Inducción de una convulsión electroconvulsiva aguda en un modelo de rata

Resumen

Fuente: Jang, S., et al, Convulsiones electroconvulsivas en ratas y fraccionamiento de sus hipocampos para examinar los cambios inducidos por convulsiones en las proteínas de densidad postsináptica. J. Vis. Exp. (2017)

Este video demuestra la inducción de una convulsión electroconvulsiva aguda (ECS) en un modelo de rata para estudiar la neuroplasticidad inducida por convulsiones. Los investigadores aplican estimulación eléctrica a través de electrodos de clip para los oídos, lo que desencadena la hiperexcitabilidad neuronal y el clonus. Este modelo ayuda a investigar la plasticidad sináptica, los mecanismos convulsivos y los efectos terapéuticos relacionados con la terapia electroconvulsiva (TEC).

Protocolo

Todos los procedimientos que involucran modelos animales han sido revisados por el comité de cuidado animal institucional local y la junta de revisión veterinaria JoVE.

1. Inducción del SEC agudo

NOTA: Consulte la Figura 1B, panel superior.

1. Humedezca las pinzas para los oídos con solución salina estéril y asegúrese de que estén saturadas.
2. Moje las orejas de una rata con solución salina estéril envolviéndolas en una gasa empapada en solución salina. Una vez que estén mojados, retira la gasa.
3. Coloque un clip por oreja y colóquelo más allá de la banda principal del cartílago.
4. Confirme en la máquina ECS que se ha establecido un bucle verdadero; si no, aparecerá un mensaje de error o una lectura de "1" en la máquina.
5. Usa un guante grueso que no sea de metal. Mientras sostiene suavemente a la rata con una mano enguantada, presione el botón "SHOCK" durante unos segundos y suelte lentamente el agarre de la rata para observar la convulsión. Para el control simulado de "no agarrotamiento" (NS), maneje la rata de manera idéntica, pero no entregue la corriente.
6. Desconecte las pinzas para las orejas cuando comience el clonus y registre el comportamiento convulsivo de acuerdo con una escala revisada de Racine que incluye "movimientos faciales y de la boca" (etapa 1), "asentir con la cabeza" (etapa 2), "clonus de las extremidades anteriores" (etapa 3), "levantarse con el clonus de las extremidades anteriores" (etapa 4) y "levantarse y caer con el clonus de las extremidades anteriores" (etapa 5). La convulsión debe durar aproximadamente 10 s; Registre la duración de la convulsión con un temporizador.
7. Después de la terminación de la convulsión, devuelva a la rata a su jaula de origen. Monitoree a la rata durante otros 5 minutos para asegurarse de que se recupere de las convulsiones. Manténgalo alojado individualmente en la jaula y devuélvalo a la sala de recuperación.
8. Repita la inducción de ECS en la siguiente rata.
9. Monitoree a las ratas durante el resto del día y al menos una vez por la mañana y una vez por la tarde al día siguiente hasta que sean sacrificadas para experimentos.
   NOTA: El método de inducción de ECS podría provocar signos clínicos como un efecto secundario incidental, que requiere atención. Por ejemplo, el protocolo de inducción del SEC podría inducir convulsiones que duran más de 15 s y causar angustia innecesaria a las ratas. En este caso, termine la convulsión con diazepam (10 mg / kg, i.p.) o pentobarbital (25 - 30 mg / kg, i.p.). Si las ratas desarrollan dificultad respiratoria o anomalías graves de comportamiento después del cese de las convulsiones, eutanasiarlas mediante inhalación de dióxido de carbono seguida de decapitación.

Resultados

Figura 1: Esquema para la inducción del SEC agudo y el SEC crónico. (A) Se conectó una rata a un generador de pulsos a través de electrodos de clip para los oídos y se aplicó una descarga eléctrica (55 mA, 100 pulsos / s dur...

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Sprague-Dawley rat	Charles River Laboratories		ECS suministra
Un generador de pulsos	Ugo Bsile, Comerio, Italia	57800	ECS suministra