Imágenes de daño cerebral inducido por hipoxia-isquemia cerebral en un modelo de ratón

Resumen

Fuente: Ouyang, Y., et al. Imágenes simultáneas de PET/MRI durante la hipoxia-isquemia cerebral en ratones. J. Vis. Exp. (2015)

Este video muestra una técnica para evaluar la lesión por hipoxia cerebral a través de la tomografía por emisión de positrones (PET) y la resonancia magnética (RM) simultáneas. Un ratón anestesiado se somete a una ligadura de la arteria carótida común (CCA), lo que reduce el flujo sanguíneo a un hemisferio cerebral y lo predispone a lesiones inducidas por hipoxia. La PET y la RMN evalúan el metabolismo de la glucosa y los cambios estructurales durante la hipoxia. La resonancia magnética detecta la difusión restringida del agua, mientras que la PET revela una menor absorción de glucosa, lo que indica estrés celular inducido por hipoxia y deterioro metabólico.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado animal y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Ligadura unilateral de la arteria carótida común (CCA)

1. Prepare un campo estéril con herramientas y materiales quirúrgicos esterilizados colocados convenientemente. Asegúrese de que la almohadilla térmica se caliente a 37 °C con la sonda de temperatura colocada de forma segura en la almohadilla. Asegúrese de usar un paño estéril para cubrir el sitio quirúrgico.
2. Anestesiar al animal (isoflurano, 1-3% en el aire a 0,5-1 L/min) y colocarlo en posición supina con la cola hacia afu....

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Cirugía
Tijeras quirúrgicas	Pinza Roboz	RS-5852
	Roboz	RS-5237
Pinza para mosquitos Hartman	Miltex	7-26
2x Pinzas de sutura McPherson, 8,5 cm	Instrumentos quirúrgicos y científicos precisos	4473	Es útil reducir el ancho de apertura con una banda en las pinzas utilizadas para sujetar la arteria carótida
6-0 sutura de seda trenzada recubierta de silicona con aguja 3/8 C-1	Covidien Sofsilk	S-1172
Sistema de manta homeotérmica	Harvard Apparatus	507220F
Super pegamento	(genérico)
Caudalímetro de hipoxia
para O₂	Alicat Scientific	MC-500SCCM-D
Flometer para N₂	Alicat Scientific	MC-5SLPM-D
Medidor de O₂	MSA	Altair Pro
Imagen
7.05 Tesla Sistema de resonancia magnética	Bruker	BioSpec	20 cm de diámetro interior con gradiente establecido. Software Paravision 5.1.
Volumen Tx/Rx Bobina 1H, 35mm ID	PET Bruker	T8100
	(Interno)		4x24 detectores LSO-PSAPD,
10x10 LSO array por detector,
paso de cristal de 1,2 mm y 14 mm de profundidad. 14 x 14 mm PSAPD. Campo de visión: 60x35mm. Ventana de energía de 350-650 keV. Ventana de temporización de 16 ns.
Canulación de vasos Pinza Dumont	Roboz	RS-4991
PE-10 tubo de polietileno	BD Intramedic	427401
bomba de infusión	Braintree Scientific	BS-300
Equipo de monitoreo y compuerta de animales	Small Animal Instruments Inc.	Modelo 1025	Solo se utiliza el control de la respiración
Cama para animales con regulación de temperatura	(Interna)

Sistema