L'obiettivo di questo protocollo è descrivere la preparazione e la caratterizzazione di farmaci fisicamente intrappolati e scarsamente solubili in acqua in sistemi di somministrazione di farmaci micellari composti da copolimeri a blocchi anfifilici.
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Articolo metodologico
Preparazione e caratterizzazione di individuale e Multi-droga Loaded Fisicamente intrappolate polimerici Micelle
In questo articolo
Sommario
Abstract
Copolimeri a blocchi anfifilici come blocco polyethyleneglycol- acido -polylactic (PEG-b- PLA) possono auto-assemblarsi in micelle di sopra del loro concentrazione micellare critica che formano nuclei idrofobici circondati da gusci idrofili in ambienti acquosi. Il nucleo di queste micelle può essere utilizzato per caricare farmaci idrofobici, scarsamente idrosolubili come docetaxel (DTX) e everolimus (EVR). Caratterizzazione sistematica delle capacità della struttura micelle e droga di carico sono importanti prima in vitro e in vivo può essere effettuata. L'obiettivo del protocollo qui descritto è quello di fornire le misure di caratterizzazione necessari per realizzare prodotti micellari standardizzati. DTX e EVR hanno solubilità intrinseca di 1,9 e 9,6 mg / ml Preparazione di queste micelle può essere realizzato per fusione solvente che aumenta la solubilità in acqua di DTX e EVR a 1,86 e 1,85 mg / ml, rispettivamente. Stabilità droga in micelle evalranea a temperatura ambiente per 48 ore indica che il 97% o più dei farmaci sono mantenuti in soluzione. Dimensioni micella è stata valutata utilizzando light scattering dinamico e indicato che la dimensione di queste micelle era inferiore a 50 nm e dipendeva dal peso molecolare del polimero. Rilascio del farmaco da parte delle micelle è stata valutata utilizzando la dialisi, in condizioni sink a pH 7,4 a 37 ° C oltre 48 ore. Curve risultati adatti indicano che il rilascio del farmaco è guidato da un processo di primo ordine che indica che è guidato diffusione.
Introduzione
Copolimeri a blocchi anfifilici con struttura ripetendo composta da domini idrofili e idrofobi possono spontaneamente auto-assemblano a formare tre assemblee macromolecolari tridimensionali conosciuti come micelle polimeriche. Queste strutture hanno un core idrofobico interno circondato da un guscio idrofilo. Il core idrofobico ha la capacità di incorporare farmaci idrofobici mediante intrappolamento fisico attraverso interazioni idrofobiche o mediante coniugazione chimica a catena polimerica. 1 Molti vantaggi esistono per utilizzare questi copolimeri a blocchi per formare micelle per il drug delivery. Questi includono l'incorporazione di farmaci scars....
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Protocollo
1. Preparazione di singoli e multi-droga Micelle caricate da solvente Metodo Casting
- Pesare DTX 1 mg o EVR 1 mg o di entrambi i farmaci a 1 mg ciascuna per le micelle doppio farmaco (DDM).
- Pesare 15 mg di PEG 2000 - b -PLA 1800 e PEG 4000 - b -PLA 2200 sia per individuali o DDM.
- Sciogliere le droghe / farmaci e il polimero in 0,5 ml di acetonitrile e posto in un pallone a fondo tondo da 5 ml.
- Forma un film polimerico farmaco distribuito sottile facendo evaporare il farmaco (s) soluzione acetonitrile -polymer sotto pressione ridotta utilizzando un evaporatore rotante....
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Risultati
DTX individuali o micelle EVR e DTX e EVR DDM in PEG b -PLA micelle sono formulati con successo in entrambi i PEG 4000 - b -PLA 2200 o PEG 2000 - b -PLA 1800 (Figura 1).
DTX, EVR, e il DDM ha mostrato stabilità simile a PEG 4000 - b -PLA 2200 o PEG 2000 - b -PLA 1800 più di 48 ore (Figura 2). Caricamento farmacologic.......
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Discussione
L'uso di micelle polimeriche per la somministrazione di farmaci continua ad espandersi grazie alla loro versatilità e capacità di fornire farmaci idrofobici per vari stati patologici. Pertanto, le tecniche necessarie per preparare e caratterizzare queste formulazioni prima dell'uso in colture cellulari o animali sono un primo passo fondamentale per determinare il miglior abbinamento tra il farmaco e il polimero. PEG-b-PLA sono eccellenti copolimeri a blocchi anfifilici per la somministrazione di farmaci. Tutt.......
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Dichiarazioni
Gli autori non hanno nulla da rivelare.
Ringraziamenti
Questo studio è stato supportato dalla sovvenzione del programma AACP New Pharmacy Faculty Research Award, dal Medical Research Foundation of Oregon New Investigator Grant, dal fondo Oregon State University-Startup e dal fondo Pacific University, School of Pharmacy Start-up.
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Materiali
| Nome | Azienda | Numero di catalogo | Commenti |
|---|---|---|---|
| PEG2000-b-PLA1800 | Advanced Polymer Materials, Inc | 6-01- PLA/2000 | PLA MW può essere specificato al momento dell'ordine |
| PEG4000-b-PLA2200 | Advanced Polymer Materials, Inc | 6-01- PLA/4000 | PLA MW può essere specificato al momento dell'ordine |
| Docetaxel | LC Laboratories | D-1000 | mg |
| Everolimus | LC Laboratories | E-4040 | 100 mg |
| Acetonitrile | EMD/VWR | EM-AX0145-1 | grado HPLC; 4 L |
| Pallone a fondo tondo | Glassco/VWR | 89426-496 | ml |
| RV 10 Evaporatori rotanti di controllo | IKA Works | 8025001 | Rotoevaporatore |
| Shimadzhu HPLC con rivelatore DAD | Shimadzhu | RP-HPLC | |
| Slide-a-lyzer cassetta per dialisi MWCO 7000 | Thermo Scientific, Inc | 66370 | 3 ml |
| Tampone fosfato pH 7,4, 200 mM | VWR | 100190-870 | 500 ml |
| Malvern NanoZS | Malvern Instruments, UK | DLS | |
| Filtro in nylon | Acrodisc/VWR | 28143-242 | 13 mm; 0.2µ M |
| Acido fosforico, NF | Spectrum Chemical/VWR | 700000-626 | 100 ml |
| GraphPad Prism | www.graphpad.com | Software di | |
| Zorbax SB-C8 Cartuccia a risoluzione rapida | Tecnologie Agilent | 866953-906 | 4.6 &volte; 75 mm, 3,5 μ m |
Riferimenti
- Yokoyama, M. Polymeric micelles as a new drug carrier system and their required considerations for clinical trials. Expert Opin Drug Deliv. 7, 145-158 (2010).
- Shin, H. C., Alani, A. W., Rao, D. A., Rockich, N. C., Kwon, G. S.
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Ristampe e permessi
