Administración intratecal de virus en un modelo de ratón para el tratamiento de enfermedades del sistema nervioso central

Resumen

Fuente: Li, D., et al. Inyección intratecal directa de virus adenoasociados recombinantes en ratones adultos. J. Vis. Exp. (2019)

Este video muestra el procedimiento para la inyección intratecal de virus adenoasociados (AAV) en el líquido cefalorraquídeo (LCR) de un ratón despierto, que cubre la preparación de la jeringa, la alineación de la columna vertebral y la inserción precisa de la aguja. Este método valida la administración de genes dirigidos, lo que respalda su potencial para las terapias del SNC.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado animal institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Preparación de la solución madre de clorhidrato de lidocaína al 20%

1. Pesar 2 g de clorhidrato de lidocaína. Agregue 5-6 ml de agua estéril y agite suavemente. Aumente el volumen a 10 ml con agua estéril.
2. 1.2 Filtrar la solución madre a través de filtros de 0,2 micras. Alícuota la solución madre, 1 ml por tubo de microcentrífuga de 1,5 ml, y séllala con una película de sellado. Conservar a 4 °C.

2. Entrega directa de AAV intratecal en ratones despiertos

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
FVB/NJ ratones	Charles River Laboratories China
Clorhidrato de lidocaína monohidrato	HEOWNS	73-78-9
AAV	Viral Vector Core del Centro de Terapia Génica de la Universidad de Jeringa
de Medicina de Massachusetts de 25 μL / aguja de 27-30 g	GASTIGHT	1702
70% de etanol	WEN ZHI
Gasa	Wei AN	5171112	8 cm * 10 cm * 12 cm

Hamilton de la Escuela