Konstruktion av en prisvärd och enkel att Build Zebrafish Facility

Abstract

In vivo biomedicinsk forskning är avgörande för att översätta in vitro fynd i kliniska framsteg. Små akademiska institutioner med begränsade resurser finner det praktiskt taget omöjligt att bygga och underhålla typiska gnagare anläggningar för forskning. Zebrafish forskning har visat sig vara ett värdefullt alternativ för in vivo forskning inom farmakologi, fysiologi, utveckling och genetiska studier. Denna artikel visar att en funktionell zebrafisk anläggning kan byggas på ett enkelt och prisvärt sätt. Vi visar att en sådan anläggning skulle byggas i ungefär en arbetsdag med minimala verktyg och kunskap. Kostnaden för 27 1,8 L akvarium zebrafisk anläggning konstrueras i denna studie var ca $ 1500. Vi uppskattar att upprätthållandet av ett första arbets 150 fiskar koloni för 3 månader är $ 1,000. Projektet involverade studenter, som infördes för att aquaculturing av zebrafisk för forskning föreslår.

Introduction

In vivo-modeller är viktiga för att bedriva omfattande biomedicinsk forskning, eftersom de tillåter i forsknings vitro ska översättas med systemet och organismnivå. Till exempel har forskning med små däggdjur, nämligen gnagare, visat sig vara nödvändigt i utvecklingen av läkemedel och i förbättringen av tillgängliga läkemedel. Dock kanske komplexiteten (ekonomiskt och logistiskt) gör det praktiskt taget omöjligt att bygga och underhålla gnagare anläggningar för experiment föreslår vid små forsknings akademiska institutioner. Ändå kan utföras in vivo forskning med andra djurarter som kräver mindre genomarbetade logistik. Zebrafisk (Danio rerio) har framgångsrikt använts som en in vivo-modell för att studera genetik, utveckling, patofysiologi och farmakologi ^{1,2,10,11,12.} De resurser som krävs för att hysa zebrafisk för experiment är relativt enkla och betydligt billigare jämfört med rODENT anläggningar. Kim et al. ³ har nyligen beskrivits i detalj en 80 tank zebrafisk inhysningssystem som kan byggas för ca $ 1500, vilket inkluderar både reservdelar och arbetskostnader. Detta står i skarp kontrast till den nästan $ 8500 som skulle krävas för att köpa en färdig, 80 tanksystem från valfritt antal kommersiella leverantörer. Emellertid, den beskrivning som ges av Kim et al. kan vara komplicerad och svår att följa för nybörjare av fisk forskning. Vi tror att en zebrafisk anläggning kan byggas på förenklat sätt för en investering på $ 1500.

Etableringen av ett in vivo anläggning vid små lärosäten ger sina fakulteter ytterligare verktyg för att producera mer kraftfull och grundlig forskning. In vitro-data som stöds av in vivo resultat generellt producerar mer omfattande biomedicinsk forskning än data som erhållits med hjälp av endast in vitro metoder. Därförgenomförande av ett in vivo forskningsanläggning kommer att avsevärt förbättra den institution framgång i dess övergripande forsknings strävanden (elev exponering för forskning, publikationer, kommunikationer, strävan efter extern finansiering, etc.).

Byggandet av ett Zebrafish anläggning som den som beskrivs i denna studie är idealisk för forsknings akademiska institutioner med begränsade faciliteter (eller institutioner utan in vivo forskningsanläggningar) under bromsande ekonomiska tider.

Protocol

OBS: Dessa protokoll följer riktlinjerna i IACUC av Presbyterian College.

1. Förvärva material som anges i tabell 1.

2. Montera 5 Shelf Chrome Enligt tillverkarens anvisningar. Detta kommer att användas för att hysa anslaget.

3. Konstruera vattenbehållaren och filtreringssystem (figurerna 1A och 2).

1. Använda Figur 1A som en guide, layout de 18 liters hink, pump, filter och UV-lampa för att fastställa slutliga installationen placering och storlek.
2. När delar läggs ut, mät och kapa ¾ "PVC-rör till den längd som behövs för montering. Variera längden av alla rör enligt särskilda utrymmesbehov och begränsningar.
3. Montera rör och rördelar som anges tidigare använda PVC primer och cement, se nedan (3.3.2 och 3.3.3).
   1. Sand de skurna kanterna av röret med sandpapper tills de är släta vid beröring ettd inget skräp.
   2. Prime utsidan av röret och insidan av armaturen med den köpta PVC primer med den medföljande svabb från PVC primer.
   3. Cement röret och montering tillsammans med tillämpning av PVC cement till utsidan av röret med den medföljande svabb. Upprepa för alla steg som behöver PVC cemente.
   4. Placera 18 liters hink till en sida av hyllkonstruktion.
   5. Installera en skott kontakt i sidan av oljebehållaren.
   6. Bifoga en ¾ "PVC-rör till skott.
   7. Fäst den andra änden av ¾ "rör till pumpinloppet med hjälp av en ¾" gängad gör monteringen.
   8. Anslut filtren för att pumpen med två 90 graders böjar och ¾ "PVC-rör.
      1. Använd en pappersfilter följt av en aktivt kolfilter för att filtrera bort skräp och minska klor och kemiska nivåer i vattnet.
   9. Anslut UV-lampan till filter according till tillverkarens instruktioner.
4. Fäst pumpen och filtersystemet till den övre sidan av den första hyllan i racket med buntband. Variera ordningen på montering och fastsättning beroende på storlek och utformning av hyllan / rack valt.
5. Lägg ett bioball per gallon av vatten till vattenbehållaren när pumpen och filtersystemet är monterade och fästa vid hyllan.

4. Konstruera huvudmatarledningen (figur 1B och 2).

1. Mät och kapa en bit av ¾ "PVC-rör för att ansluta UV-lampan till huvudförsörjningen
2. Använd en ¾ "PVC tee för att starta huvudmatarledningen genom att ansluta tee till ¾" PVC avgaser som kommer från UV-filter. .
   1. Lägg till ett från-ventil till botten av PVC utslags att tjäna som ett avlopp för underhåll spolning av systemet.
   2. Starta huvudmatarledningen från toppen av ¾ "PVC tee genom att mäta och skärning ¾" PVCröret till önskad längd för att ge matarrör för var och en av hyllorna på racket.
   3. Installera ¾ "PVC tees för de horisontella linjer som kommer att komma in varje hylla i racket.
   4. Eventuellt (och föreslog), lägga till en ¾ "on-off ventil för varje hylla matarledningen för att möjliggöra isolering av varje hylla och en modulär design av systemet.
3. Använd en ¾ "PVC-rör som en tryckreducerings linje på översta hyllan. Om denna linje körs på baksidan av hyllan, använda denna hylla för förvaring. Avsluta tryckreduceringslinjen i huvudavgasledningen (Figur 1B) med en ¾ "på-av-ventil.
4. När dessa steg har slutförts, prime och befästa PVC-rör tillsammans som tidigare gjort vid konstruerandet reservoaren och filtreringssystem.

5. Konstruera huvudavgasledningen (figurerna 1C och 2).

1. Kör den vertikala längden på huvudavgasledningen till den andra sidan av kuggstången from huvudtillförselledningen. Använd en 2 "PVC-rör för denna vertikal linje för att ta emot huvudmatarledningen på de bästa och avloppsrör från fisketankar från varje hylla.
2. Skär bitar av 2 "PVC-rör för den vertikala huvudavgasledningen och använda 2" PVC tees att få akvariet avloppsrör från varje hylla. Avsluta huvudavgasledningen i mäldtanken att utvisa den återvunnet vatten över ett svampfilter.
3. Skär en en tums öppning hela längden av de två "PVC-rör bitar och fäst till en vertikal huvudavgasledning med PVC utslagsplatser för de horisontella dräneringslinjer från fisktankarna.
4. Cap de två "horisontella dräneringsledningar med en 2" PVC cap.
5. Prime och befästa de bitar med hjälp av de nödvändiga tillbehör (kontakter, bröstvårtor eller armbågar).

6. Konstruera fisketankar (Figur 3).

1. Med borren, skär ett 1 1/8 "hål på baksidan av akvariet 1" under den övre kanten med en hålsåg.
2. Fäst och dra åt en 90 graders 3/4 "gängad PVC armbågen till hane adapter för att skapa akvarium avgasröret. Lägg en bit finmaskigt innan du skruvar innehavet nöt att förhindra zebrafisk går igenom avgassystemet.
3. Placera akvariet med sin avgasröret slutar i det öppna utrymmet i dräneringsledningen bakom tankarna

7. Starta vattensystemet

1. I flera behållare, såsom den som används för behållaren, mäta tre gånger den mängd vatten som finns i systemet. Låt detta vatten stå i rumstemperatur för konditionering under 48 timmar.
2. Tillsätt vatten till systemet och låt det cirkulera i minst 3 dagar.
   1. Byt vatten i systemet kraftigt under de första 3 dagarna av cirkulation för att befria systemet av föroreningar that uppehålla sig inom rören.
3. Lägg starter zebrafisk och låta kvävecykeln att etablera sig. Normalisera pH till en konsekvent 7. Får sju zebrafisk per 1,8 L, och mata dem två gånger dagligen under vardagar och en gång dagligen under helgerna som föreslagits av LiNbOs ⁴ och McNabb ^6.
4. Övervaka nitrat (<75 mg / L), nitrit (<10 mg / L) och ammonium (0 mg / L) dagligen under den första veckan efter att ha lagt fisk, och två gånger i veckan en gång önskade nivåer har bibehållits med regelbundna vattenbyten .

Representative Results

Konstruktion av pumpen och Flters System
När racket monteras och ställa in det första steget är att bygga pumpen och filtersystem. Filtren är anslutna till systempumpen och är belägna ovanför bottennivån hos den första hyllan, vilket möjliggör enkel filter underhåll och utbyte. På samma sätt är UV-lampan är ansluten med PVC-rör till filtret och hålls på plats med plast buntband för att möjliggöra enkel byte av UV-lampan efter behov (Figur 4A). Omedelbart efter pumpen ett pappersfilter, aktivt kolfilter, och en UV-lampa är installerade via PVC-rör. BIOBALLS läggs till tanken att ge underlag för tillväxt av bakterier, som omvandlar giftigt ammoniak avfall till nitrater. En bioball per gallon vatten i systemet är tillräcklig area för att tillåta bakterietillväxt. Locket på plastbehållaren kan monteras så att i händelse av overflow de BIOBALLS kvar i behållaren och chanser contamination minimeras. Även om ett spill händelse är mycket osannolikt, är ett dränerande system (lägga ett rör avlopp i toppen av reservoaren) ett enkelt tillägg som kan göras i systemet.

Konstruktion av Main matarledningen
Det andra steget är att montera huvudvattenförsörjningsledningen som kommer att matas varje fack som ska innehålla de zebrafisk tankar (Figur 4B). Denna linje är ansluten till UV-lampan med en bit PVC-rör. Denna linje går vertikalt och i sidled i racket genom ett PVC tee. Den nedre änden av tee används för att ansluta en bit av PVC-rör som kommer att fungera som en dräneringsventil för hela systemet.

Huvudlinjerna som livnär tankarna löper horisontellt till fyra fack: toppen av den andra hyllan, toppen av den tredje hyllan, toppen av den tredje hyllan, och längst ned i den femte hyllan. Sedan toppen av den andra, tredje och fjärde hylla linjer ger vatten till fisketankar de kör på midline av hyllorna. Var och en av dessa rader har individuella on-off-ventiler, som möjliggör kontroll av individuella fack.

En 9-port bevattning grenrör är fäst vid änden av de horisontella linjerna och dessa irrigators leverera vatten till fisketankar genom flexibla ¼ "slang (Figur 4B). Varje port av bevattnings grenrör har en inbyggd on-off ventil. Dessutom är en från-ventil placerad vid änden av slangen fäst till varje port, nära akvarium ingången, för enkel åtkomst och kontroll vattenflöde. Slangen kommer att införas i tanken genom ett hål borrat i locket. Detta kommer att hjälpa till att hålla slangen ordentligt i tanken.

Den linje som löper på toppen av den femte hylla används som trycktillande och den styrs med en individ på-av-ventil. Det rekommenderas att ha denna linje körs på baksidan av den femte hylla så att detta område kan användas för lagring. Eftersom main linjen går vid mittlinjen på den sida av räcket är det fört till baksidan med hjälp av en PVC-armbåge och en bit av PVC-rör, och sedan det körs i längdriktningen (horisontell) som tryckavlastningsflygplatser för en annan PVC armbåge och en bit av PVC-rör. Tryckreliever radslut i huvudavgasledningen som löper vertikalt på den andra sidan av kuggstängerna och slutar i vattenbehållaren (denna avgasledningen är gjord av två "PVC-rör, se nedan).

Byggandet av huvudavgasledningen
Det tredje steget är att montera avgassystemet, som löper i sidled till stativet, vid den sida där vattenbehållaren är placerad (Figur 4C). Detta system är byggd med 2 "PVC-rör och samlar det vatten som kommer från tryckavlastningsflygplatser linjen, och från akvariet tömning (se akvarium konstruktion nedan). Den huvudsakliga avgasledningen löper vertikalt, ansluta tryckreliever linje på toppen av kuggstången och slutar i vattnet reservoir. Även huvudavgasledningen erhåller avloppet från fisketankar genom övergripande 2 "PVC-rör som ansluter till huvudavgasledningen via PVC tees. Dessa horisontella dräneringsrören har en 1 'längsgående snitt för att mottaga avloppsvattnet från fisktankarna (se nedan). Dessa horisontella dräneringsledningar löper på baksidan och på undersidan delarna av hyllorna och har en mindre lutning som gör den avrunna vattnet att köra till huvudavgasledningen genom gravitation. Sponge filterdynor läggs till de horisontella dräneringsledningar så att akvariet avloppsvattnet faller på svamparna och filtrerar bort skräp. En hel sammansatta systemet avbildas i Figur 5.

Konstruktion av akvarium
En representativ akvarium visas i figur 6. Är slutet på akvariet avloppsledningen placeras i den horisontella dräneringsledningen (se ovan avsnitt om avgassystemet). Ett trådnät införes i avloppsledningen i akvariet att förhindrazebrafisk från att simma ut ur tanken. Dessa speciella tankar har lock som hindrar fisken från att fly och även minimera förorening möjligheter. Om spill inträffar tanklocken förhindrar fisken från att falla till golvet. Tankar med lock är idealiska, men om ett system byggs som innehåller tankar utan lock då ett litet hål kan borras nära toppen av tanken. Detta gör att vattnet att fly medan förhindra fisk från att fly.

Fungerande
En zebrafisk koloni kunde upprätthållas genom tillgängliga och etablerade protokoll som beskrivs på annat håll ^{3- 6.} I korthet gör vår anläggning systempumpen att cirkulera systemvolymen cirka 75 gånger per timme, genom att justera flödet för varje vuxen (eller larv akvarium) vid ca 85 ml / min (eller 45 ml / min för larv akvarium) . Vattenkvaliteten underhålls av aktiv biologisk filtrering och småskaliga vattenbyten (~ 5% av systemvolymen) efter behov. Daglig övervakningpH, konduktivitet, löst syre (DO) nivåer, och temperatur är nödvändigt för att hålla förhållanden konsekvent. Kits är kommersiellt tillgängliga för att mäta pH och DO nivåer. Konduktivitetsmätare finns också att köpa. För att testa dessa variabler dagligen, avlägsna 250 ml vatten från reservoaren och utföra analysen. PH-nivå bör hållas på 7,2, bör DO vara mindre än 6 mg, och konduktivitet mellan 500 iS och 1.300 iS. (KÄLLA HÄR) Temperatur måste hållas vid 28,5 ° C. Regelbundet systemunderhåll (3-4 veckor) innehåller en ungefärlig 30% vattenbyte och rengöring och byte av filterdynor och träkol.

Figur 1: Tre viktiga komponenter i en zebrafisk anläggning. A. Pumpen och filter systemet är belägna vid den nedre delen av hyllan (förstahylla) och anslut vattenaktie tanken med den stora matarledningen. B. Den stora matarledningen kommer från UV-lampan och levererar vatten till de tre övre hyllorna som innehåller fisketankar. Observera att varje hylla facket levereras självständigt och kan styras individuellt (på eller av) med hjälp av en ventil. Denna huvudledning har också huvuddräneringsventilen vid den nedre änden, och vid den övre änden fortsätter som en tryckreliever linje som slutar i huvudavgasledningen. C. Den huvudsakliga avgasledningen mottar vatten från trycktillande linjen och från de olika fisktankfack och spetsar i vattnet lagertankar. Observera att varje hylla har ett akvarium avgasledningen som är PVC-rör och är längs öppet för att ta emot vatten för enskilda fisketankar. Dessa ledningar är något lutande för att låta vatten rinna genom tyngdkraft till huvudavgasledningen.Klicka här för att se en större version av denna siffra.

Figur 2:. Tre viktiga komponenter i en zebrafisk anläggning monterat och klart funktionell Observera att vattenaktie tanken har redan BIOBALLS. Vattnet från huvudavgasledningen kommer att falla på en svampfilter placerades på mask ovanför nivån vatten (för tydlighets skull inte visas i figuren). Notera att för tydlighetens skull den andra hyllan har endast vissa fisketankar avbildade, den irrigator visas har endast 4 försörjningsrören, och akvariet avgasledningen är transparent. Varje hylla rack rymmer nio 1 L akvarium och har en 9-port irrigator.

Figur 3:. Fish tank Enhet akvarium förvärvas i en vanlig djuraffär och den har en 2 L kapacitet A. akvarium dräneringssystemet är konstruerat genom att borra ett 1 1/8 "hål i baksidan av. tanken, sedan 3/4 "PVC-röret bitar placeras i en inverterad" L "-form med användning av en 4/3" PVC-armbåge. Detta dränerande system kommer att falla i den öppna sidan av akvariet avgasledningar belägna på baksidan av fisketankar. B. Bild föreställande installationen av ett nät i akvariet tömning systemet. Nätet hindrar zebrafisk från att dräneras till avgasledningar.

Figur 4: Individuella delar konstruktion. A. De tre filter och pumpsystem är på botten rack i systemet. Pumpen är ansluten till tre mechantiska filter följt av ett UV-filter för att eliminera föroreningar från systemvattnet. B. Den horisontella matarledningen slutar i en 9-port bevattnings grenrör, vilket kommer att leverera färskt vatten och syre till varje tank. Matarledningen till varje hylla har en on-off ventil som kan användas för att stoppa vatten till varje hylla för rengöring och karantänändamål. C. akvarium avgasledningen mynnar ut i huvudavgasledningen att återinträda cirkulationen. Övertryckslinjen tömmer också in i huvudavgasledningen.

Figur 5:. Genomförd systemet Den färdiga systemet innehåller en pump och filter-system, en vertikal matningsledning, en horisontell matningsledning för varje hylla, en tank avgasledning, en tryckavlastningsledning, och en huvudavgasledning för en innesluten cirkulationssystem .

Figur 6:. Representant akvarium akvariet innehåller ett dränerande linje som kommer att ansluta med de horisontella dräneringsledningar i systemet.

Discussion

Det huvudsakliga syftet med denna artikel är att visa att byggandet av en funktionell zebrafisk anläggning inte är komplicerad och kan byggas av nybörjare fiskforskare med minimal bygg kunskap. Dessutom artikeln visar att material för detta funktionella zebrafisk anläggning kan förvärvas lätt och kostnadseffektivt från lokala sällskapsdjur leverans butiker eller järnaffärer. När allt material och verktyg har förvärvat byggandet av systemet och fisketankar tar ungefär en arbetsdag. Den 72 tim första körningen gör något fel i systemet, exempelvis läckage eller lågt vattentryck, som skall fastställas. Denna första körningen medger även föroreningar inuti systemet som skall avlägsnas från cirkulationen. Till exempel kan PVC lim innehåller farligt organiskt material som kommer att tas bort under de första timmarna av cirkulation. Systemet har en huvud dränerande ventil som tillåter och underlättar justering av volymen och vatten ersättning för mainten rings. Dessutom har systemet en tryckreliever linje som också underlättar justering av vattentrycket. Denna linje är användbar när endast en eller två avdelningar (hyllor) kommer att användas, eftersom den tillåter reglering av vattentrycket.

Anläggningen är modulärt uppbyggt möjliggör utnyttjandet av 1, 2 eller 3 fack (36 akvarier av 1,8 L) för att möta de ökande kapacitetsbehov hos enskilda forskare. På-av-ventiler som placerats i varje fack underlättar isolering av de olika delarna i systemet. Denna ventilsystem är också användbart för att undvika potentiell infektionsspridning, och att underlätta rengöring av systemet genom fack. Dessutom har varje akvarium vattenförsörjning två ventiler, en på 9 port irrigator och en vid den flexibla slangen vid ingången till akvariet. Denna dubbla ventilsystem tillåter finjustering av vattentryck och även underlätta förfaranden rengöring eller fisk utvinning eller manipulation.

t "> En korrekt dokumentation av ammoniak, nitrit och nitrat är avgörande för en korrekt funktion av anläggningen. För detta är de BIOBALLS är viktiga eftersom de ger tillräcklig yta för nitrifikationsbakterier till tillväxt. När fisken kolonin är stabil, anläggningen kan lätt modifierad för att använda större eller mindre akvarier. Dessutom kan anläggningen modifieras för att föda upp zebrafisk efter protokollen är tillgängliga i litteraturen ^5. Vidare kan anläggningen modifieras för att lägga till andra moduler eller rack för att utöka funktionerna i systemet .

Flödet av färskvatten i tanken ger tillräckligt frisk syre så att det inte finns något behov av att lägga till ytterligare en oxygenator. Luft utbyte som sker i vattenbehållaren är en tillräcklig syrekälla. Om större tankar används sedan en ytterligare syrekälla kan tillsättas. Det bör också noteras att utan flöde av färskvatten i tanken fisken kommer kvävas, så det är viktigt att vattenflödet be övervakas noga för att säkerställa att ingenting blockerar vattenledningarna. Det är väsentligt att vattentemperaturen hållas vid 28,5 ° C. En konstant temperatur kan uppnås genom upprätthållande av rumstemperaturen i vilket systemet är inrymt vid 28,5 ° C. Alternativt kan ett akvarium värmekälla köpas i syfte att bibehålla en konstant temperatur. Att upprätthålla vattenkvaliteten är avgörande för konsekventa experimentella resultat. Det finns många källor för att hjälpa bestämma exakta parametrar för vattenkvalitet som bygger på experimentella betingelser.

Akvarier städas var 7-10 dagar och därefter besprutas med 70% alkohol innan återanvändning. Det föreslås också att kromställ rengöras och torkas i detta skede för att förhindra rost och bygga upp. Om tecken på förorening observeras, är individuella tankar desinficeras med en 2% blekmedel ^8. Allmän hälsa övervakas med särskild uppmärksamhet på tecken på infektion (svullnad, hudsår, exolpthalmia, färg off, etc.), gas bubbla sjukdom (pga mättade gaskoncentrationer, snabba förändringar i vattentemperaturer, problem i VVS-system), gill hyperplasi (höga nivåer av ammoniak, koppar, zink eller aktiv klor i vattnet) , skolios (pga C-vitaminbrist) eller ägget associerad inflammation och fibroplasias (pga kvinnans ägg behålla som tänjer ut bukväggen).

Byggandet av denna tjänst är flexibel och medger en mindre eller utbyggt system. Genom att ta de grundläggande byggidéer, kan denna möjlighet ordnas för att passa grundläggande forskningsbehov i olika storlekar. Eftersom byggandet kan variera beroende på institution, är det 72 tim första körningen, och den dagliga övervakningen av ammonium, nitrat och nitrit nivåer under den första veckan av konstruktion det mest kritiska steget i protokollet. Utmärkt vattenkvalitet kommer att hjälpa till att upprätthålla hälsan hos fisken. Många av de nuvarande tillgängliga protokoll för en prisvärd fisk system kräver en utomhus vatten-flöde ^3. Med vatten skyddas från frigående minimerar risken för vattenförorening och avdunstning. Underhåll på ett slutet system är minimal jämfört med de vanliga öppna luftsystem.

Om problem uppstår i konstruktionen av anläggningen (läckage, lågt vattentryck, osv.) Kan man ersätta en cementerad rör genom att helt enkelt skära bort problemområde i anläggningen och ersätta delarna i samma stegvisa sätt som anges ovan . Detta system kan vara sårbara för stora vattenförlust på grund av små läckor, som kan bli farliga för fisken om de lämnas obemärkt. För en minsta investering en flottör avstängningsanordning detekterar när vattennivån har sjunkit under en säker tröskeln och stänga av systemet. Detta kan vara nödvändigt om noggrann övervakning av systemet inte är tillgängligt. Med rätt modifieringar, det finns mycket få begränsningar detta system står inför förutom bristen på rörlighet. När detta system är konstrueraed det är mycket svårt att röra sig utan att skära vissa delar och recementing dem på den nya platsen. Denna rörlighet begränsning innebär att systemet idealt måste upprätthållas i en arbetsyta. Om rörlighet är önskvärt att det finns små modifieringar som kan göras för att öka flexibiliteten. Lägg en fackförening i början av varje leverans lateral, tryckavlastningsledningen, urladdningspumpen, och ovanför dräneringsventil. De dräneringsledningar kan torr monteras istället för hård på plats. Lägga till en flexibel koppling till pumpdelen kommer också stöd i mobilitet. Detta är en ytterligare

Den enkla konstruktionen och underhållet av detta system innebär att nuvarande protokoll som finns i litteraturen är tillgängliga för små forskningsinstitut ^1,2,10-12. Underhållet är enkelt att göra detta till ett idealiskt system för doktorand forskning. Detta system är utmärkt för oberoende forsknings- och undervisningslaboratorier, även.

Sammanfattningsvis har denna typ avAnläggningen är prisvärd, lätt att bygga, och funktionell för in vivo experiment. Denna möjlighet är idealisk för institutioner med begränsade resurser och begränsad djurhållning utrymme. Zebrafisk forskning är ett område som används för flera typer av studier, inklusive farmakologi, fysiologi, utveckling, eller till och med genetiska studier. I själva verket, det stora antalet tillgängliga mutant eller transgen zebrafisk stöder innovativa forskningslinjer inom praktiskt taget alla områden av biomedicin. Dessutom kan detta system användas för att förbättra möjligheterna för forskning och klassrums upplevelser för vetenskap majors vid små övervägande grundutbildning institutioner och inspirera nästa generations biomedicinska analytiker.

Materials

Name	Company	Catalog Number	Comments
Item	Brand	Quantity
74-in H x 48-in W x 18-in D 5-shelf Steel Freestanding Shelving Unit	Style Selections	1
18-Gallon General Bucket/Tote	Centrex Plastics: LLC Rugged Tote	1
6-Outlet Power Strip With 15-Ft. Cord	Master Electrician	1
9-Watt UV Water Garden Clarifier FiIter and UV lamp	Smartpond	1
Whole House Water Replacement Filter	Whirlpool	6
Opaque Whole-House Pre-Filtration Housing	Whirlpool	2
Thread Seal Tape	William H Harvey	1
8-fl oz LO-VOC PVC Cement	Oatey	1
8-fl oz LO-VOC Primer	Oatey	1
1/4-in x 100-ft Vinyl Drip Irrigation Distribution Tubing	Mister Landscaper	1
1/4-in Barbed Drip Irrigation On/Off Valve	Mister Landscaper	33
9-Port NPT Irrigation Manifold with Filter	Mister Landscaper	6
Drop-In Filter with House	Whirlpool	6
2-in Dia 90-Degree PVC Elbow	LASCO	3
2-in Dia 90-Degree Tee	LASCO	3
3/4-in Dia 90-Degree Slip Elbow	LASCO	15
3/4-in Dia PVC Adapter	LASCO	7
3/4-in Dia PVC Tee	LASCO	12
2-in Dia PVC Cap	LASCO	3
1-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter	LASCO	2
3/4-in PVC Socket In-Line Ball Valve	American Valve	5
1/2-in Dia x 3/4-in Dia PVC Adapter	Lasco	8
3/4-in Dia PVC Cap	Lasco	1
2-In x 5-Ft Pvc Pipe	Charlotte Pipe	4
¾-In x 10-Ft Pvc pipe	Charlotte Pipe	3
11/16x1-7/80 PVC ring	SXT	10
½” PVC male adapter	SXT	1
¾” PVC coupling	SXT	1
½” PVC female adapter	SXT	1
link
1.8 L Dual Beta Keeper	Top Fin	27
¾” PVC male adapter (w/ #18 O-ring)	SXT	28
90-degree ¾” threaded PVC elbow	SXT	27
Fine Mesh	N/A	1 yard
Bulkhead Connector	N/A	1
Hacksaw	N/A	1
Drill	N/A	1
Hole saw	N/A	1
Adjustable Wrench	N/A	1
Pliers	N/A	1
Tape Measure	N/A	1
Safety Glasses	N/A	1
Work Gloves	N/A	1