Este septiembre en JoVE, investigadores de la Facultad de Medicina de la Universidad Libre de Berlín demuestran un método novedoso para estudiar cómo los pacientes con accidente cerebrovascular compensan los defectos del campo visual. Para ello, nuestros autores hacen uso de un simulador de conducción completo con frenos, volante e intermitentes. Mediante el uso de software de simulación de conducción y un sofisticado seguimiento ocular, los investigadores pueden comparar el comportamiento de la mirada de los pacientes con accidente cerebrovascular mientras navegan por cursos de conducción virtual con diversos grados de complejidad. Aunque el infarto de la arteria cerebral posterior puede provocar déficits visuales similares en los pacientes, algunos son capaces de navegar a través de los cursos de conducción desarrollando movimientos oculares compensatorios, mientras que otros chocan contra obstáculos peligrosos, como los jabalíes. A través del análisis del comportamiento de la mirada compensatoria empleado por los pacientes, nuestros autores ven un gran potencial para utilizar la simulación de conducción como una herramienta para rehabilitar a los pacientes con accidente cerebrovascular que intentan superar los puntos ciegos en sus campos visuales.
En colaboración con la Universidad del Sur de California, investigadores del Departamento de Oftalmología de la Universidad de Salud y Ciencias de Oregón presentan un método para medir el flujo sanguíneo total en la retina utilizando tomografía de coherencia óptica Doppler (OCT). La retina contiene millones de neuronas que capturan imágenes visuales y las convierten en señales eléctricas, que viajan a través del nervio óptico hasta el cerebro. Los vasos sanguíneos entran en la retina por el disco óptico, donde el nervio óptico se conecta a la retina. Estos recipientes suministran oxígeno y nutrientes, y también eliminan los desechos. En algunas enfermedades de la retina (como la retinopatía diabética) o el glaucoma (que afecta al nervio óptico), la vasculatura de la retina puede ser anormal. Debido a que estas enfermedades son las principales causas de pérdida irreversible de la visión, las mediciones del flujo sanguíneo de la retina pueden ser muy útiles en la práctica clínica y la investigación. A diferencia de los métodos tradicionales de imágenes ópticas, como el láser Doppler y el ultrasonido Doppler color, el láser Doppler OCT puede proporcionar mediciones absolutas del flujo sanguíneo de la retina; estos se basan en la luz desplazada por Doppler, que se retrodispersa de los glóbulos rojos a medida que fluyen a través de los vasos. Nuestros autores demuestran cómo escanear la retina y el disco óptico con Doppler OCT; A continuación, las exploraciones se califican y analizan con el software DOCTORC, desarrollado por nuestros autores. Este método muestra una buena reproducibilidad entre los evaluadores y los métodos. Además, en los ojos con glaucoma, las mediciones del flujo sanguíneo en la retina están altamente correlacionadas con la pérdida de visión. Por lo tanto, el Doppler OCT representa una poderosa herramienta que puede ser utilizada en la investigación oftalmológica y en la práctica clínica.
Coincidiendo con la temporada de mosquitos, los investigadores del Departamento de Entomología de Virginia Tech demuestran una técnica simple y robusta para el mapeo cromosómico de los genomas de los mosquitos. De los más de 40 géneros de mosquitos que contienen miles de especies, los investigadores están particularmente interesados en los géneros Anopheles, Aedes y Culex porque contienen especies que transmiten enfermedades humanas dañinas. Alrededor del 90% del genoma de Anopheles gambia se ha mapeado en ubicaciones cromosómicas; sin embargo, es extremadamente difícil preparar extensiones cromosómicas adecuadas para el género Aedes o el género Culex utilizando líneas celulares y técnicas estándar. Para superar este problema, nuestros autores utilizan larvas de mosquito de 4º estadio, que tienen discos imaginales que producen disperas cromosómicas de alta calidad. Los investigadores muestran cómo diseccionar los discos imaginales y preparar preparaciones cromosómicas adecuadas para la hibridación fluorescente in situ (FISH). Por lo tanto, el mapeo del genoma es posible para los mosquitos de los géneros Aedes, Culex y Anopheles. Esta técnica allanó el camino para que los entomólogos hicieran mapas cromosómicos precisos no solo para los mosquitos, sino también para otros insectos.
En el Centro de Investigación de la Universidad de Laval en Quebec, los investigadores demuestran un método para rastrear la migración neuronal en el prosencéfalo murino. Un sitio importante de neurogénesis en el cerebro de los mamíferos es la zona subventricular, y las neuronas recién nacidas migran desde esta área a través de la corriente migratoria rostral hacia el bulbo olfatorio. Las células están marcadas con un retrovirus inyectado estereotáxicamente que codifica una proteína fluorescente verde; Luego, utilizando una combinación de preparación de cortes agudos, imágenes de lapso de tiempo y análisis de imágenes, nuestros autores pueden calcular la velocidad de migración de los neuroblastos marcados. A través del seguimiento cuidadoso de las trayectorias celulares a lo largo de los vasos sanguíneos, este método puede ayudar a dilucidar las diferentes señales moleculares y mecanismos celulares que influyen en la migración celular.
Este breve resumen destaca solo algunos video-artículos notables que se publicarán este septiembre en JoVE. También presentamos métodos para rastrear el destino celular en peces cebra con proteínas fluorescentes fotoconvertibles, el uso de micropipetas para probar la rigidez celular y obtener imágenes del comportamiento de las proteínas que responden al daño del ADN.