El número de noviembre del Journal of Visualized Experiments comienza con una serie de experimentos conductuales para medir la capacidad de prensión en primates. Investigadores de la Universidad de Friburgo demuestran cuatro tareas de agarre y alcance, que siguen pasos comunes para restringir cómodamente al animal y posicionar correctamente su cabeza. La prueba del tablero de Brinkman se utiliza para evaluar el alcance hacia objetos estáticos, mientras que el tablero de Brinkman giratorio presenta una condición en la que los animales deben anticipar la posición del objeto. La prueba de la caja de Brinkman permite investigar la destreza en condiciones en las que el mono tiene menos grados de libertad para realizar la tarea de agarre y no puede usar la visión para guiar el movimiento. Mientras que las pruebas del tablero y la caja de Brinkman dependen únicamente del análisis de video obtenido durante los experimentos, para generar datos, el aparato de la tarea de alcance a un cajón cuenta con detectores que monitorean las fuerzas de agarre y carga, así como la posición del cajón, lo que hace que esta prueba sea adecuada para medir la fuerza y la capacidad de prensión. En conjunto, estas cuatro pruebas ofrecen un enfoque potente para evaluar el control motor en la extremidad anterior distal, y el grupo de Friburgo presenta datos tanto de estudios con lesiones como de experimentos destinados a probar terapias potenciales para lesiones de la médula espinal.
En Clinical and Translational Medicine, colaboradores de la División de Investigación Quirúrgica del Hospital Universitario de Zúrich y del Instituto de Ciencias de Animales de Laboratorio de la Universidad de Zúrich trabajan juntos para implantar un dispositivo de radiotelemetría en ratones, que puede utilizarse para obtener mediciones fisiológicas en animales que se mueven libremente. Los dispositivos constan de dos electrodos, capaces de medir la actividad biopotencial (ECG, EEG o EMG) así como la temperatura, y un transmisor de radio ligero (de 1-200 Hz de ancho de banda) que puede implantarse en la cavidad abdominal. El estrés provocado por el manejo de los animales, así como la anestesia, son elementos de confusión conocidos que afectan las mediciones fisiológicas, por lo que los dispositivos de radiotelemetría son una forma conveniente de obtener datos fisiológicos de los animales en un estado natural e inalterado, además de permitir la medición simultánea de múltiples animales.
JoVE también amplía su conjunto de protocolos de electroforesis con un método para introducir macromoléculas en el mesénquima craneofacial de renacuajos en desarrollo de Xenopus laevis, procedente del Laboratorio Liu del King's College de Londres. Los renacuajos de Xenopus se transfieren a una cámara de electroforesis, donde pueden inyectarse con ácidos nucleicos y luego someterse a electroforesis, lo que permitirá la entrega de vectores de expresión o morfolinos al tejido craneofacial en desarrollo. La entrega génica a cartílago diferenciado es inherentemente problemática, y el laboratorio Liu muestra que, mediante electroforesis, los morfolinos pueden introducirse en tejidos procartilaginosos y cartilaginosos del renacuajo de Xenopus a lo largo de una serie de etapas de desarrollo.
En Bioingeniería, el grupo Zuckerman del Laboratorio Nacional Lawrence Berkeley ilustra su método para sintetizar peptoides, una clase de moléculas orgánicas biológicamente activas que se asemejan a los péptidos, pero cuyas cadenas laterales están unidas al nitrógeno del enlace peptídico, en lugar del carbono alfa, lo que los hace resistentes a la proteólisis. El grupo Zuckerman demuestra la síntesis por submonómeros, en la que los monómeros peptídicos se añaden secuencialmente mediante reacciones de bromoacetilación y desplazamiento de bromuro, permitiendo un control preciso de la longitud y composición de la cadena de peptoide. Además, el hecho de que la síntesis se realice sobre resina de amida, y por tanto sea una síntesis en fase sólida, simplifica enormemente la purificación de los peptoides sintetizados. Estos autores también muestran cómo los peptoides recién sintetizados pueden inducirse a autoensamblarse en estructuras altamente ordenadas, denominadas nanohojas, que pueden visualizarse mediante microscopía de fluorescencia y microscopía electrónica de barrido. Estas nanohojas podrían servir como una plataforma potencial para miméticos de proteínas y membranas.
Más adelante en el mes, JoVE presenta un ensayo para medir la actividad fagocítica en células expuestas a muestras clínicas de anticuerpos en nuestra sección de Inmunología e Infección. Colaboradores del Hospital General de Massachusetts y del Colegio Dartmouth demuestran que las células THP-1 engullen perlas recubiertas con antígenos unidos a anticuerpos en microscopía de video de lapso de tiempo, y presentan un método basado en placas de citometría de flujo para cuantificar el grado de fagocitosis. Nuestros autores utilizan este método para determinar la capacidad de diferentes muestras de anticuerpos para inducir fagocitosis, como las procedentes de pacientes con VIH tratados y no tratados con terapias antirretrovirales.
Este resumen del contenido de JoVE en noviembre ofrece una breve descripción general de los artículos destacados del mes. Otros artículos notables incluyen métodos para la imagen en vivo de la dinámica del citoesqueleto en células endoteliales, la medición del flujo de calcio en cardiomiocitos y la electrofisiología de corte de neuronas adultas nacidas en el bulbo olfativo.