Imágenes multiespectrales de reflectancia difusa del flujo sanguíneo cerebral y la estructura tisular de ratas

Resumen

Fuente: Nishidate, I., et al. Evaluación simultánea de la hemodinámica cerebral y las propiedades de dispersión de la luz del cerebro de rata in vivo utilizando imágenes de reflectancia difusa multiespectral. J. Vis. Exp. (2017)

Este video demuestra el uso de imágenes multiespectrales de reflectancia difusa para analizar el flujo sanguíneo cerebral, los niveles de oxígeno y los cambios en la estructura del tejido en una rata anestesiada, proporcionando información sobre la hemodinámica y la morfología del cerebro en diversas condiciones.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité institucional local de cuidado animal y la junta de revisión veterinaria de JoVE.

1. Adquisición de imágenes de muestra
   Nota: Las imágenes de intensidad de luz reflejada difusamente del cerebro de rata expuesto a nueve longitudes de onda se capturan y guardan en el disco duro de una computadora personal utilizando las mismas condiciones de adquisición.
   1. Coloque suavemente la rata en el escenario y ajuste lentamente el nivel del escenario para que la cámara pueda enfocar la superficie del cerebro de la rata.
   2. Seleccione el comando "guardar" en el menú de archivos para guardar una imagen en un archivo.
   3. Cambie la ubicación del filtro girando la rueda de filtros.
   4. Guarde una imagen en las otras longitudes de onda de acuerdo con el proceso descrito anteriormente. El nombre del archivo debe identificar la muestra y la longitud de onda (e.g., R500, R520, R540 ... R760).
2. Adquisición de imágenes oscuras
   NOTA: La cámara CCD (dispositivo de acoplamiento cargado) puede generar una intensidad de luz en respuesta a una señal eléctrica. Sin embargo, hay una salida menor debido al ruido en los circuitos eléctricos y los detectores, incluso si la luz no ingresa al detector; A esto se le llama ruido de corriente oscura. Para medir con precisión la intensidad espectral de la luz, el componente de corriente oscura debe registrarse como una imagen oscura y luego restarse de la señal medida. La imagen oscura es una imagen tomada con la trayectoria de la luz bloqueada.
   1. Apague la fuente de luz de la lámpara halógena.
   2. Bloquee el paso de la luz al sistema de cámaras CCD mediante una placa de protección.
   3. Seleccione el comando "guardar" en el menú de archivos para guardar una imagen en un archivo. El nombre del archivo debe identificar la muestra (e.g., Dark).

Materiales