Análisis de estructuras amiloides en una sección de tejido mediante microscopía de imágenes de fluorescencia de por vida

Abstract

Fuente: Nyström, S., et al., Imágenes de tejidos amiloides teñidos con oligotiofenos conjugados luminiscentes mediante microscopía confocal hiperespectral e imágenes de fluorescencia de por vida. J. Vis. Exp. (2017).

Este video demuestra el análisis de estructuras amiloides con microscopía de imágenes de fluorescencia o FLIM, utilizando el tinte hFTAA para revelar núcleos compactos como azul/verde y periferias inestables como rojo/amarillo en imágenes codificadas por colores, lo que refleja la organización del amiloide.

Protocol

1. Preparación de muestras de tejido

NOTA: Muchos tipos de tejidos pueden ser visualizados utilizando el ácido heptámero-formil tiofeno acético (hFTAA) como marcador amiloide. El hFTAA es sensible a la conformación de agregados. Por lo tanto, es preferible que la tinción se realice en agregados no interrumpidos sin exposición a epítopos. La calidad espectral óptima se logra si la fijación del tejido se mantiene al mínimo. Por lo tanto, se prefiere el material fresco congelado, fijado suavemente en eta....

Materials