तैयारी और व्यक्ति की विशेषता और मल्टी ड्रग शारीरिक रूप से बहुलक micelles फँस भरी हुई
Summary
The goal of this protocol is to describe the preparation and characterization of physically entrapped, poorly water soluble drugs in micellar drug delivery systems composed of amphiphilic block copolymers.
Abstract
Polyethyleneglycol- ब्लॉक -polylactic एसिड (पीएलए बी PEG-) जैसे Amphiphilic ब्लॉक सहपॉलिमरों जलीय वातावरण में हाइड्रोफिलिक गोले से घिरा हाइड्रोफोबिक कोर के गठन के लिए उनके महत्वपूर्ण micellar एकाग्रता ऊपर मिसेलस में स्वयं को इकट्ठा कर सकते हैं। इन मिसेलस की कोर docetaxel (DTX) और everolimus (ईवीआर) जैसे हाइड्रोफोबिक, खराब पानी में घुलनशील दवाओं लोड करने के लिए उपयोग किया जा सकता है। मिसेल संरचना और दवा लोड क्षमताओं के व्यवस्थित लक्षण वर्णन किया जा सकता है इन विट्रो और इन विवो अध्ययनों में पहले से महत्वपूर्ण हैं। यहाँ बताया प्रोटोकॉल का लक्ष्य मानकीकृत micellar उत्पादों को प्राप्त करने के लिए आवश्यक कदम लक्षण वर्णन प्रदान करना है। DTX और ईवीआर क्रमश इन मिसेलस की तैयारी में क्रमश: 1.86 और 1.85 मिलीग्राम / एमएल, करने के लिए DTX और ईवीआर के जलीय घुलनशीलता बढ़ जाती है जो विलायक कास्टिंग के माध्यम से प्राप्त किया जा सकता मिलीग्राम / 1.9 और 9.6 माइक्रोग्राम की आंतरिक solubilities है। Eval मिसेलस में ड्रग स्थिरता48 घंटा से अधिक कमरे के तापमान पर uated दवाओं के 97% या उससे अधिक के घोल में रखा जाता है कि इंगित करता है। मिसेल आकार गतिशील प्रकाश बिखरने का उपयोग कर मूल्यांकन और इन मिसेलस का आकार 50 एनएम से नीचे था और बहुलक का आणविक वजन पर निर्भर करता है कि संकेत दिया गया था। मिसेलस से दवा रिहाई 48 घंटा से अधिक 37 ओ सी में पीएच 7.4 से सिंक की शर्तों के तहत डायलिसिस का उपयोग कर मूल्यांकन किया गया था। वक्र ढाले परिणाम दवा रिहाई यह प्रसार प्रेरित है यह दर्शाता है कि एक पहले के आदेश की प्रक्रिया से प्रेरित है कि संकेत मिलता है।
Introduction
हाइड्रोफिलिक और हाइड्रोफोबिक डोमेन से बना दोहरा संरचना के साथ Amphiphilic ब्लॉक सहपॉलिमरों अनायास polymeric मिसेलस के रूप में जाना जाता है तीन आयामी macromolecular विधानसभाओं के लिए फार्म का स्वयं को इकट्ठा कर सकते हैं। इन संरचनाओं एक हाइड्रोफिलिक खोल से घिरा एक भीतरी हाइड्रोफोबिक कोर है। हाइड्रोफोबिक कोर शारीरिक फंसाने द्वारा हाइड्रोफोबिक बातचीत के माध्यम से या बहुलक रीढ़ की हड्डी पर रासायनिक विकार द्वारा या तो हाइड्रोफोबिक दवाओं को शामिल करने की क्षमता है। एक कई फायदे दवा वितरण के लिए मिसेलस फार्म के लिए इन ब्लॉक सहपॉलिमरों का उपयोग करने के लिए मौजूद हैं। इन पॉलिमर की खराब घुलनशील दवाओं के समावेश, निगमित दवाओं के pharmacokinetics में सुधार, और biocompatibility और / या biodegradability शामिल उन्हें पारंपरिक solubilizers के लिए एक सुरक्षित वैकल्पिक बना देता है। 2 polymeric मिसेलस का उपयोग करने का एक और लाभ यह 15 के बीच, उनके कोलाइडयन कण आकार है देहात के लिए उन्हें आकर्षक बनाने के लिए 150 एनएम 3,renteral वितरण। इसलिए, पिछले 20 वर्षों में polymeric मिसेलस विशेष रूप से कैंसर के उपचार के लिए खराब पानी में घुलनशील दवाओं के लिए व्यवहार्य दवा वितरण प्रणाली के रूप में उभरा है। 3,4
पिछले polyethyleneoxide युक्त triblock copolymer है, जबकि वर्तमान में क्लिनिकल परीक्षण के दौर से गुजर कैंसर के उपचार। क्लिनिकल परीक्षण में मिसेलस के 4 चार के लिए पांच polymeric micellar योगों खूंटी-आधारित diblock सहपॉलिमरों कर रहे हैं। इन मिसेलस का आकार 20 एनएम से 85 समुद्री मील दूर करने के लिए अलग। खूंटी आधारित पॉलिमर का उपयोग कर के लाभ उनके biocompatibility है और दूसरे खंड के आधार पर भी biodegradable हो सकता है। Polyethyleneglycol- ब्लॉक -polylactic एसिड (-PLA ख PEG-) polymeric मिसेलस के आधार पर हाल ही में नई दवा वितरण प्रणाली कई विरोधी दवाओं की समवर्ती प्रसव के लिए विकसित किया गया है। PEG- बी पीएलए मिसेलस biocompatible और biodegradable दोनों हैं। भरी हुई मिसेलस के रूप में दिखाया गया है ये बहु-दवाynergistic विट्रो और इन विवो 2,5,6 में अलग-अलग तरह के कैंसर के मॉडल के निषेध और प्रतिरोध को रोकने के लिए कीमोथेरेपी में कई दवाओं के उपयोग और विषाक्तता को कम करने की वर्तमान प्रतिमान में फिट। इसलिए, तैयारी और कैंसर और अन्य रोग राज्यों में उपयोग के लिए इन micellar दवा वितरण प्रणाली निस्र्पक में ब्याज की एक महान सौदा है।
काम में हम इस तरह के मिसेलस तैयार किया है और ब्याज की रोग राज्यों में उन्हें मूल्यांकन करने से पहले होती जा सकता है जिसके द्वारा एक कदम दर कदम प्रक्रिया रेखांकित किया है नीचे। इस काम के प्रयोजन के लिए दो खराब घुलनशील विरोधी कैंसर एजेंटों, docetaxel (DTX) और everolimus (ईवीआर) चुना गया है। DTX और ईवीआर दोनों क्रमश मिलीग्राम / 1.9 और 9.6 माइक्रोग्राम पर आंतरिक पानी solubilities के साथ खराब पानी में घुलनशील यौगिकों हैं। अलग आणविक वजन के साथ 7.8 दो PEG- ख -PLA पॉलिमर तैयार की polymeric के लिए ब्लॉकों इमारत के रूप में इस प्रोटोकॉल में इस्तेमाल किया गया मिसेलस,-PLA 1800 (3800 दा) और खूंटी 4000 – B – -PLA 2200 (6,200 दा) ख इन पॉलिमर खूंटी 2000 हैं। PEG- ख -PLA मिसेलस इसलिए DTX और ईवीआर व्यक्तिगत रूप से और संयोजन में एक nanocarrier के रूप में एक अनूठा मंच प्रदान कर सकते हैं। आवश्यक अभिकर्मकों / सामग्री और उपकरण तैयार करने और इन मिसेलस 1 टेबल में सूचीबद्ध हैं विशेषताएँ करने की जरूरत है।
Protocol
Representative Results
Discussion
The use of polymeric micelles for drug delivery continues to expand due to their versatility and ability to deliver hydrophobic drugs for various disease states. Therefore, the techniques needed to prepare and characterize these formulations prior to use in cell culture or animals is a critical first step to determine the best pairing between the drug and the polymer. PEG-b-PLA are excellent amphiphilic block copolymers for drug delivery purposes. However, the block length of the hydrophilic and hydrophobic s…
Divulgaciones
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
This study was supported by the grant from AACP New Pharmacy Faculty Research Award Program, Medical Research Foundation of Oregon New Investigator Grant, Oregon State University-Startup fund, and Pacific University, School of Pharmacy Start-up fund.
Materials
| PEG2000-b-PLA1800 | Advanced Polymer Materials, Inc | 6-01- PLA/2000 | PLA MW can be specified on ordering |
| PEG4000-b-PLA2200 | Advanced Polymer Materials, Inc | 6-01- PLA/4000 | PLA MW can be specified on ordering |
| Docetaxel | LC Laboratories | D-1000 | 100 mg |
| Everolimus | LC Laboratories | E-4040 | 100 mg |
| Acetonitrile | EMD/VWR | EM-AX0145-1 | HPLC grade; 4 L |
| Round bottom flask | Glassco/VWR | 89426-496 | 5 mL |
| RV 10 Control Rotary Evaporators | IKA Works | 8025001 | Rotoevaporator |
| Shimadzhu HPLC with DAD detector | Shimadzhu | RP-HPLC | |
| Slide-a-lyzer dialysis casette MWCO 7000 | Thermo Scientific, Inc | 66370 | 3 mL |
| Phosphate buffer pH 7.4 200 mM | VWR | 100190-870 | 500 mL |
| Malvern NanoZS | Malvern Instruments, UK | DLS | |
| Nylon filter | Acrodisc/VWR | 28143-242 | 13 mm; 0.2µM |
| Phosphoric acid, NF | Spectrum Chemical/VWR | 700000-626 | 100 mL |
| GraphPad Prism | www.graphpad.com | Analysis software | |
| Zorbax SB-C8 Rapid Resolution cartridge | Agilent Technologies | 866953-906 | 4.6 ×75mm, 3.5 micron |
Referencias
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