones incrementales de corriente.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran muestras de animales han sido revisados y aprobados por el comité de revisión ética animal apropiado.  

1. Grabaciones de Patch Clamp

1. Coloque la solución de electrodo (ver Tabla 1) sobre hielo para evitar la degradación. Llene la pipeta de parche de vidrio con solución intracelular filtrada (filtro de jeringa, tamaño de poro: 0,2 μm) y coloque la pipeta en el soporte de pipetas de la etapa principal. Aplique una presión suave y positiva a la pipeta a través de una jeringa de 5 ml desplazando el émbolo aproximadamente 1 ml antes >

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Pipeta de vidrio	Sutter	BF150-110-7.5
ancla	Aparato Havard	64-0250	estabilice el DRG para evitar la deriva.
Bomba peristáltica	WPI (en inglés
Extractor de pipetas	Sutter	Pág. 97
amplificador	Dispositivos moleculares	Axopatch 200B
digitalizador	Dispositivos moleculares	1440D
microscopio	Nikon	FN600
Micro-manipulador	Sutter	MPC200
Cárgeno (95% O2, 5% CO2)	Proveedor local de gases medicinales

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