Imágenes in vivo del transporte de líquido cefalorraquídeo en un cerebro de ratón mediante macroscopía de fluorescencia

Resumen

Fuente: Sweeney, A. M., et al. Imágenes in vivo del transporte de líquido cefalorraquídeo a través del cráneo de ratón intacto mediante macroscopía de fluorescencia. J. Vis. Exp. (2019)

Este video demuestra el proceso de visualización del flujo de líquido cefalorraquídeo (LCR) en un cerebro de ratón mediante imágenes de fluorescencia. Se inyecta un marcador fluorescente en la cisterna magna (CM), lo que permite rastrear su movimiento con LCR a través de los espacios subaracnoideos y perivasculares. Las imágenes de lapso de tiempo capturan el viaje del marcador, destacando su distribución en el tejido cerebral a través de las arteriolas.

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado animal institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Preparación de la cánula de la cisterna magna, la placa de la cabeza y el soporte de la cabeza

1. Esterilice todos los instrumentos quirúrgicos y las placas de la cabeza antes de la cirugía.
   NOTA: Los trazadores fluorescentes se administran directamente en el LCR a través de una canulación de la cisterna magna.
2. Brevemente, con un destornillador de aguja, rompa la punta de una aguja de 30G x 12,7 mm (1/2 pulgada), 3/4 del camino hacia abajo, y coloque el extrem....

Resultados

Figura 1. Imágenes macroscópicas transcraneales. (A) Esquema de la configuración de imágenes macroscópicas. (B) Vista dorsal de la posición de la placa de la cabeza en el cráneo. El hueso interparietal y los.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
0.25% Bupivacaína HCl			Jeringa
hermética de 100 μL Vivarium de la Universidad de Rochester Modelo 1710 TLL, PTFE Luer Lock	Polvo
	Fisher Scientific	NC9991371
Carprofeno			Universidad de Rochester Vivarium
Clorhexidina	Prevantics	B10800
CMOS Cámara	Hammamatsu	ORCA Flash 4.0
Placa de cabeza	Universidad de Rochester	Sin catálogo #	Hecho a medida en el taller de máquinas de la Universidad de Rochester
Cauterización de alta temperatura	Bovie Medical Corporation	AA01
Acelerador instantáneo Bob	Smith Industries	BSI-151
Isoflurano - Fluriso	Vet One	502017	Universidad de Rochester Vivarium
Ketamina			Strong Memorial Hospital
Pharmacy Krazy Glue	Elmer's Products, Inc	No hay catálogo #, ver enlace en comentarios	https://www.amazon.com/Krazy-Glue-KG48348MR-Advance-Multicolor/dp/B000BKO6DG
Cinta quirúrgica Micropore	Fisher Scientific	19-027-761
Paraformaldehído	Sigma-aldrich	P6148
PE10 - Polietileno .011" x .024" por pie, 100 pies continuos	Braintree Scientific	PE10 100 FT
Bomba 11 Elite Solo Infusión Jeringa Doble	Harvard Apparatus	70-4501
PURALUBE VET POMADA	Dechra
Puritan PurSwab Bastoncillos de limpieza con punta de algodón	Fisher Scientific	22-029-553
Microscopio de zoom macro	Olympus	MVX10
Placa de soporte de cabeza simple (para ratones)	Narishige International USA Inc	MAG-1
Agujas de un solo uso, BD Medical	VWR	BD305106
Almohadillas de preparación de alcohol estéril	Fisher Scientific	22-363-750
LED sintonizable	PRIOR Lumen 1600-LED
Xilacina			Universidad de Rochester Vivarium

de cemento dental de A-M Systems 81020 de Hamilton Company