Infección por Batrachochytrium dendrobatidis en los anfibios puede ser eliminado utilizando una concentración reducida (0,0025%) y menor duración (baños de cinco minutos durante seis días) de itraconazol que la que se utiliza generalmente. Se observaron menos mortalidad y menos efectos secundarios negativos utilizando este protocolo de tratamiento modificado.
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Artículo de método
Disminución de la concentración de itraconazol y Duración del éxito en el tratamiento de
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Resumen
Resumen
Los anfibios están experimentando el mayor descenso de toda clase de vertebrados y la principal causa de este descenso es un hongo patógeno Batrachochytrium dendrobatidis (Bd), que causa la enfermedad quitridiomicosis. Colonias de aseguramiento en cautiverio son importantes en todo el mundo para las especies de anfibios amenazadas y pueden ser la única tabla de salvación para los de amenaza crítica de extinción. El mantenimiento de colonias gratuitas de enfermedades es una prioridad de los directivos en cautividad, no se han identificado aún los tratamientos seguros y eficaces para todas las especies y entre las etapas de vida. El tratamiento quimioterapéutico más utilizado es el itraconazol, aunque la dosis utilizada puede ser perjudicial para algunos individuos y especies. Se realizó un ensayo de tratamiento clínico para evaluar si una dosis más baja y más seguro, pero eficaz de itraconazol se pudo encontrar para curar infecciones de BD. Hemos encontrado que mediante la reducción de la concentración de tratamiento desde 0,01 hasta 0,0025% y la reducción de la duración del tratamiento de 11-6 Días de 5 mínimo baños, ranas podrían curarse de la infección Bd con menos efectos secundarios y menos mortalidad asociada al tratamiento.
Introducción
Los anfibios están actualmente experimentando el mayor declive de la biodiversidad de todos los taxones de vertebrados 1. La quitridiomicosis, una enfermedad de la piel causada por los patógenos fúngicos Batrachochytrium dendrobatidis (Bd chytrid), es una de las principales causas de estos descensos dramáticos 2 Bd es el peor patógeno en el expediente para causar la pérdida de biodiversidad:. Infecta a más de 600 especies de anfibios y tiene causado la disminución de más de 300 especies, de las cuales por lo menos 200 especies se han convertido en grave peligro de extinción o extintas 2,3. El hongo quítrido no es sed....
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Protocolo
Aprobación ética: Este estudio y sus métodos fueron aprobadas por Animal uso y cuidado Comité de la Universidad de Tulane (Protocolo n º 0.407.).
1. Las pruebas para detectar la infección por Bd
- Hisopado para Bd
- Animales hisopos con un hisopo de algodón estéril en cinco ocasiones en la zona ventral, cinco veces en cada muslo, cada lado, y cada extremidad por un total de 45 golpes. Swabbing es un método no invasivo de muestreo para Bd en la piel de los anfibios.
- Gire suavemente el hisopo durante y entre golpes para asegurar la mayor cantidad de ADN se recoge en el ba....
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Resultados
Tratamiento itraconazol fue considerada exitosa si todos los animales estaban Bd-negativo cuatro semanas después de finalizado el tratamiento. Antes del tratamiento se inició, dos semanas después de la inoculación, los animales inoculados con Bd fueron infectadas, con una carga de zoosporas media de 1,121.7 (± 17,34), mientras que cuatro semanas después de finalizado el tratamiento, los animales de control Bd-positivos tenían una media de carga de zoosporas de 16,765.12 ( ± 14643.08).
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Discusión
El uso de este protocolo hemos sido capaces de reducir la dosis de tratamiento y el tiempo de tratamiento itraconazol para Bd en anfibios con seguridad y eficacia. La dosis de tratamiento más bajo y el tiempo (0.0025% por seis días) fue de un tratamiento exitoso para I. infección subclínica nebulifer. La eficacia de administrar una dosis más baja y el tiempo de tratamiento demuestran la necesidad de ensayos clínicos de tratamiento para tratamientos de la infección de Bd, como actualme.......
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Divulgaciones
El autor declara no los intereses financieros de la competencia.
Agradecimientos
Me gustaría dar las gracias a CL Richards-Zawacki ayuda conceptualizar el diseño experimental y la asistencia con materiales, A. Pessier ayuda el establecimiento de un régimen de tratamiento y análisis de la necropsia, MWH Chatfield, MJ Robak, K. Tasker y D. Lenger ayuda en el laboratorio y apoyo y M. McFadden y P. Harlow en el Zoológico de Taronga para el uso de su espacio durante el rodaje. El proyecto fue financiado en parte por el Departamento de Vida Silvestre y Pesca de Louisiana a través de la subvención de la Comisión de Educación Ambiental de Luisiana otorgado a LA Brannelly y por Life Technologies.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| 0.1% Itraconazol acuoso, Sporonox | Janssen Pharmaceutica Inc. | ||
| NaCl | Fisher Scientific | S640-500 | |
| KCl | Fisher Scientific | BP366-1 | |
| CaCl2 | Fisher Scientific | BP510-100 | |
| NaHCO3 | Fisher Scientific | BP328-500 | |
| Hisopos de algodón estériles | Equipos médicos y de alambre | MW113 | |
| 1,5 ml Microtubos | Sarstedt | 73.703.217 | |
| Qiagen DNEasy Kit de Sangre y Tejidos | Qiagen | 69581 | |
| 7500 PCR en tiempo real | Applied Biosystems | 4351104 | |
| VIC IPC | Applied Biosystems | 4308323 | |
| BSA | Applied Biosystems | AM2618 | |
| Agar | Invitrogen | 30391023 | |
| Triptona | Invitrogen | Q10029 | |
| Penicilina-estreptomicina | Invitrogen | 15070-063 | |
| Placa de Petri | Sigma Aldrich CLS430589 |
Referencias
- Stuart, S. N., et al. Status and trends of amphibian declines and extinctions worldwide. Science. 306 (5702), 1783-1786 (2004).
- Skerratt, L. F., et al. Spread of chytridiomycosis has caused the rapid global decline and extinction of frogs. EcoHealt....
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Reimpresiones y permisos
