Diferencias Evaluación de Capacidad Competitiva de espermatozoides en<em&gt; Drosophila</em

Resumen

Diferencial espermatozoides capacidad competitiva entre Drosophila Machos con genotipos distintos se pueden determinar a través de experimentos de doble contacto. Cada uno de estos experimentos consiste en uno de los machos de interés y un macho de referencia. Marcadores fácilmente identificables en la progenie permiten la inferencia de la fracción de individuos engendrados por cada macho.

Resumen

La competencia entre los machos conespecíficos para fertilizar los óvulos es uno de los mecanismos de selección sexual, es decir, selección que opera en maximizar el número de eventos de apareamiento con éxito en lugar de sobre la supervivencia y la maximización de la viabilidad ^1. La competencia de esperma representa la competencia entre los machos después de copular con la misma hembra ^2, en el que sus espermatozoides son coincidentes en el tiempo y el espacio. Este fenómeno se ha informado en varias especies de plantas y animales ^3. Por ejemplo, silvestres D. hembras melanogaster por lo general contienen esperma 2-3 machos ^4. Los espermatozoides se almacenan en órganos especializados con limitada capacidad de almacenamiento, lo que podría dar lugar a la competencia directa de los espermatozoides de diferentes machos ^2,5.

Comparando los espermatozoides capacidad competitiva de los diferentes machos de interés (tipos masculinos experimentales) se ha realizado a través de la experimentación de doble acoplamiento controladots en el laboratorio ^6,7. En pocas palabras, una sola hembra está expuesto a dos machos diferentes consecutivamente, uno masculino experimental y un macho de referencia cruzada de apareamiento. El mismo esquema de apareamiento es seguido utilizando otros tipos masculinos experimentales, facilitando así la comparación indirecta de la capacidad competitiva de su esperma a través de una referencia común. La fracción de individuos engendrados por los machos experimentales y de referencia se identifica usando marcadores, que permite estimar la capacidad competitiva de espermatozoides usando expresiones matemáticas simples ^7,8. Además, la capacidad competitiva de esperma puede ser estimado en dos escenarios diferentes dependiendo de si el macho experimental es segundo o primero para aparearse (delito y ensayo de defensa, respectivamente) ^9, que se supone que ser el reflejo de diferentes atributos de competencia.

Aquí se describe un método que ayuda a interrogar al papel de los diferentes factores genéticos que supuestamente subyacen tque fenómeno de la capacidad competitiva de esperma en D. melanogaster.

Introducción

Desde Geoff Parker señaló que la prevalencia de la competencia espermática en los insectos y sus implicaciones evolutivas ^2, una oleada de estudios en Drosophila y otras especies han tratado de arrojar algo de luz sobre este fenómeno en muchos niveles diferentes. Algunos ejemplos de las áreas de interés han sido el estudio de la variación de las poblaciones naturales de ^9,10, su arquitectura genética subyacente y la relevancia de los factores genéticos ^11-14, y su papel en la coevolución entre los sexos ^15,16 conducción. En D. hembras melanogaster, la capacidad limitada de los órganos de esperma d....

Protocolo

Experimentos a pequeña escala se debe realizar para familiarizarse con todo el procedimiento.

1. Recopilación de hembras vírgenes y hombres de Naïve

La versión más simple del experimento descrito consta de cuatro tipos de cruces iniciales, que implican la combinación de los adultos: a) w particulares ¹¹¹⁸ con el fin de recoger las hembras vírgenes, b) Oregon-R individuos con el fin de recoger los varones referencia ingenuos, c ) P {sw} machos homocigotos y hembras vírgenes de una línea de control que lleva a la organización de tipo salvaje de SDIC el fin de recoger ....

Resultados

La tabla 2 resume algunas de las características más destacadas de dos experimentos delito (ensayos 1 y 2) en el que D. melanogaster machos experimentales con y sin (Tipo I y II, respectivamente) un grupo funcional NaDCC se comparan ^14. Después de tomar en cuenta las diferentes incidencias encontradas con algunas repeticiones, 58-83% de las mujeres resultaron ser de carácter informativo, por lo que los recuentos de paternidad de su progenie se podrían utilizar para el cálcul.......

Discusión

Hemos descrito el diseño experimental para evaluar las diferencias en la contribución relativa de genéticamente distinta D. melanogaster hombres a la progenie en los experimentos de doble acoplamiento controlados ^7,8. Esto se ha hecho en el contexto de un factor genético planteado la hipótesis de influir en la capacidad competitiva de esperma y se ha ilustrado en el ensayo de delito aunque se aplica un procedimiento similar al ensayo de defensa (Figura 1). Este diseño experimental pu.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Tubo de látex ámbar	VWR	62996-473	1/4 pulgada ID, 1/6 pulgada Pared
1 ml puntas de filtro XL graduadas	USA Scientific	1126-7810	Se puede utilizar cualquier punta de pipeta de 1 ml, pero las puntas semitransparentes y largas son mejores como receptor de moscas. Si se utilizan puntas de filtro, saque y deseche el filtro con una aguja después de recortar el extremo de la punta
Parafilm	Sigma	P-7793
Tejido			Fino y liso
Microscopio estereoscópico	Leica	S6D
CO2 Tanque	gas aéreo	CD-50	Utilice FlyNap (Carolina Biological Supply Company) como alternativa si no se dispone de CO2
Válvula de pie FlyStuff, sistema completo	Genesee Scientific	59-121C	No es necesario si se utiliza FlyNap
Viales de plástico	Genesee Scientific	32-109	Vienen con bandejas de cartón que se pueden reutilizar para contener viales
Bolas de algodón	Fisher Scientific	AS-212
Levadura seca activa	Estrella		Roja Se encuentra en la tienda de comestibles
general Marcadores Sharpie			Se pueden usar diferentes colores para marcar diferentes genotipos

de malla de