Una nueva técnica de análisis cuantitativos de la pérdida del pelo en ratones Uso del análisis de escala de grises

Resumen

La alopecia es una forma común de pérdida de cabello que puede ocurrir en muchas condiciones diferentes, incluso como efecto secundario de la quimioterapia. Hemos desarrollado un método para cuantificar la pérdida de cabello en ratones, utilizando un generador de imágenes en gel estándar para realizar un análisis en escala de grises, para facilitar el estudio de nuevas terapias prometedoras para la alopecia.

Resumen

La alopecia es una forma común de pérdida de cabello que puede ocurrir en muchas condiciones diferentes, incluyendo la pérdida de cabello de patrón masculino, el síndrome de ovario poliquístico, y la alopecia areata. Alopecia también puede ocurrir como un efecto secundario de la quimioterapia en pacientes con cáncer. En este estudio, nuestro objetivo fue desarrollar un método consistente y fiable para cuantificar la pérdida del pelo en ratones, lo que permitirá a los investigadores a evaluar con precisión y comparar los nuevos enfoques terapéuticos para estas diversas formas de alopecia. El método utiliza un generador de imágenes de gel estándar para obtener y procesar imágenes de los ratones, la medición de la absorción de la luz, que se produce en una proporción aproximada a la cantidad de pelo negro (o gris) en el ratón. Los datos que han sido cuantificados de esta manera se pueden analizar utilizando técnicas estadísticas estándar (es decir, ANOVA, t-test). Esta metodología fue probada en modelos de ratón de la alopecia inducida por quimioterapia, alopecia areata y la alopecia de la depilación. En este informe, el protocolo detallado es presentados para realizar estas mediciones, incluidos los datos de validación de C57BL / 6 y C3H / HeJ cepas de ratones. Esta nueva técnica ofrece una serie de ventajas, incluyendo la relativa simplicidad de aplicación, la confianza en el equipo que está fácilmente disponible en la mayoría de los laboratorios de investigación, y la aplicación de una evaluación objetiva, cuantitativa que es más robusto que las evaluaciones subjetivas. Las mejoras en la cuantificación del crecimiento del pelo en ratones mejorarán estudio de los modelos de alopecia y facilitar la evaluación de nuevas terapias prometedoras en estudios preclínicos.

Introducción

La alopecia (caída del cabello) puede ser un evento psicológicamente y emocionalmente angustiante con múltiples causas. Calvicie de patrón masculino es la causa más común de alopecia, que afecta a aproximadamente dos tercios de los hombres a los 35 años ^1. Un patrón similar de pérdida de cabello se puede observar en las mujeres con síndrome de ovario poliquístico. En ambos de estos trastornos, la pérdida de cabello es de andrógenos mediada. Alopecia también puede ocurrir como una enfermedad autoinmune, alopecia areata, que afecta a 1,7% de la población ^2. La alopecia puede ocurrir como efecto secundario de algunos tratamientos médicos, como la q....

Protocolo

Declaración de Ética: Todos los estudios con animales deben ser aprobados por el IACUC de la institución (por los datos que siguen, los protocolos fueron aprobados por el Montefiore IACUC, protocolo # 11-6-240 y # 13-7-100). Animales se proporcionan anestesia luz como se indica con la única finalidad de mantenerlos quietos durante la fotografía, no hay procedimientos dolorosos requeridos para este protocolo.

1. Adquisición de fotografías

1. Ajuste el enfoque y campo de visión para reproductor de imágenes de gel utilizando papel con el texto impreso. Verificar la uniformidad de la fuente de luz en toda la región fotografiada. Para ....

Resultados

Esta técnica fue validada utilizando / HeJ injertadas C3H, el modelo de ratón de la alopecia areata ^16. Estos animales desarrollan la pérdida mundial de cabello que progresa gradualmente con el tiempo. Sin embargo, la pérdida de cabello se produce en parches, y puede variar de un ratón a la siguiente, la introducción de una variabilidad considerable y obstaculizando evaluaciones cualitativas. Este modelo proporciona una oportunidad para poner a prueba las correlaciones entre las mediciones de densidad óptica .......

Discusión

En este informe una descripción detallada se proporciona de una nueva técnica para la cuantificación de la pérdida de cabello en los roedores. Esta técnica utiliza un generador de imágenes de gel para la adquisición y análisis de imágenes, equipo que está fácilmente disponible en la mayoría de los laboratorios. Las mediciones han demostrado ser robusto a las variaciones menores en la técnica (Figuras 4 - 5), y están bien correlacionados con el grado de pérdida de cabello visual en los m.......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Sistema de imagenología KODAK Gel Logic 100	Eastman Kodak Company, Rochester, NY, USA		Equipo de imagenología para obtener y analizar fotografías, debe tener una fuente de luz integrada para fotografía reflectiva.
Escala de grises Kodak/Tiffen Q-13	Imatest		Patrón de escala de grises
Ratones C57BL/6J	Jackson Laboratories, Bar Harbor, Maine		Ratones para estudio representativo
Ratón injertado C3H/HeJ	Jackson Laboratories, Bar Harbor, Maine		Ratones para estudio representativo