Este video demuestra la visualización de trombos cerebrales en ratones utilizando imágenes de microtomografía computarizada (micro-CT). A un modelo de ratón con trombo cerebral se le inyectan nanopartículas de oro dirigidas a la fibrina que actúan como agente de contraste. El ratón se coloca en la cama de una máquina de micro-TC y las imágenes se adquieren desde múltiples ángulos. Utilizando el software adecuado, las imágenes se reconstruyen y procesan.
Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado animal y la junta de revisión veterinaria de JoVE.
1. Preparación de un coágulo formado exógenamente marcado con marcador de fluorescencia (Figura 1)
Anestesiar un ratón en una cámara de inducción utilizando isoflurano al 3% mezclado con oxígeno al 30% (1,5 L/min 100% de oxígeno). Asegure la profundidad adecuada de la anestesia observando el tono muscular y confirmando la ausencia del reflejo de pinzamiento del dedo del pie.
Coloque al animal en una cortina estéril en posición prona y manténgalo bajo anestesia con una máscara de....
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Figura 1: Descripción general de la preparación de coágulos de sangre marcados con fluorescencia. (A) Mezcla de sangre entera fresca con sonda fluorescente de infrarrojo cercano (NIRF) Cy5.5 (C15) que está unida covalentemente a las hebras d.......
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Materials
List of materials used in this article
Name
Company
Catalog Number
Comments
Máquinas
microCT
NanoFocusRay, JeonJu, Corea
NFR Polaris-G90
Laser Doppler flowmeter
Perimed, Estocolmo, Suecia
Sistema PeriFlux 5000
Microscopio quirúrgico
Leica Microsystems, Seúl, Corea
EZ4HD
Máquina de anestesia inhalatoria
PerkinElmer, Massachusetts, EE. UU.
Control NFR
NanoFocusRay, JeonJu, Corea
NFR Polaris-G90
software de control microCT
Lucion
Infinitt, Seúl, Corea
Lucion
3D render imaging software
Lab chart 7
ADInstruments, Colorado, USA
Lab chart 7
rCBF
Image J software
Wanye Rasband, NIH, USA
1.49d
análisis de imágenes
Dispositivos/Instrumentos
infusión
Harvard, Massachusetts, USA
pump 22( 55-2226)
Manta homeotérmica
Panlab, Barcelona, España
HB101
Cauterio de bolsillo
Daejong, Seúl, Corea
DJE-39
Matrices cerebrales
Ted pella, CA, EE. UU
15003
sección coronal
Tubo PE-50
Natsume, Tokio, Japón
SP-45(PE-50)
D.I. 0,58 mm D.E. 0,96 mm
Tubo
PE-10Natsume, Tokio, Japón
SP-10 (PE-10)
ID 0,28 mm D.O. 0,61 mm
Aguja de calibre 30
sungshim-médico, Seúl, Corea
Jeringa
CPL-médico, Ansan, Corea
1 y 3 cc
Gasa Panamedic, Cheonan, Corea
Cinta
Scotch, Seúl, Corea
3M-810
Micro pinzas
Fine Science Tools, Vancouver, Canadá
11253-27
Dumont #L5
Micro tijera
Fine Science Tools, Vancouver, Canadá
15000-03
Resorte Vannas
Tijera
Fine Science Tools, Vancouver, Canadá
14084-08
8,5 cm
Sutura de seda negra
Ailee, Busan, Corea
SK6071, SK728
6-0 y 7-0
Reactivos
Meloxicam
Yuhan, Seúl, Corea
Pomada veterinaria
Novartis, Basilea, Suiza
10% Povidona yodada (betadine)
Firson, Cheon-an, Corea
Cloruro férrico
Sigma, Missouri, Estados Unidos
157740-5G
TTC
Amresco, Ohio, EE. UU.
0765-100g
Isoflurano
Hana-Pham, Gyeonggi, Corea
Ifran
100 mL
PBS
Welgene, Daegu, Corea
LB001-02
500 mL
Síntesis
nanopartículas
Solución salina normal
Daihan Pham, Seúl, Corea
48N3AF3
20 mL
Software XGI-8 bomba de . de de oro
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