El Journal of Visualized Experiments (JoVE) comienza 2012 publicando su artículo número 1500, que se centra en un método para analizar la composición de radicales libres del humo de cigarrillo. Aunque se considera que el alquitrán del tabaco es el agente más carcinogénico presente en el humo de cigarrillo, los radicales libres son moléculas bien conocidas por causar cáncer, y actualmente no se conoce el nivel de estos carcinógenos contenidos en el humo de cigarrillo. El método empleado en este artículo combina el uso de un dispositivo de fumado de un solo puerto, que simula la inhalación del cigarrillo, con la espectroscopía de resonancia de espín electrónico (ESR), una técnica que mide la energía de espín emitida por los electrones desapareados en los radicales libres. Una modificación importante del dispositivo de fumado de un solo puerto utilizado en este artículo es la introducción de una trampa de nitrógeno líquido delante de la trampa de espín. El nitrógeno líquido elimina el vapor de agua del humo de cigarrillo y mejora considerablemente los espectros de ESR como resultado.
Además de medir la concentración de radicales libres presentes en el humo del cigarrillo, se introducen antioxidantes vegetales en filtros de cigarrillo modificados y se obtienen los espectros de resonancia de espín electrónico (ESR) del humo del cigarrillo que pasa a través de estos filtros. Se observó que el extracto de semilla de uva y el licopeno tienen los efectos más significativos en la eliminación de radicales libres, y si se pueden desarrollar métodos rentables para incluir estas moléculas en los filtros de cigarrillo, sería posible crear un cigarrillo menos dañino.
En Medicina Clínica y Traduccional, JoVE presenta un método analítico para determinar el índice de girificación local (lGI), una medida del grado de plegamiento cortical. Los pliegues corticales se desarrollan durante los primeros meses posteriores al nacimiento, y los eventos adversos durante este periodo pueden provocar anomalías en la anatomía superficial del cerebro, que eventualmente podrían correlacionarse con trastornos neuropsiquiátricos.
La herramienta de análisis desarrollada para calcular el índice de girotomía local es Freesurfer, que puede convertir escáneres de resonancia magnética ponderados en T1 en reconstrucciones tridimensionales de la corteza. Se crean reconstrucciones separadas para las interfaces gris/blanca y gris/pial, que se ajustan manualmente antes de calcular el lGI. Tras una operación de suavizado, se comparan regiones circulares de las superficies pial y gris/blanca, con el fin de calcular el lGI en miles de puntos distribuidos por todo el cerebro. Freesurfer facilita y hace accesible el análisis de la girotomía a clínicos y científicos del cerebro interesados en comparar el grado de plegamiento cortical entre diferentes individuos en estados normales y patológicos.
El artículo de Inmunología y Infección de JoVE para el mes de enero continúa con la tradición de la revista de publicar metodologías de vanguardia en la investigación de enfermedades transmitidas por vectores. Específicamente, este artículo amplía la colección integral de protocolos de JoVE para la investigación de la malaria, extendiendo nuestra biblioteca hacia la malaria cerebral, una afección devastadora con alta susceptibilidad en niños. En resumen, este protocolo consiste en exponer una monocapa de células endoteliales cerebrales humanas, cultivadas en placas de Petri, a glóbulos rojos infectados con Plasmodium falciparum. Tras pasos de lavado y enriquecimiento, se pueden aislar y caracterizar ampliamente parásitos con potencial para infectar el cerebro.
En Neurociencia, JoVE presenta un método para estudiar la migración de las células de la cresta neural. Estas células son un tipo transitorio, pluripotente y en desarrollo que, además de convertirse en tejido neuronal, puede diferenciarse en músculo liso, células cromafines, cartílago y hueso. Los embriones de pollo se preparan cuidadosamente para poder aislar la región del tronco y extirpar el tubo neural, que se cultiva durante la noche sobre cubreobjetos recubiertos con fibronectina, lo que permite que las células de la cresta neural emigren desde el tubo neural. Tras la eliminación del tubo neural, los cubreobjetos que contienen las células de la cresta neural cultivadas se transfieren a una cámara Zigmond modificada, una cámara que permite establecer un gradiente de concentración de un agente quimiotáctico putativo a través del cultivo. Se utiliza imágenes de lapso de tiempo seguidas del análisis de las trayectorias celulares para evaluar el potencial quimiotáctico de las moléculas cargadas en la cámara Zigmond, obteniendo así información sobre las señales moleculares que guían la migración de este importante tipo celular en desarrollo.
Estos artículos destacados comprenden cuatro de los cincuenta protocolos en video que se publicarán en enero. Otros artículos notables incluyen métodos para visualizar las estructuras del cutícula de c. elegans, imágenes térmicas del dolor muscular de aparición tardía, cultivo del mesencéfalo ventral en rebanadas organotípicas e inducción de aterosclerosis en ratones.