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Artículo de método

Combinado de traslado-Box Entrenamiento con electrofisiológico corteza Grabación y estimulación como una herramienta para estudiar la percepción y aprendizaje

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DOI:

10.3791/53002

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22 de octubre de 2015

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* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Shuttle-cuadro aprendizaje de evitación está bien establecido en la neurociencia conductual. Este protocolo se describe cómo el aprendizaje en los roedores lanzadera cuadro se puede combinar con microestimulación sitio específico eléctrica cortical (ICMS) y crónica simultánea en grabaciones in vivo como una herramienta para estudiar varios aspectos del aprendizaje y la percepción.

Resumen

El aprendizaje de evitación de traslado de la caja es un método bien establecido en la neurociencia y experimentales configuraciones de comportamiento eran tradicionalmente hechos a medida; el equipo necesario está disponible por varias empresas comerciales. Este protocolo proporciona una descripción detallada de una evitación de lanzadera cuadro paradigma de aprendizaje de dos vías en roedores (jerbos mongoles aquí; Meriones unguiculatus) en combinación con microestimulación sitio específico eléctrica cortical (ICMS) y crónicas electrofisiológicos in vivo grabaciones simultáneas. El protocolo detallado es aplicable a estudiar varios aspectos de comportamiento de aprendizaje y la percepción en diferentes especies de roedores.

ICMS en sitios específicos de los circuitos corticales auditivas como estímulos condicionados aquí se utiliza como una herramienta para probar la relevancia perceptiva de aferentes específica, eferentes y las conexiones intracorticales. Los patrones de activación distintas pueden ser evocados mediante el uso de diferentes arr electrodo de estimulaciónays para, ICMS capa dependiente locales o sitios ICMS distantes. Utilizando el análisis del comportamiento de detección de señales se puede determinar qué estrategia de estimulación es más eficaz para la obtención de una señal detectable y comportamiento sobresaliente. Además, multicanal-grabaciones paralelas utilizando diferentes diseños de electrodos (electrodos de superficie, electrodos de profundidad, etc.) permiten investigar observables neuronales en el transcurso de tiempo de tales procesos de aprendizaje. Se discute cómo los cambios del diseño de comportamiento pueden aumentar la complejidad cognitiva (por ejemplo, la detección, la discriminación, el aprendizaje de inversión).

Introducción

Un objetivo fundamental de la neurociencia conductual es establecer vínculos específicos entre las propiedades neuronales estructurales y funcionales, el aprendizaje y la percepción. La actividad neuronal asociada con la percepción y el aprendizaje puede ser estudiado por registro electrofisiológico de potenciales de acción y potenciales de campo locales en varias estructuras cerebrales en múltiples sitios. Mientras que los registros electrofisiológicos proporcionan asociaciones correlativos entre la actividad neuronal y el comportamiento, microestimulación directa eléctrica cortical (ICMS) durante más de un siglo ha sido el método m....

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Protocolo

Todos los experimentos presentados en este trabajo se llevaron a cabo de acuerdo con los estándares éticos definidos por la ley alemana de protección de los animales de experimentación. Los experimentos fueron aprobados por el comité de ética del estado de Sajonia-Anhalt.

1. encargo multicanal electrodos matrices para Microestimulación y grabación

  1. Array microestimulación por encargo
    1. Para la entrega de ICMS, preparar electrodos de estimulación en el diseño espacial deseada (en este array lateral de 2 canales) utilizando alambres de acero inoxidable con aislamiento de teflón largos de 3 cm (Ø con el aislamiento = 50 micr....

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Resultados

En esta sección se muestra un ejemplo representativo de aprendizaje de transporte de la caja en un jerbo de Mongolia. El tema fue entrenado para discriminar el sitio ICMS entre dos electrodos de estimulación implantado 700 micras separados unos de otros en la corteza auditiva (Figuras 1 y 2). Arrays de estimulación se pueden personalizar en diferentes diseños espaciales (Figura 1). Aquí, la discriminación de los dos sitios ICMS se supo a 3 sesiones de entrenamiento con .......

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Discusión

Este protocolo describe un método de ICMS específicos del sitio simultáneas y registros electrofisiológicos multi-canal en un animal de aprendizaje mediante el uso de un sistema de lanzadera-box controlado aversivo pie-choque de dos vías. El protocolo hace hincapié en conceptos claves técnicas para dicha combinación, y señala la importancia de la conexión a tierra el animal sólo a través de su electrodo de un terreno común, dejando el gridfloor a un voltaje flotante. Aquí, el aprendizaje auditivo lanzadera cuadro se apl.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

El trabajo fue apoyado por becas de la Deustche Forschungsgemeinschaft DFG y Leibniz-Instituto de Neurobiología. Damos las gracias a Maria-Marina Zempeltzi y Kathrin Ohl para la asistencia técnica.

....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Alambre de acero inoxidable con aislamiento de teflónCalifornia Fine Wirediam. 50µ m con sistema de
conector de clavija de aislamiento Molex Holding GmbH510470200de 1,25 mm Rejilla TEM PicoBlade
Servicios Científicos QuantifoilEQ225-N27
Acrílico dental PaladurHeraeus Kulzer64707938
Taladro manual OmniDrill35WPI 
Ketamina 500mg/10mlRatiopharm GmbH7538837
Rompun 2%, 25mlBayer Vital GmbH5066.0
Cloruro de Sodio 0,9%, 10mlB.Braun AG 
Lubricante KY-JellyJohnson & Johnson
Shuttle-box E10-E15Coulbourn InstrumentsH10-11M-SC
Generador de estímulo MCS STG 2000Sistemas
Plexon Headstage cable 32V-G20Plexon Inc.HSC/32V-G20
Plexón Headstage  32V-G20Plexón Inc.Preamplificador PBX HST/32v-G20
de 32 canalesPlexon Inc.32PBX
Sistema de Adquisición MulticanalPlexon Inc.MAP 32/HLK2
Cryostate CM3050 SLeica Microsystems GmbH
Tarjeta de procesamiento de señales Ni-DaqNational Instruments
Lab StandardTM Stereotaxic InstrumentsStoelting Co. 
Atenuador de audio g.pahg.pah Guger technologies
Acetato violeta de cresiloRoth GmbH7651.2
Roticlear Roth GmbHA538.1
Acetato de sodio trihidratoRoth GmbH6779.1
Hexacianoferrato de potasio (II) trihidratoRoth GmbH7974.2
Hidrogenofosfato disódico dihidratadoMerck1.065.801.000
ICM Módulo de acondicionamiento de impedanciaFHC55-70-0
Controlador de temperatura animalInstrumentos de precisión mundialATC2000
Paso 503599PRID00000772multicanalCaja de

Referencias

  1. Cohen, M. R., Newsome, W. T. What electrical microstimulation has revealed about the neural basis of cognition. Current Opinion in Neurobiology. 14 (2), 169-177 (2004).
  2. Histed, M. H., Bonin, V., Reid, R. C. Direct acti....

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