Se realizó una corrección en: Preparación de Cultivos Organotípicos de Timo Tratados con 2-dGuo. Se republicó un resumen revisado debido a un error del editor.
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1 de abril de 2012
Se realizó una corrección en: Preparación de Cultivos Organotípicos de Timo Tratados con 2-dGuo. Se republicó un resumen revisado debido a un error del editor.
Se realizó una corrección en: Preparación de cultivos organotípicos de timo tratados con 2-dGuo. Se republicó un resumen revisado debido a un error del editor. El resumen fue corregido a:
En el timo, se sabe que las interacciones entre los precursores de linfocitos T en desarrollo y las células estromales, que incluyen células epiteliales corticales y medulares, desempeñan un papel clave en el desarrollo de un grupo de linfocitos T funcionalmente competentes. Sin embargo, la complejidad del desarrollo de los linfocitos T en el timo in vivo puede limitar el análisis de componentes celulares individuales y de etapas particulares del desarrollo. Los sistemas de cultivo in vitro proporcionan un medio fácilmente accesible para estudiar múltiples procesos celulares complejos. Los sistemas de cultivo de órganos tímicos representan un enfoque ampliamente utilizado para estudiar el desarrollo intratímico de los linfocitos T bajo condiciones definidas in vitro. Aquí describimos un sistema en el que los lóbulos tímicos embrionarios de ratón pueden agotarse de elementos hematopoyéticos endógenos mediante un cultivo previo del órgano en desoxiguanosina, un compuesto que es selectivamente tóxico para las células hematopoyéticas. Además de proporcionar una fuente fácilmente accesible de células estromales tímicas para investigar el papel de los microentornos tímicos en el desarrollo y la selección de los linfocitos T, esta técnica también sustenta enfoques experimentales adicionales que incluyen la reconstrucción in vitro de lóbulos tímicos ainfocíticos con elementos hematopoyéticos definidos, el trasplante de timos ainfocíticos en ratones receptores y la formación de cultivos de órganos tímicos reagregados. (Este artículo se basa en un trabajo informado inicialmente en Methods in Molecular Biology 2007, Vol. 380, páginas 185-196).
desde
En el timo, los timocitos inmaduros CD4+8+ que expresan genes de las cadenas α y β del receptor de células T reordenados al azar experimentan eventos de selección positiva y negativa según su capacidad para reconocer péptidos autólogos/moléculas del complejo principal de histocompatibilidad (MHC) expresados por las células estromales tímicas. El análisis in vivo del papel de las células estromales tímicas durante la selección intratímica resulta difícil debido a la complejidad celular del microentorno tímico en el timo adulto en estado estable, y por la falta de estrategias adecuadas de direccionamiento para manipular la expresión génica en compartimentos estromales tímicos específicos. Hemos demostrado que el microentorno tímico puede manipularse fácilmente in vitro mediante el uso de cultivos organoides de timo reagregados, que permiten la preparación de lóbulos tímicos tridimensionales a partir de células estromales y linfoides definidas. Aunque otros sistemas in vitro sustentan algunos aspectos del desarrollo de linfocitos T, el cultivo organoide de timo reagregado sigue siendo el único sistema in vitro capaz de sostener eventos eficientes de selección de timocitos mediados por las clases I y II del MHC, y por tanto puede utilizarse como una herramienta eficaz para estudiar la regulación celular y molecular de la selección positiva y negativa en el timo.
Se realizó una corrección en: Preparación de cultivos organotípicos de timo tratados con 2-dGuo. Se republicó un resumen revisado debido a un error del editor. El resumen fue corregido a:
En el timo, se sabe que las interacciones entre los precursores de linfocitos T en desarrollo y las células estromales, que incluyen células epiteliales corticales y medulares, desempeñan un papel clave en el desarrollo de un grupo de linfocitos T funcionalmente competentes. Sin embargo, la complejidad del desarrollo de los linfocitos T en el timo in vivo puede limitar el análisis de componentes celulares individuales y de etapas específicas del desarrollo. Los sistemas de cultivo in vitro ofrecen un medio fácilmente accesible para estudiar múltiples procesos celulares complejos. Los sistemas de cultivo de órganos tímicos representan un enfoque ampliamente utilizado para estudiar el desarrollo intratímico de los linfocitos T bajo condiciones definidas in vitro. Aquí describimos un sistema en el que los lóbulos tímicos embrionarios de ratón pueden agotarse de elementos hematopoyéticos endógenos mediante un cultivo previo del órgano en desoxiguanosina, un compuesto que es selectivamente tóxico para las células hematopoyéticas. Además de proporcionar una fuente fácilmente accesible de células estromales tímicas para investigar el papel de los microentornos tímicos en el desarrollo y la selección de los linfocitos T, esta técnica también sustenta otros enfoques experimentales que incluyen la reconstrucción in vitro de lóbulos tímicos ainfoides con elementos hematopoyéticos definidos, el trasplante de timos ainfoides en ratones receptores y la formación de cultivos de órganos tímicos reagregados. (Este artículo se basa en un trabajo publicado inicialmente en Methods in Molecular Biology 2007, Vol. 380, páginas 185-196).
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En el timo, los timocitos inmaduros CD4+8+ que expresan genes de las cadenas α y β del receptor de células T reordenados al azar experimentan eventos de selección positiva y negativa según su capacidad para reconocer péptidos autólogos/moléculas del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) expresados por las células estromales tímicas. El análisis in vivo del papel de las células estromales tímicas durante la selección intratímica resulta difícil debido a la complejidad celular del microentorno tímico en el timo adulto en estado estable, y por la falta de estrategias adecuadas de direccionamiento para manipular la expresión génica en compartimentos estromales tímicos específicos. Hemos demostrado que el microentorno tímico puede manipularse fácilmente in vitro mediante el uso de cultivos organoides de timo reagregados, que permiten la preparación de lóbulos tímicos tridimensionales a partir de células estromales y linfoides definidas. Aunque otros sistemas in vitro sustentan algunos aspectos del desarrollo de linfocitos T, el cultivo organoide de timo reagregado sigue siendo el único sistema in vitro capaz de sostener eventos eficientes de selección de timocitos mediados por las clases I y II del MHC, y por tanto puede utilizarse como una herramienta eficaz para estudiar la regulación celular y molecular de la selección positiva y negativa en el timo.
No se declararon conflictos de intereses.