El objetivo del protocolo presentado aquí es describir los procedimientos para exponer a las ratas a niveles moderados de alcohol durante el desarrollo cerebral prenatal y cuantificar las alteraciones resultantes en el comportamiento social durante la edad adulta.
Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.
Artículo de método
Moderada exposición prenatal al alcohol y cuantificación de la conducta social en ratas adultas
En este artículo
Resumen
Resumen
Las alteraciones en el comportamiento social se encuentran entre las principales consecuencias negativas observadas en niños con Trastornos del Espectro Alcohólico Fetal (TEAF). Varios laboratorios independientes han demostrado alteraciones sólidas en el comportamiento social de los roedores expuestos al alcohol durante el desarrollo del cerebro en una amplia gama de duraciones de exposición, momentos, dosis y edades en el momento de la cuantificación del comportamiento. Trabajos previos de este laboratorio han identificado alteraciones confiables en formas específicas de interacción social después de una exposición prenatal moderada al alcohol (EAP) en la rata que persisten hasta bien entrada la edad adulta, incluido el aumento de la lucha libre y la disminución de la investigación. Estas alteraciones del comportamiento han sido útiles para identificar los circuitos neuronales alterados por la EAPmoderada 1, y pueden ser importantes para avanzar hacia una comprensión más completa de las bases neuronales de las alteraciones relacionadas con la EAP en el comportamiento social. Este artículo describe los procedimientos para realizar PAE moderada en la que las ratas consumen voluntariamente etanol o sacarina (control) durante toda la gestación, y la medición de los comportamientos sociales en la descendencia adulta.
Introducción
Se estima que el 1-5% de los niños diagnosticados con trastornos del espectro alcohólico fetal (TEAF) 2, que incluyen el síndrome de alcoholismo fetal (FAS), SAF parcial (AFPs), y relacionados con el alcohol (ARND Trastornos del desarrollo neurológico) 3. Los déficits en la conducta social y la cognición son algunos de los resultados adversos más comunes observados en los niños con TEAF 4-7. Las consecuencias negativas no se limitan a la fuerte exposición prenatal al alcohol (PAE), como PAE moderada que no conduce a la déficits morfológicos, conductuales y cognitivos conspicua característica de FAS puede causar relativamente sutil, pe....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Protocolo
Todos los procedimientos descritos aquí y en el video que lo acompaña han sido aprobados por los Comités de Cuidado y Uso de Animales Institucional del Centro de Ciencias de la Salud y el campus principal de la Universidad de Nuevo México.
1. Exposición prenatal al alcohol
- Obtener todos los materiales y productos químicos necesarios: Sacarina hidrato de sal de sodio, 190 etanol de prueba (95% de alcohol por volumen), tubos de vidrio para beber de cuentas, el caucho natural blanco # 4 tapón un agujero, 1 "punto de inflexión tubos-ball, los gobernantes de papel impreso desde www .vendian.org / mncharity / dir3 / paper_rulers /. <....
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Resultados
En el transcurso de muchas rondas de cría ratas hembras en la condición de etanol beben consistentemente un promedio de alrededor de 2,1 g / kg de etanol por sesión de bebida 4 hr. Presas rata consumen aproximadamente la mitad del total de cuatro horas durante el primer 15 a 30 min después de la introducción de los tubos de agua potable, lo que resulta en una concentración de etanol en suero materno pico de aproximadamente 60 mg / dl, medida en el punto de tiempo de 45 min. Durante el 3,5 hr restante del período de la b.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Discusión
El paradigma de la exposición prenatal al alcohol descrito aquí implica el consumo voluntario de etanol (5% v / v) por las presas de rata durante el embarazo. Hay un número de protocolos para la exposición de los animales no humanos a etanol durante el desarrollo del cerebro representado en la literatura, que difieren con respecto a la temporización, la dosis, duración y la vía de administración de etanol, así como las especies objeto de la investigación. Aunque un tratamiento exhaustivo de las ventajas de los distintos.......
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Divulgaciones
Los autores no tienen conflictos de intereses que divulgar.
Agradecimientos
Apoyo proporcionado por AA019462 de subvención a DAH y AA019884 a DDS.
....Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Sacarina sal sódica hidrato | Sigma | S1002 | |
| 190 prueba etanol | Sigma | 493538 | |
| Tubos de vidrio con cuentas | Fisher | 14-955K | |
| Caucho natural blanco #4 tapón un agujero | Plasticoide | LSG4M181 | |
| 1" tubos de curva-punta de bola | Ancare | TD-199-3" | |
| Papel reglas | N/A | N/A | www.vendian.org/mncharity/dir3/paper_rulers |
| Aparato para la interacción social | a medida | N/A | 95 cm X 47 cm X 43 cm |
| Cámaras de vídeo | N/A | N/A | Capaz de grabar en condiciones de poca o ninguna luz |
| Iluminadores infrarrojos | Vitek | VT-IR1-12 | |
| Teklad sani-chips de grado de laboratorio | Harlan | 7090A | |
| Cepillo y recogedor | N/A | N/A | |
| Alcohol isopropílico | Sigma | W292907 | |
| Dióxido de cloro (tabletas de 1,5 mg) | Quiplabs | N/A | Preparar según las recomendaciones del fabricante |
Referencias
- Hamilton, D. A., et al. Prenatal exposure to moderate levels of ethanol alters social behavior in adult rats: Relationship to structural plasticity and immediate early gene expression in frontal cortex. Behav. Brain Res. 207 (2), 290-304 (2010).
- May, P. A., et al.
Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.
Reimpresiones y permisos
