Inducción y evaluación de la depresión en ratones a través de la exposición al estrés crónico

Resumen

Fuente: Yan, Z., et al. Evaluación del efecto antidepresivo de Xiaoyaosan en ratones con estrés crónico. J. Vis. Exp. (2019).

El video muestra el proceso de establecer un modelo de ratón de depresión crónica inducida por el estrés y evaluar los comportamientos depresivos. La aplicación crónica de varios factores estresantes desencadena la liberación de corticosterona, lo que conduce a una sobreexcitación neuronal y finalmente a la muerte neuronal, lo que resulta en síntomas similares a la depresión en los ratones.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado animal y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Preparación de ratones para el procedimiento experimental

NOTA: Para el procedimiento experimental, se seleccionaron ratones machos C57BL/6J sanos de 12 semanas de edad, con un peso de cada ratón de entre 18 y 22 g.

1. Mantenga a los ratones individualmente en jaulas en una sala típica de animales de laboratorio libres de patógenos específicos (SPF) (22 ± 1 °C, 12 h/12 h ciclo de luz/oscuridad, humedad relativa: 30-40%) durante una semana antes del procedimiento de CUMS.
2. Divida aleatoriamente todos los ratones en un grupo de control y un grupo modelo de acuerdo con su peso corporal. Cada grupo tiene 15 ratones.
3. Antes del inicio del experimento, numere los ratones de cada grupo en su cola con un rotulador.

2. Inducción de la depresión en ratones

NOTA: Para inducir la depresión, los ratones del grupo modelo y dos grupos de tratamiento se sometieron a un estrés leve crónico impredecible (CUMS) durante 21 días. El plan se puede cambiar de acuerdo con la situación práctica, pero se debe seguir el principio de que el mismo factor estresante no se puede usar continuamente.

1. Exponga a los ratones diariamente a dos de los siguientes siete factores estresantes durante 21 días consecutivos. Nuestro plan de modelado está diseñado de la siguiente manera:
   1. El lunes, exponer a los ratones a la privación de alimentos (vaciar el alimento de cada jaula durante 24 h, 8:00 a.m. a 8:00 a.m.) y a la privación de agua (retirar la botella de cada jaula durante 24 h, 8:00 a.m. a 8:00 a.m.).
   2. El martes, exponga a los ratones al estrés de sujeción (sujete a los ratones en una pequeña tina de plástico durante 3 h, de 8:00 a.m. a 11:00 a.m.) y a jaulas vacías (retire el acolchado de cada jaula durante 11 h, de 8:00 a.m. a 19:00 p.m.).
   3. El miércoles, exponga a los ratones a jaulas mojadas y sucias (vierta agua en cada jaula y manténgala húmeda durante 24 h, de 8:00 a.m. a 8:00 a.m.) y a jaulas abarrotadas (coloque cinco ratones en una jaula durante 24 h, de 8:00 a.m. a 8:00 a.m.).
   4. El jueves, exponga a los ratones al estrés de restricción y a la natación helada (obligue a cada ratón a nadar en un acuario de vidrio transparente con agua helada durante 5 minutos).
   5. El viernes, exponga a los ratones a jaulas mojadas y sucias y a la privación de alimentos.
   6. El sábado, exponga a los ratones al estrés de restricción y a jaulas abarrotadas.
   7. El domingo, exponga a los ratones a jaulas vacías y a nadar con agua helada.
2. Registre el estado del pelaje y el peso corporal semanalmente hasta el final del modelado (día 21). Calcule la puntuación total del estado del pelaje como la suma de las puntuaciones de siete partes diferentes del cuerpo: cabeza, cuello, pelaje dorsal, pelaje ventral, patas delanteras, cola y patas traseras. Una puntuación de uno indica un pelaje bien cuidado, y una puntuación de cero indica un pelaje descuidado.

Materiales