El Journal of Visualized Experiments (JoVE) comienza el año 2012 publicando su artículo número 1500, que se centra en un método para analizar la composición de los radicales libres del humo del cigarrillo. Aunque se cree que el alquitrán del tabaco es el agente más cancerígeno en el humo del cigarrillo, los radicales libres son moléculas cancerígenas bien conocidas, y actualmente se desconoce el nivel de estos carcinógenos contenidos en el humo del cigarrillo. El método empleado en este artículo combina el uso de un dispositivo de fumar de un solo puerto, que simula la inhalación de un cigarrillo, con espectroscopía de resonancia de espín electrónico (ESR), una técnica que mide la energía de espín emitida por los electrones desapareados en los radicales libres. Una modificación importante del dispositivo de fumar de un solo puerto utilizado en este artículo es la introducción de una trampa de nitrógeno líquido frente a la trampa de giro. El nitrógeno líquido elimina el vapor de agua del humo del cigarrillo y, como resultado, mejora en gran medida los espectros de ESR.
Además de medir la concentración de radicales libres que se encuentran en el humo del cigarrillo, se introducen antioxidantes vegetales en filtros de cigarrillos modificados y se obtienen los espectros ESR del humo del cigarrillo que pasa a través de estos filtros. Se observó que el extracto de semilla de uva y el licopeno tienen los efectos más significativos sobre los radicales libres, y si se pueden desarrollar medios rentables para incluir estas moléculas en los filtros de los cigarrillos, se podría crear un cigarrillo menos dañino.
En Medicina Clínica y Traslacional, JoVE presenta un método analítico para determinar el Índice de Girificación (lGI) local, una medida de la extensión del plegamiento cortical. Los pliegues corticales se desarrollan durante los primeros meses postnatales, y los eventos adversos durante este tiempo pueden conducir a anomalías en la anatomía de la superficie del cerebro, que en última instancia pueden correlacionarse con trastornos neuropsiquiátricos.
La herramienta de análisis desarrollada para calcular el Índice de Giros local es Freesurfer, que puede convertir resonancias magnéticas ponderadas en T1 en reconstrucciones 3D de la corteza. Se crean reconstrucciones separadas para las interfaces gris/blanco mater y gris/pial, que se ajustan manualmente antes de calcularel l GI. Después de una operación de suavizado, se comparan las regiones circulares de las superficies pial y gris/blanca, con el finde calcular el IG l para miles de puntos en todo el cerebro. Freesurfer hace que el análisis de la girificación sea sencillo y accesible para los médicos y científicos del cerebro, que están interesados en comparar el grado de plegamiento cortical entre diferentes individuos en estados normales y patológicos.
El artículo de JoVE en Inmunología e Infección del mes de enero continúa la tradición de la revista de publicar una metodología de vanguardia en la investigación de enfermedades nacidas por vectores. Específicamente, este artículo se suma a la colección completa de protocolos de JoVE para la investigación de la malaria al ampliar nuestra biblioteca a la malaria cerebral, una condición devastadora con alta susceptibilidad en los niños. En resumen, este protocolo consiste en exponer una monocapa de células endoteliales del cerebro humano, pasadas a placas de Petri, a los glóbulos rojos infectados con Plasmodium falciparum. Después de los pasos de lavado y enriquecimiento, se pueden aislar y caracterizar aún más los altos rendimientos de parásitos, que tienen el potencial de infectar el cerebro.
En Neurociencia, JoVE muestra un método para estudiar la migración de las células de la cresta neural. Estas células son un tipo de célula transitoria, multipotente y en desarrollo que puede, además de convertirse en tejido neuronal, diferenciarse en músculo liso, células cromafines, cartiliaje y hueso. Los embriones de pollo se preparan cuidadosamente, de modo que se pueda aislar la región del tronco y extirpar el tubo neural para su cultivo nocturno en cubreobjetos recubiertos de fibronectina, lo que permite que las células de la cresta neural emigren del tubo neural. Después de la extracción del tubo neural, los cubreobjetos que contienen las células de la cresta neural cultivadas se transfieren a una cámara Zigmond modificada, una cámara que permite establecer un gradiente de concentración de un agente quimiotáctico putativo en todo el cultivo. Las imágenes de lapsos de tiempo seguidas del análisis de las trayectorias celulares se utilizan para evaluar el potencial quimiotáctico de las moléculas cargadas en la cámara de zigmund, proporcionando información sobre las señales moleculares que guían la migración de este importante tipo de célula en desarrollo.
Estos artículos destacados comprenden cuatro de los cincuenta protocolos de video que se publicarán en enero. Otros artículos notables incluyen métodos para visualizar las estructuras de la cutícula de C. elegans, imágenes térmicas del dolor muscular de aparición tardía, cultivo del mesencéfalo ventral en cortes organotípicos e inducción de aterosclerosis en ratones.