El video demuestra la localización fluorescente de proteínas de unión estrecha y fibras de estrés en células endoteliales microvasculares del cerebro de rata (RBMEC). En la monocapa sometida a estrés, se utilizan anticuerpos marcados con fluorescencia para marcar las proteínas de unión estrecha, mientras que la faloidina marcada con fluoróforos marca las fibras de estrés. A continuación, las moléculas marcadas se visualizan a través de la microscopía confocal.
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Artículo de método
Localización de fluorescencia de proteínas de unión estrecha y fibras de estrés en células endoteliales
963 visualizaciones
⸱
28 de abril de 2025
En este artículo
Resumen
Protocolo
1. Siembra de células endoteliales
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Proox model 110 | Biospherix | Model 110 | |
| DMEM, sin glucosa | Gibco, Life technologies | 11966-025 | |
| Rhodamine Phalloidin | Life technologies | R415 | |
| ZO-1 Rabbit Polyclonal Antibody | Life technologies | 617300 | |
| Nunc Lab Tek II-CC 8 pozos estériles, portaobjetos de vidrio | Thermo scientific | 177402 | |
| FITC-tagged anti-rabbit secundario anticuerpo | Santa cruz | sc-2090 | |
| DPBS 1X | Thermo scientific | SH 30028.03 | Se puede utilizar cualquier otro PBS disponible |
