Este mes de septiembre en JoVE, investigadores de la Facultad de Medicina de la Universidad Libre de Berlín demuestran un nuevo método para estudiar cómo los pacientes que han sufrido un accidente cerebrovascular compensan los defectos en el campo visual. Para ello, nuestros autores utilizan un simulador de conducción equipado con frenos, volante y señales de giro. Mediante software de simulación de conducción y un seguimiento ocular sofisticado, los investigadores pueden comparar el comportamiento de la mirada de pacientes con accidente cerebrovascular mientras se desplazan por recorridos virtuales de conducción con distintos grados de complejidad. Aunque la infartación de la arteria cerebral posterior puede provocar déficits visuales similares en los pacientes, algunos logran desplazarse por los recorridos desarrollando movimientos oculares compensatorios, mientras que otros chocan contra obstáculos peligrosos, como jabalíes. A través del análisis del comportamiento visual compensatorio empleado por los pacientes, nuestros autores ven un gran potencial en el uso de la simulación de conducción como herramienta para rehabilitar a pacientes con accidente cerebrovascular que intentan superar los puntos ciegos en sus campos visuales.
En colaboración con la Universidad de California del Sur, investigadores del Departamento de Oftalmología de la Universidad de Ciencias de la Salud de Oregón presentan un método para medir el flujo sanguíneo total en la retina mediante tomografía de coherencia óptica Doppler (OCT). La retina contiene millones de neuronas que capturan imágenes visuales y las convierten en señales eléctricas, las cuales viajan a través del nervio óptico hacia el cerebro. Los vasos sanguíneos entran en la retina en el disco óptico, donde el nervio óptico se conecta con la retina. Estos vasos suministran oxígeno y nutrientes, y también eliminan desechos. En algunas enfermedades retinianas (como la retinopatía diabética) o en el glaucoma (que afecta al nervio óptico), la vascularización retiniana puede ser anormal. Dado que estas enfermedades son causas principales de pérdida irreversible de la visión, las mediciones del flujo sanguíneo retiniano pueden ser muy útiles en la práctica clínica y en la investigación. A diferencia de los métodos tradicionales de imagen óptica, como el láser Doppler y el Doppler color por ultrasonido, el OCT con láser Doppler puede proporcionar mediciones absolutas del flujo sanguíneo retiniano; estas mediciones se basan en la luz desplazada por el efecto Doppler, que es retrodispersada por los glóbulos rojos mientras fluyen a través de los vasos. Nuestros autores demuestran cómo escanear la retina y el disco óptico con OCT Doppler; luego, las imágenes se califican y analizan con el software DOCTORC, que desarrollaron nuestros autores. Este método muestra una buena reproducibilidad entre evaluadores y métodos. Además, en ojos con glaucoma, las mediciones del flujo sanguíneo retiniano están altamente correlacionadas con la pérdida visual. Por lo tanto, el OCT Doppler representa una herramienta poderosa que puede utilizarse en la investigación y la práctica clínica en oftalmología.
Coincidiendo con la temporada de mosquitos, investigadores del Departamento de Entomología de Virginia Tech demuestran una técnica sencilla y robusta para la cartografía cromosómica de genomas de mosquitos. De entre más de 40 géneros de mosquitos que contienen miles de especies, los investigadores tienen un interés particular en los géneros Anopheles, Aedes, y Culex porque contienen especies que transmiten enfermedades humanas dañinas. Aproximadamente el 90 % del Anopheles gambiae genoma se ha mapeado en ubicaciones cromosómicas; sin embargo, es extremadamente difícil preparar extensiones cromosómicas adecuadas para los géneros Aedes o Culex Aedes género o el Culex género utilizando líneas celulares y técnicas estándar. Para superar este problema, nuestros autores utilizan larvas de mosquito de cuarto estadio, que poseen discos imaginales que producen extensiones cromosómicas de alta calidad. Los investigadores muestran cómo diseccionar los discos imaginales y preparar preparaciones cromosómicas adecuadas para hibridación fluorescente in situ in situ hibridación (FISH). Por lo tanto, es posible realizar la cartografía genómica para mosquitos de los géneros Aedes, Culex y Anopheles Aedes, Culex, y Anopheles géneros. Esta técnica allanó el camino para que los entomólogos elaboraran mapas cromosómicos precisos no solo de mosquitos, sino también de otros insectos.
En el Centro de Investigación de la Universidad Laval de Quebec, los investigadores demuestran un método para rastrear la migración neuronal en el prosencéfalo de ratón. Un sitio importante de neurogénesis en el cerebro de los mamíferos es la zona subventricular, y las neuronas recién formadas migran desde esta región a través del flujo migratorio rostral hacia el bulbo olfatorio. Las células se marcan mediante la inyección estereotáxica de un retrovirus que codifica una proteína verde fluorescente; luego, mediante una combinación de preparación de cortes agudos, imágenes de lapso de tiempo y análisis de imágenes, nuestros autores pueden calcular la velocidad de migración de los neuroblastos marcados. A través del seguimiento cuidadoso de las trayectorias celulares a lo largo de los vasos sanguíneos, este método puede ayudar a elucidar las diferentes señales moleculares y mecanismos celulares que influyen en la migración celular.
Este breve resumen destaca solo algunos artículos en video notables que se publicarán este septiembre en JoVE. También presentamos métodos para rastrear el destino celular en pez cebra mediante proteínas fluorescentes fotoconvertibles, usar micropipetas para probar la rigidez celular e imaginar el comportamiento de proteínas que responden al daño del ADN.