La dermatitis herpetiforme (DH) es una enfermedad inflamatoria crónica caracterizada por una reacción autoinmune entre IgA y la epidermis transglutaminasa (ETG). DH se desarrolla en una porción muy pequeña de los pacientes con sensibilidad al gluten y / o enfermedad celíaca. Los resultados de este estudio indican que DH también puede desarrollarse en una gran mono rhesus con síntomas de la dermatitis idiopática.
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Artículo de método
Reconocimiento de la transglutaminasa epidérmica por IgA y anticuerpos transglutaminasa tisular 2 en un raro caso de Rhesus Dermatitis
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Resumen
Resumen
Transglutaminasa tisular 2 (tTG2) es una enzima digestiva intestinal que deamidates ya parcialmente digerido la dieta gluten péptidos de la gliadina por ejemplo. En individuos genéticamente predispuestos, tTG2 desencadena la respuesta autoinmune que se caracteriza por la producción de anticuerpos y tTG2 su deposición directa en 1,2 pequeña pared intestinal. La presencia de anticuerpos de ese tipo constituye una de las características principales de la enfermedad celiaca (EC). Transglutaminasa epidérmica (ETG) es otro miembro de la familia de la transglutaminasa, que también puede funcionar como un autoantígeno en una pequeña minoría de los pacientes con EC. En estos casos relativamente raros, ETG desencadena una reacción auto inmune (una erupción de la piel) clínicamente se conoce como dermatitis herpetiforme (DH). Aunque el mecanismo exacto de la patogenia de CD y DH no se entiende bien, se sabe que tTG2 y ETG epítopos antigénicos compartir que pueden ser reconocidos por los anticuerpos de suero de los pacientes de CD y DH 3,4.
(Macaca mulatta) con dermatitis (tabla 1, fig. 1 y 2) se utilizó para estudiar los tejidos afectados. En un animal (EM96) una superposición espectral de IgA y anticuerpos tTG2 (Fig. 3) se demostró. La presencia de doble positivas tTG2 + IgA + células se centró en la epidermis de profundidad, alrededor de las papilas dérmicas. Esto es consistente con las lesiones descritas en pacientes con DH 3. Cuando EM96 fue colocado en una dieta libre de gluten, dermatitis, así como tTG2 + IgA + depósitos desaparecido y ya no eran detectables (Fig. 1-3). Dermatitis reapareció sin embargo, sobre la base de re-introducción del gluten de la dieta en el EM96 (no mostrado). En los macacos otros como animales no relacionados con la dermatitis, la tTG2 + IgA + depósitos no fueron detectados. Dieta libre de gluten-dependiente de la remisión de la dermatitis en el EM96 junto con la presencia de tTG2 + IgA + células en la piel indican una enfermedad autoinmune, como DH-mecanismo para el desarrollo de esta condición. Este es el primer informe de DH-como la dermatitis en los primates no humanos.
Protocolo
1. La biopsia de piel la recogida de muestras
- Antes de la biopsia de piel, anestesiar a los animales por vía intramuscular con 2,5 mg / kg de clorhidrato de tiletamina y zolazepam mezcla de clorhidrato de Telazol (Fort Dodge Animal Health, Fort Dodge, IA). Monitor de los animales de la administración de anestesia hasta postración y retire de su gabinete.
- Eliminar el vello de la piel del área de interés utilizando un Oster A5 de Oro Clipper velocidad Veterinaria individual con un tamaño de 40 cuchillas (Oster Professional Products, McMinnville, TN) y preparar asépticamente con alternancia de matorral Betadine y alcohol. Asegurar un paño fenestrado....
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Discusión
Nuestra reciente creación no humana modelo de primates de la sensibilidad al gluten se ha utilizado recientemente para estudiar los cambios de permeabilidad intestinal provocada por gluten de la dieta 5,6. Plasma tTG2 anticuerpos, así como intestinal tTG2 + + depósitos de IgA se detectaron en algunos macacos sensibilidad al gluten. Ya que recientemente identificado incidentes raros de dermatitis idiopática en la colonia de macacos rhesus, que no se pudo habitual (infecciosas / metabólicas) etiología estableci.......
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Divulgaciones
No hay conflictos de interés declarado.
Agradecimientos
Los autores desean agradecer a Amanda Tardo, el Dr. Mostafa Bouljihad, Feely Stephanie, Coyne Carol, la Dra. Erin Ribka, el Dr. Pete Didier y Kuebler Dorothy por su asistencia técnica. Este trabajo fue apoyado por subvenciones del NIH R01-DK076653 y 3R01-DK076653-02S1 para KS y la subvención de funcionamiento de la base de TNPRC RR000164.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Nombre del reactivo o equipo | Empresa | Número de catálogo / Código de producto | Nota |
| Anti-IgA humana-FITC * | Sigma, St. Louis, MO | F-5259 | 1:100 dilución de trabajo |
| Anti-Human tTG2 | Thermo Scientific, Kalamazoo, MI | MS-300-P1ABX | 1:100 dilución de trabajo |
| Anti-ratón IgG1 ** | Invitrogen, Carlsbad, CA | A-21124 | 1:1000 dilución de trabajo |
| ToPro-3 *** sonda de ADN | Invitrogen, Carlsbad, CA | T-3605 | 1:1000 dilución de trabajo |
| Zinc formalina (Z-fix) | Anatech Ltd., Battle Creek, MI | 171 | |
| Octubre de congelación Medio | Sakura Finetek, Torrence, CA | 4583 | |
| Cytoseal montaje Medio | Richard Allan-Científico, Kalamazoo, MI | 8312-4 | |
| Anti-enfriamiento Solución | Sigma, St. Louis, MO | P 3130 | |
| Ethilon (Sutura de nylon) | Ethicon, Johnson & Johnson, Berkshire, Reino Unido | 663G | |
| Miltex sacador cutáneo instrumento de biopsia | Miltex, York, PA | NA | |
| Oster A5 de oro Single Speed Clipper veterinario con un tamaño de 40 cuchillas | Productos Oster, McMinnville, TN | 78005-050 | |
| Leica procesador de tejidos | Leica Microsystems Inc., Buffalo Grove, IL | ASP300 | |
| Micrótomo rotatorio | Microm Internacional, Waldorf, Alemania | HM325 | |
| Criostato | Thermo Scientific, Kalamazoo, MI | HM560 | |
| Microscopio Confocal | Leica, Wetzlar, Alemania | TCS SP2 |
* Isotiocianato de fluoresceína
** Secundaria (Alexa Fluor 568-conjugado) anticuerpo utilizado después de tTG2 anticuerpo primario
** Tinte
Referencias
- Diosdado, B., Wijmenga, C. Molecular mechanisms of the adaptive, innate and regulatory immune responses in the intestinal mucosa of celiac disease patients. Expert. Rev. Mol. Diagn. 5 (5), 681-700 (2005).
- Schuppan, D., Dennis, M. D., Kelly, C. P.
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Reimpresiones y permisos
