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Artículo de método

Técnicas de muestreo de sangre no terminal en los conejillos de Indias

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DOI:

10.3791/51982

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11 de octubre de 2014

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En este artículo

Resumen

Aunque un modelo conocido, el conejillo de indias en la actualidad representa un nicho en las ciencias experimentales en animales y datos limitados está disponible en la ejecución de la mayoría de los procedimientos. Aquí presentamos cuatro enfoques diferentes para no terminal en las técnicas de muestreo de sangre in vivo, ya sea en cobayas conscientes o anestesiados.

Resumen

Los conejillos de indias poseen varias similitudes biológicas a los seres humanos y se validan los modelos animales experimentales 1-3. Sin embargo, el uso de conejillos de indias actualmente representa un área relativamente estrecha de datos de investigación y descriptivos sobre la metodología específica es correspondientemente escasa. Las características anatómicas de los conejillos de Indias son un poco diferente de otros modelos de roedores, por lo tanto, la modulación de las técnicas de muestreo para dar cabida a las diferencias específicas de cada especie, por ejemplo., En comparación con los ratones y las ratas, son necesarias para obtener muestras suficientes y de alta calidad. Como tanto a largo como a corto plazo en los estudios in vivo a menudo requieren repetir el muestreo de sangre la elección de la técnica debe ser bien considerado con el fin de reducir el estrés y el malestar en los animales, sino también para asegurar la supervivencia, así como el cumplimiento de los requisitos de tamaño de la muestra y la accesibilidad. Muestras de sangre venosa se ​​pueden obtener en un número de sitios en los conejillos de indias por ejemplo., La safena y yugularvenas, cada técnica que contiene tanto ventajas como desventajas 4,5. A continuación, presentamos cuatro técnicas de muestreo de sangre diferentes, ya sea para cobayas conscientes o anestesiados. Los procedimientos son los procedimientos no terminales siempre que los volúmenes de muestra y número de muestras no exceden las directrices para la recogida de sangre en animales de laboratorio 6. Todos los métodos descritos han sido probados y solicitado repetido en el muestreo de sangre in vivo en los estudios dentro de nuestro centro de investigación a fondo.

Introducción

La cobaya es un modelo animal experimental valiosa y validado debido a un número de similitudes biológicas a los seres humanos, tales como un requisito para un suministro dietético de la vitamina C, la lipoproteína de plasma comparables enzimas metabolizadoras y perfiles de lipoproteínas, así como similitudes compartidas con placentación humana y 1-3,7,8 desarrollo prenatal. Esto hace que el conejillo de indias un modelo atractivo y conveniente para efectos de las enfermedades asociadas a la dieta tales como la enfermedad no alcohólica del hígado graso, las enfermedades cardiovasculares y los efectos putativos de la deficiencia de vitamina C, sino también ....

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Protocolo

Los procedimientos que se muestran se realizaron de acuerdo a los protocolos aprobados por el danés Experimentación Animal Inspección, dependiente del Ministerio de Alimentación, Agricultura y Pesca.

1. Sangre de muestreo desde el lateral safena o tarsal Vein

  1. Lleve a cabo este procedimiento sin anestesia y la ayuda de un investigador, que maneja el conejillo de indias, y una recogida de la muestra.
  2. Afeitarse la región tarsal de la pata trasera con una rasuradora eléctrica hasta que las venas son visibles. Asegúrese de que el área es lo suficientemente grande para evitar la piel interferir con el sitio de punción.

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Resultados

Se han presentado cuatro enfoques diferentes de técnicas in vivo no terminales en muestras de sangre, ya sea en cobayas conscientes o anestesiados. Figura 1 ilustra el curso de la safena y la vena lateral del tarso en el conejillo de indias y los posibles sitios de punción. Venas del oído visibles en la superficie dorsal de una oreja de cerdo de guinea se ilustran en la Figura 2 Estas venas pueden ser utilizados para tomar muestras de sangre cuando se requiere sólo un .......

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Discusión

En comparación con los ratones y las ratas, conejillos de Indias son temerosos por naturaleza y deben ser abordados con calma y manejados correctamente para reducir el estrés. Desde el punto de vista del bienestar animal, actuando con cuidado es naturalmente una prioridad; Sin embargo, esto también reducirá el riesgo de efectos de ansiedad asociada a los datos recogidos por ej., aumento de los niveles sanguíneos de corticosteroides y glucosa 12. Del mismo modo, la manipulación diaria habituar a los a.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar. Todos los procedimientos fueron aprobados por la Ley de Experimentación Animal de Dinamarca, que está de acuerdo con el Consejo de Europa del Convenio ETS 123.

Agradecimientos

Reconocemos la asistencia en un crack de Annie B. Kristensen, Elisabeth V. Andersen, Belinda B. Bringtoft y los cuidadores de animales en el Departamento de Medicina Experimental, Frederiksberg Campus de la Facultad de Salud y Ciencias Médicas de la Universidad de Copenhague, Dinamarca. Jacob Lønholdt se dio las gracias por su excelente asistencia técnica en la filmación de los procedimientos. Este estudio fue apoyado en parte por el Centro LifePharm en vivo y Farmacología de la Universidad de Copenhague.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Afeitadora eléctricaWella (Contura), Dinamarca273207Se puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
Jeringas B.Braun-Omnifix-F, Alemania9161406VSe puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
AgujasBD Microlance, España301156Se puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
Tubo de recolección Microvette Sarstedt, D-51588Nü mbrecht, Alemania201.288.100Se puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
Analizador Accu-CheckRoche A/S Diagnostics, DinamarcaSe puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
Heparina 5000 IE/mlLEO Pharma, DinamarcaSe puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
AnesthesiaZoletil 50, Chemvet, DinamarcaSe puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
AnesthesiaNarcoxyl vet 20 mg/ml, Intervet, DinamarcaSe puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
AnesthesiaTorbugesic vet 10 mg/ml, Scanvet, DinamarcaSe puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
UngüentoSe puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
Gasa o un hisopo de algodón Se puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
Desinfectante (70% alcohol)Se puede utilizar un producto alternativo. Múltiples proveedores
ocular neutro

Referencias

  1. DeOgburn, R., et al. Effects of increased dietary cholesterol with carbohydrate restriction on hepatic lipid metabolism in Guinea pigs. Comp.Med. 62 (2), 109-115 (2012).
  2. Fernandez, M., Volek, J. S.

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Reimpresiones y permisos

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