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Inducción optogenética de depresión a largo plazo para suprimir el comportamiento de búsqueda de narcóticos en ratas

7 de agosto de 2025

En este artículo

Resumen

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Fuente: Rich, M. T., et al. Uso de la optogenética para revertir la neuroplasticidad e inhibir la búsqueda de cocaína en ratas. J. Vis. Exp. (2021)

Este video demuestra el uso de la optogenética para inducir depresión a largo plazo (LTD) en el núcleo geniculado medial a las sinapsis de la amígdala lateral (MGN-LA), debilitando el comportamiento de búsqueda de narcóticos inducido por señales en un modelo de rata. La rata, implantada quirúrgicamente con fibras ópticas y transducida viralmente para expresar canales iónicos sensibles a la luz, se somete a estimulación optogenética con pulsos ópticos de baja frecuencia, lo que desencadena la liberación de neurotransmisores y el debilitamiento sináptico. Este proceso reduce la transmisión sináptica de MGN-LA a través de la internalización del receptor de neurotransmisores, lo que finalmente interrumpe la asociación entre las señales y el comportamiento de búsqueda de drogas.

Protocolo

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Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado animal institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Cateterismo intravenoso de roedores, administración de virus e implantación de fibra óptica

  1. Prepare a los animales para la cirugía.
    1. Anestesiar completamente a las ratas con el anestésico de su elección según las pautas institucionales. Una opción es el clorhidrato de ketamina (87,5-100 mg/kg, intramuscular [i.m.]) y el clorhidrato de xilacina (5 mg/kg, i.m.). Asegúrese de que la rata esté completamente anestesiada verificando la falta de un reflej....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
0.9% SalineFisher ScientificNC0291799
A.M.P.I. StimulusIso-Flex
AAV5.hSyn.oChIEF.tdTomatoDuke Viral Vector Core (a través de Roger Tsien)#268 
AAV5.hSyn.tdTomate (Control)Duke Viral Vector Core Control
Lágrimas artificiales (ungüento oftalmológico)Covetrus70349
BetadineButler Schein38250
Cocaína HClNIDA Drug Supply Center9041-001
Controlador de temperatura de doble canalWarner InstrumentsTC-344C
EtanolUniversidad de Pittsburgh Química Almacén200C5000
Tapas de polvo de férulaLabsCAPLTapas de polvo de plástico blanco para casquillos de 1.25 mm
Mangas de acoplamiento de férulasLentes dóricasF210-3011Sleeve_BR_1.25, Bronce, 1.25 mm
ID VirolasProductos de fibra de precisiónMM-FER2007C-2300Ø1,25 mm Férula cerámica multimodo LC/PC, tamaño de orificio de Ø230 μm
Fibra ópticaThor LabsFP200URTfibra multimodo con núcleo de 200 μm (0,5 NA)
Junta rotativa de fibra ópticaPrizmatix(Pedido en Amazon)Conector FC-FC de 18 mm de diámetro para fibra
Herramienta de pelado de fibraThor LabsT12S21
GentamicinaHenry Schein6913 
Jeringa HamiltonHamilton8008510 μL volumen, calibre 26, 2 pulgadas, estilo de punto 3
Pistola de calorAllied Electronics972-6966250 V, 750-800 °F
Epoxy curable por calorProductos de fibra de precisiónPFP-353ND-8OZ
HeparinaHenry Schein55737
Ácido clorhídricoFisher Scientific
Ketamina HClHenry Schein55853La ketamina es una sustancia controlada y debe manipularse de acuerdo con las pautas institucionales
Henry Schein9846 Lactate Ringer
, controlador y acoplador de láser a fibraSistemas láser OEMBL-473-00100-CWM-SD-xx-LED-0Láser de estado sólido bombeado por diodo de 100 mW, 473 nm (una opción)
LidocaineButler Schein14583
Thor LabsPM100DConsola compacta de medidor de energía con pantalla digital
Adhesivo instantáneo LoctiteGrainger5.00E+207
Molecular DevicesMULTICLAMP700B / Digidata 1440A
Bomba de microinyectorHarvard Apparatus70-4501Micromanipulador de jeringa doble
Sutter InstrumentsMPC-200/ROE-200
Orthojet cemento dental, líquidoLang Dental1504BLKnegro
Orthojet cemento dental, polvoLang Dental1530BLKContemporary powder, negro
Cables de conexiónThor LabsFP200ERTMultimodo, FT030 Tubería
Rimadyl (Carprofeno)Henry Schein24751
Cámaras de autoadministración/SoftwareMed AssociatesMED-NP5L-D1
Tornillos de máquina de acero inoxidableWW Grainger6GB25M2-0.40mm Tornillo de máquina, Pan, Phillips, A2 Acero inoxidable, Liso, 3 mm de longitud
Adaptador estereotáxico para férulasThor LabsXCL
Stereotaxic FrameStoelting51603
Herramientas de ciencia fina18020-50Hilo de seda; Tamaño: 5/0, Diámetro: 0.12 mm
Adhesivo tisular VetbondCovetrus1505
Thor 219405490Láser deSensor de luz Amplificador de microelectrodos/adquisición de datos Hilo de sutura

Reimpresiones y permisos

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Etiquetas

N cleo geniculado medialam gdala lateralpulsos de baja frecuenciacanales i nicos sensibles a la luztransmisi n sin pticainternalizaci n de receptores de neurotransmisorescomportamiento inducido por se ales

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