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Artículo de método

Un nuevo método de la Administración de Drogas a múltiple pez cebra ( Danio rerio) Y la cuantificación de Retiro

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DOI:

10.3791/51851

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12 de noviembre de 2014

En este artículo

Resumen

Se explica un nuevo método para reducir la variabilidad al exponer a los peces a drogas. Se encontró que los peces expuestos a varios patrones de exposición al etanol tenían niveles de ansiedad alterados durante la abstinencia en un ensayo escototáxico claro/oscuro.

Resumen

Las pruebas de ansiedad en el pez cebra a menudo se estudian en combinación con la aplicación de sustancias farmacológicas. En estos estudios, los peces son rutinariamente atrapados con redes y transportados entre los acuarios domésticos y los tanques de dosificación. Con el fin de mejorar la facilidad de administración de compuestos, se desarrolló un método novedoso para transferir peces entre tanques para la administración de medicamentos. Los insertos diseñados para el desove se utilizaron para transferir grupos de peces a la solución del fármaco, lo que permitió una dosificación precisa de todos los peces del grupo. Esto aumenta la precisión y la eficiencia de la dosificación, lo que se vuelve muy importante en programas largos de administración repetida de medicamentos. Implementamos este procedimiento para su uso en un estudio que examinó el comportamiento del pez cebra en la prueba de luz/oscuridad después de administrar etanol con diferentes horarios de 21 días. En los peces expuestos a cantidades diarias moderadas de alcohol, hubo una diferencia significativa en la preferencia de ubicación después de 2 días de retiro en comparación con el grupo de control. Sin embargo, no se observó una diferencia significativa en la preferencia de ubicación en un grupo expuesto a la administración de atracones semanales.

Este protocolo puede generalizarse para su uso con todo tipo de compuestos que son solubles en agua y puede utilizarse en cualquier situación en la que se examine el comportamiento de los peces durante o después de largos programas de administración de fármacos. La prueba de luz/oscuridad también es un método valioso para evaluar los cambios en la ansiedad inducidos por la abstinencia.

Introducción

El pez cebra (Danio rerio) es una pequeña especie de teleósteos originarios de la India, que es un organismo modelo útil para conductual 1 y 2,3 médicos de investigación. El pez cebra también se utilizan comúnmente en el ensayo de diversas sustancias farmacológicas con el fin de caracterizar su impacto en el comportamiento. Varias dosis y programas de administración de drogas se han utilizado para investigar el comportamiento del pez cebra después de la administración de compuestos tales como estimulantes, ansiolíticos 4 5 y etanol 6-8.

Nuestro laboratorio ha investigado los efectos de ....

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Protocolo

Todos los procedimientos y pruebas de comportamiento fueron aprobados por la Junta de Ética de Experimentación Animal de la Universidad de MacEwan con el número de protocolo 11/06/12, que está en cumplimiento con el Consejo Canadiense para las directrices del Cuidado de Animales para el cuidado y uso de animales de experimentación.

1. Preparar tanques de dosificación, soluciones y Horario Administración

  1. Preparar un programa de administración de tal manera que los animales se dosifican en el mismo entorno y durante la misma hora del día para evitar cualquier confunde de tiempo o de empuje a los estímulos visuales.
  2. Obte....

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Resultados

Para mantener la precisión y el control en estudios farmacológicos con el pez cebra es importante el tiempo de la duración de la administración de etanol consistentemente y con precisión como se describe anteriormente. Nuestro procedimiento puede aumentar la facilidad y el rendimiento del procedimiento de dosificación. La administración de etanol en la fecha prevista o bien un binge-semanal o diaria de moderada resultó en niveles alterados de ansiedad, medida con el / test oscuro luz, en comparación con los controles. C.......

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Discusión

Estudios previos que implican la administración de fármacos en el pez cebra, simplemente se han basado en la compensación de pescado para transportarlos desde su tanque de casa en la solución de fármaco 12,16. Compensación no siempre es consistente y, a menudo toma más tiempo de lo esperado debido a la respuesta de escape del pez cebra, que tiene importante variabilidad individual. Métodos de transferencia tradicionales, aunque útiles, pueden mejorarse por la disminución de la cantidad de tiempo total de los .......

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Divulgaciones

Los autores reconocen Josué Gallup para el uso de su equipo de fotografía utilizada para la Figura 1. Este trabajo fue apoyado por una subvención de Ingeniería de Investigación (NSERC) Canadá Descubrimiento Ciencias Naturales y (a TJH).

Agradecimientos

Los autores no tienen nada que revelar.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Sistema de alojamiento de banco con tres estantesfigure-materials-1 Aquatic HabitatsN/A
Tanque de desove de 1,5 L con difusor de 400 μmfigure-materials-2 Aquatic HabitatsN/A
Eter etílico de grano purofigure-materials-3 Luxco, INCN/A
Software de seguimiento de movimiento Ethovision XTfigure-materials-4 Noldus Information Technology
Pipetafigure-materials-5 Eppendorf Canada
Arena clara/oscuraPersonalizadoConstruir según la descripción del procedimiento. 9,5 cm de ancho, 9,5 cm de profundidad, 55 cm de largo.

Referencias

  1. Spence, R., Gerlach, G., Lawrence, C., Smith, C. The behaviour and ecology of the zebrafish, Danio rerio. Biological Reviews. 83 (1), 13-34 (2008).
  2. Langheinrich, U. Zebrafish: A new model on the pharmaceutical catwalk. BioEssays. 25 (9), 904-912 (2003).
  3. Santoriell....

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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Administración de fármacos en pez cebraprueba de abstinencia de etanolarena de luz y oscuridadmétodo de inserto de desovedosificación de peces en gruposoftware de seguimiento de movimientoanálisis del comportamiento ansiosoesquema de dosificación repetidacambios inducidos por la abstinenciainvestigación en neurofarmacología