Un protocolo de paso a paso para la colocación inter-posicional de ingeniería tisular buques (TEV) en la arteria carótida de una oveja mediante anastomosis de extremo a extremo y la evaluación digital en tiempo real en vivo hasta el sacrificio de animales.
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Artículo de método
Técnica quirúrgica para la implantación de la ingeniería tisular injertos vasculares y posterior
En este artículo
Resumen
Resumen
El desarrollo de la ingeniería de tejidos vasculares (TEV) es avanzado por la capacidad de VETs implantes rutinaria y eficaz (4-5 mm de diámetro) en un modelo animal de gran tamaño. Un protocolo paso a paso para la colocación de inter-posicional de la evaluación digital de TEV y en tiempo real de la TEV y las arterias carótidas nativas se describe aquí. En vivo monitoreo es posible gracias a la implantación de sondas de flujo, catéteres y cristales ultrasónicos (capaz de registro de los cambios dinámicos de diámetro de TEVs implantados y arterias carótidas nativos) en el momento de la cirugía. Una vez implantados, los investigadores pueden calcular los patrones de flujo sanguíneo arterial, presión arterial invasiva y diámetro de la arteria produciendo parámetros como la velocidad de la onda de pulso, índice de aumento, las presiones de pulso y el cumplimiento. La adquisición de datos se lleva a cabo utilizando un único programa de ordenador para el análisis de toda la duración del experimento. Tales datos invaluable da una idea de remodelación de la matriz TEV, su resemblance / a controles simulados nativos y el rendimiento general del TEV en vivo.
Introducción
El enfoque principal para el desarrollo de TEV ha sido la de proporcionar un sustituto para el reemplazo de injerto autólogo cuando los vasos autólogos no están disponibles y limitar los donantes vista morbilidad. Por ejemplo, el número de cirugías de revascularización coronaria por año ha superado los 350.000 en los EE.UU., y la fuente ideal de injertos adecuados sigue siendo la arteria mamaria interna izquierda, arteria descendente anterior coronaria y la vena safena 1. Dado que muchas personas que sufren de enfermedades vasculares pueden no tener las arterias y venas adecuadas para la sustitución de injerto autólogo, el desarrollo de TEVs por lo tanto s....
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Protocolo
NOTA: Este protocolo ha sido aprobado por el Comité de Cuidado y Uso de Animales de la Universidad Estatal de Nueva York en Buffalo.
Preparación 1. Pre-quirúrgico
- Utilice ovejas (cross Dorset, hembra, de aproximadamente 1-3 años de edad con un peso de 40-60 kg) para el siguiente estudio. Administrar ciclosporina A (200 mg / día), aspirina (975 mg / día), y Coumadin (20-30 mg / día) por vía oral, comenzando 3 días antes de la cirugía y continuar durante la duración de todos los estudios.
- Asegúrese de que la oveja ha ayunado 12 h antes de la cirugía (alimento normal = 1,8 kg y 0,4 kg de heno de granos).
- Esteri....
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Resultados
Más de 30 ovejas han sido sometidos a la técnica quirúrgica se describe en este informe para la implantación de TEV (en prensa) 9. Una tabla que resume las más recientes operaciones de ovejas después de optimización de protocolos se muestran en la Tabla 2. Todas las ovejas recuperados después de la implantación TEV sin complicaciones potencialmente mortales. En algunos animales, la fibrosis se observó en la arteria nativa cerca de la punta del catéter arterial. No se ha observado un aumento s.......
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Discusión
El propósito de este informe es proporcionar un procedimiento fiable y reproducible para VETs implantes de interés en la arteria carótida ovina. Las arterias carótidas nativas de los animales utilizados en este modelo fueron 0,5-0,75 mm de espesor y 4.5-5 mm de diámetro exterior. La técnica quirúrgica descrita aquí ha sido un éxito para la implantación VETs de geometrías variables que miden 0,25 a 1 mm de espesor, de 4-5 mm de diámetro exterior y 4 cm de longitud, con gran éxito la prueba efectiva de hasta 3 meses de du.......
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Divulgaciones
No hay divulgaciones que informar.
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por subvenciones del Instituto Nacional de Corazón y Pulmón (R01 HL086582) y el Fondo de Células Madre de Ciencias de Nueva York (NYSTEM, Contrato # C024316) a STA y DDS ilustraciones utilizadas en vídeo JoVe fueron completados por Juan Nyquist; Ilustrador médico de la Universidad Estatal de Nueva York en Buffalo.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Transductor de presión | Becton Dickinson | P23XL-1 | Cantidad: 1+ (1 para cada arteria). Utilizado con cúpulas de diafragma llenas de agua. |
| Caja de amplificadores y transductores | Gould | 5900 Acondicionador de señal Cantidad de jaula | : 1. Se deben incluir dos transductores y amplificadores en la jaula. Si bien esta unidad específica puede ser descontinuada, otros transductores de presión disponibles comercialmente con una salida BNC/analógica se comunicarán con el equipo Sonometrics. |
| Consola T403 con módulo de caudalímetro perivascular TS420 (x2) | Transonic Systems | y TS420 (x2) | Cantidad: 1. Las sondas de flujo que miden el flujo a través de cada una de las arterias carótidas se conectarán a cada una de las unidades TS420. |
| unidad de medición ultrasónica digital | Sonometrics | TR-USB | Cantidad: 1 |
| Sonda de flujo Precision S-Series 4 mm | Sistemas Transónicos Inc. | MC4PSS-LS-WC100-CM4B-GA | Cantidad: 2 |
| 1 mm Sonometrics Crystals | Sonometrics Systems | 1R-38S-20-NC-SH | Cantidad: 2-4 (2 para cada arteria) |
| Catéter para implante | BD (Becton Dickinson) | 381447 | Cantidad: 1+ (1 para cada arteria). El catéter se corta y se asegura al tubo de microperforación, se utiliza un estilete para la inserción. |
| Tubo de microperforación | Tygon Norton Performance Plastics | (AAQ04127) Formulación S-54-HL | Cortado a medida para un juego de extensión |
| Luer Stub Adapter | BD (Becton Dickinson) | 427564 (calibre 20) | Cantidad: 1+ (1 por cada catéter arterial) |
| Surflo Injection Plug | Terumo | SR-IP2 | Cantidad: 1+ (1 por cada catéter arterial) |
| Meadox | PTFE (Teflón) Fieltro | 19306 | Corte a medida. El fieltro de PTFE utilizado en nuestros estudios fue descontinuado. Sin embargo, empresas comparables como " malla quirúrgica" ofrecer productos que sean equivalentes. |
Referencias
- Goldman, S., et al. Long-term patency of saphenous vein and left internal mammary artery grafts after coronary artery bypass surgery: Results from a Department of Veterans Affairs Cooperative Study. Journal of the American College of Cardiology. 44, 2149-2156 (2004).
- Achouh, P., et al.
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Reimpresiones y permisos
