Efectos del bloqueo del ganglio simpático inducido por etanol en la regeneración nerviosa en un modelo canino

Resumen

Fuente: Shionoya, Y., et al. Aplicaciones de bloqueo del ganglio simpático cervical inducido por etanol para promover la regeneración del nervio alveolar inferior canino utilizando un nervio artificial. J. Vis. Exp. (2018)

Este video demuestra un modelo canino para la regeneración del nervio alveolar inferior (IAN) utilizando un andamio biodegradable y un bloqueo simpático inducido por etanol. El procedimiento consiste en acceder quirúrgicamente al ganglio simpático cervical e inyectar etanol para inducir la vasodilatación. El aumento resultante en el flujo sanguíneo al sitio de la lesión, combinado con la regeneración axonal guiada por células de Schwann, promueve la regeneración nerviosa.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado animal institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Anestesia y preparación de la piel

1. Anestesiar al perro con una mezcla de 5 mg/kg de clorhidrato de ketamina y 1 mg/kg de xilacina mediante una inyección intramuscular.
2. Intubar con un tubo traqueal de 7,5 mm de diámetro y 25 cm de longitud.
3. Coloque al perro en la posición lateral derecha. Mantener anestesia general con sevoflurano al 3,2% con oxígeno (1,0 L/min).
4. Use una almohadilla térmica para mantener la temperatura corporal a 37 ° C.
5. Aplicar un gel oftálmico sobre la superficie anterior de los ojos para evitar la abrasión corneal.
6. Afeite cuidadosamente el campo quirúrgico (área del lado izquierdo del pecho) con una maquinilla quirúrgica. Rocíe una cantidad sustancial de solución alcohólica sobre el sitio operatorio. Espere al menos 15 segundos. Repita la aplicación 3 veces.
7. Registre la frecuencia cardíaca y la saturación de oxígeno durante la cirugía.

2. Reconstrucción del nervio alveolar inferior con tubo de colágeno con ácido poliglicólico (PGA-C): Desarrollo del modelo de solo reconstrucción

1. Inyecte 3 ml de lidocaína al 1% con una aguja de 27 G en la encía mandibular izquierda como anestésico local y analgésico.
2. Realizar una incisión transversal de 5 cm con una hoja de bisturí número 15 en la encía mandibular izquierda para exponer la mandíbula del animal.
3. Utilice vibraciones ultrasónicas piezoeléctricas para moler la cara proximal de la mandíbula en un rectángulo de 3 cm × 8 mm a través del foramen mentoniano posterior.
   NOTA: La frecuencia de vibración fue de 28 a 32 kHz.
4. Retire la parte frontal de la placa ósea mandibular (dimensiones, 3 cm × 8 mm) para exponer la IAN izquierda (Figura 1A).
   NOTA: El sitio de reconstrucción corresponde al ápice de la raíz del primer molar
5. Transecto la IAN con un bisturí para extraer un segmento de 10 mm.
6. Inserte los muñones proximales y distales del nervio cortado en el tubo nervioso a una profundidad de 2 mm.
7. Uso 8-0 suturas de nailon y un microscopio quirúrgico con un aumento de 8X para suturar el tubo a las terminaciones nerviosas proximales y distales (Figura 1B).
8. Regrese la placa ósea a su sitio original en la mandíbula.
9. Cierre la herida con suturas de nailon 4-0.
10. Un día después de la cirugía, confirme que la placa ósea mandibular esté en su posición correcta.
    1. 4.10.1 Realice imágenes de tomografía computarizada (TC) del hueso facial bajo anestesia. Configure los parámetros de TC de la siguiente manera: 120 kVp, 200 mAs, 0,5 mm/s, 0,5 mm de espesor de corte.
       1. Administrar anestesia con una mezcla de 5 mg/kg de clorhidrato de ketamina y 1 mg/kg de xilacina (Figura 2).
11. Administre ampicilina (100 mg/día) como antibiótico y paracetamol (100 mg/día) como analgésico durante una semana después de la cirugía.

3. Bloqueo del ganglio simpático cervical inducido por etanol (CSGB): Desarrollo del modelo de reconstrucción + CSGB

1. Realice la reconstrucción de IAN como se describe en la sección 2 y espere una semana para la recuperación.
2. Anestesiar al animal con sevoflurano al 1,5% en oxígeno (4 L/min) y aire (6 L/min). Afeitar y limpiar el campo quirúrgico previsto, como se describe en la sección 3.
3. Marque la línea de incisión con un marcador cutáneo quirúrgico dibujando una línea en el área del lado izquierdo del pecho (Figura 3, la línea de incisión tiene 20 cm de longitud).
4. Inyecte 5 ml de lidocaína al 1% con una aguja de 21 G en el área del lado izquierdo del tórax como anestésico local y analgésico.
5. Haga una incisión en la piel del pecho del lado izquierdo con una hoja de bisturí número 10.
6. Haga una incisión en la capa de grasa con un bisturí eléctrico para exponer la fascia muscular.
7. Exponga el músculo serrato ventral y el músculo escaleno.
8. Elevar el músculo serrato ventral y el músculo escaleno de ventral a dorsal para exponer la segunda y tercera costilla (Figura 4).
9. Realizar una toracotomía lateral izquierda en el segundo y tercer espacio intercostal para exponer el ganglio simpático cervical izquierdo (Figura 5).
10. Inyecte 0,2 ml de etanol al 99,5% en el ganglio simpático cervical con una aguja de 30 G bajo visualización directa (Figura 6).
11. Cierre el espacio intercostal con puntos absorbibles 1-0 interrumpidos.
12. Cierre la piel con puntos de nylon 3-0 interrumpidos.
13. Administre ampicilina (100 mg/día) como antibiótico y paracetamol (100 mg/día) como analgésico durante una semana después de la cirugía.
14. A la semana 1 semana después de la CSGB, mida la temperatura de la piel del rostro con termografía infrarroja para confirmar la CSGB.

Resultados

Figura 1: Nervio alveolar inferior izquierdo (IAN) antes y después de la reconstrucción. A) Imagen previa a la reconstrucción del IAN izquierdo después de haber sido expuesto por el extracción de hueso. B) Imag...

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Surgical Clippers	Roboz Surgical Instrument Company	RC-5903
Bisturí desechable (n.º 15)	Kai medical	219ABBZX00073000
VarioSurg3	Nakanishi	VS3-LED-HPSC, E1133	Cirugía piezoeléctrica para el procesamiento óseo
4-0 suturas de nailon	Ethicon	8881H
8-0 suturas de nailon	Ethicon	2775G
Sulfato de isepamicina	Nichi-Iko	620005641
Bisturí desechable (No.10)	Kai medical	219ABBZX00073000
Aguja de calibre 30	Nipro	1134
1-0 puntadas absorbibles	Ethicon	J347H
3-0 Puntadas de nailon	Ethicon	8872H
Neo Thermo	NEC Avio	TVS-700	Termografía infrarroja