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Artículo de método

Microelectrodos guiada implantación de electrodos en el Subtalámico Núcleo de ratas de largo plazo estimulación cerebral profunda

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DOI:

10.3791/53066

2 de octubre de 2015

En este artículo

Resumen

Se describe un método para implantar electrodos en el núcleo subtalámico (STN) de ratas. Se logró una mejor localización del STN mediante el uso de un sistema de micrograbación. Además, se presenta una configuración de estimulación que se caracteriza por conexiones duraderas entre la cabeza del animal y el estimulador.

Resumen

La estimulación cerebral profunda (DBS) es una terapia ampliamente utilizado y efectivo para varios trastornos neurológicos, como la enfermedad, la distonía o temblor de Parkinson idiopática. DBS se basa en el suministro de estímulos eléctricos a lo profundo estructuras anatómicas específicas del sistema nervioso central. Sin embargo, los mecanismos subyacentes el efecto de DBS siguen siendo enigmática. Esto ha dado lugar a un interés en investigar el impacto de DBS en modelos animales, especialmente en las ratas. Como DBS es un tratamiento a largo plazo, la investigación debe centrarse en los cambios moleculares genéticos de los circuitos neuronales que se producen varias semanas después de DBS. A largo plazo DBS en ratas es un reto porque las ratas se mueven alrededor de su jaula, lo que causa problemas en mantener en su lugar el cable que va desde la cabeza del animal al estimulador. Además, las estructuras diana para la estimulación en el cerebro de rata son pequeñas y por lo tanto los electrodos no pueden ser fácilmente colocados en la posición requerida. Así, una puesta a punto para larga duración STIMULAción de ratas utilizando electrodos de platino / iridio con una impedancia de aproximadamente 1 MW fue desarrollado para este estudio. Un electrodo con estas especificaciones permite no sólo la estimulación adecuada, sino también la grabación de las estructuras cerebrales profundos para identificar el área objetivo para DBS. En nuestra puesta a punto, un electrodo con un enchufe para el cable se ha incrustado en el cemento dental con cuatro tornillos de anclaje garantizados en el cráneo. El cable desde el enchufe para el estimulador estaba protegido por un resorte de acero inoxidable. A giratoria se conecta al circuito para evitar que el alambre se enrede. En general, esta estimulación configuración ofrece un alto grado de movilidad libre para la rata y permite que el tapón de cabeza, así como la conexión del cable entre el enchufe y el estimulador, para retener la fuerza de larga duración.

Introducción

La estimulación cerebral profunda (DBS) es un tratamiento basado en la entrega de los impulsos eléctricos a través de electrodos implantados en las estructuras cerebrales específicas, tales como el globo pálido interno globus 1, el núcleo subtalámico (STN) 2-4 o el tálamo ventral intermedio 5. En las dos últimas décadas, este tratamiento se ha establecido como una herramienta terapéutica potente para la enfermedad de Parkinson 1 - 4, distonía 6 y el temblor 7, y también se utiliza para modular el dolor crónico 7, trastornos psiquiátricos (por ejemplo, trastorno obsesivo-compulsivo <....

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Protocolo

Los experimentos con animales fueron aprobados por la Universidad de Würzburg y las autoridades estatales legales (Baja Franconia, número de homologación: 54-2531.01-102 / 13) y realizado de acuerdo con las recomendaciones para la investigación en el accidente cerebrovascular experimental estudia 17 y la corriente de Investigación de Animales: Notificación de En Vivo Directrices Experimentos (http://www.nc3rs.org.uk/arrive-guidelines).

1. Anestesia

  1. Compruebe el sistema de anestesia para garantizar cantidades adecuadas de suministro de gas (oxígeno) y el isoflurano durante la duración del procedimiento. Conec....

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Resultados

La implantación de un electrodo dentro de la STN de una rata utilizando un sistema de grabación - tal como se presenta aquí - es un procedimiento eficaz y preciso para DBS que tarda aproximadamente 1 hr por animal. Este modelo es un procedimiento bastante menor: de cada 10 ratas sometidas a cirugía, todos sobrevivieron a la intervención. Veinticuatro horas después de la intervención, el estado de cada rata se monitorizó y ningún animal logra más de 1 de 3 puntos según el código de gravedad. Durante el período de estimul.......

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Discusión

Este estudio presenta un conjunto paso a paso las instrucciones para la implantación de un electrodo monopolar crónica en el STN de ratas. Aunque electrodos de tungsteno con baja impedancia se utilizan a menudo para DBS 18,19, un electrodo monopolar de platino / iridio (Pt / Ir) fue empleado que tenía una impedancia de aproximadamente 1 MW. Electrodos de Pt / Ir también se utilizan en pacientes con la enfermedad de Parkinson debido a sus propiedades favorables: demuestran la erosión mínima 20.......

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Divulgaciones

Los autores declaran que no tienen intereses financieros contrapuestos.

Agradecimientos

Deseamos agradecer al Sr. Wabbel por preparar los cables y al Sr. Tietsch por construir los tapones y las jaulas de acuerdo con nuestros planes. Este trabajo fue apoyado por la Deutsche Forschungsgemeinschaft (Sonderforschungsbereich 688). Felix Fluri es becario del Interdisziplinäre Zentrum für Klinische Forschung (IZKF), Clínicas Universitarias de Würzburg, Alemania.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Electrodo Pt/IrFHC Inc.UEHecho a medida: Especificación:
UEPSEGSECN1M EnchufesGT Labortechnik (Arnstein/Alemania)A medida
Cabezal de clavijaDISTRELEC143-95-324de una fila, 90° 1x3 datamate, Tipo M80-8420342
ZócaloDISTRELEC143-95-621de una fila, recto de 2 mm de poste n.º 1 x 3 datamate, Tipo M80-8400342
Muelle de acero inoxidablePlásticos ONESS0102Parte-#: .120 X .156 ID del resorte (mm): 3.0  Diámetro exterior del muelle (mm): 4,0
Cemento dental/PaladurHeraeus Kulzer64707938Líquido, 500 ml
Cemento dental/PaladurHeraeus Kulzer64707954Polvo, rosa, 500 g
Tornillo de cabezaHummer & ReissV2ADIN84 M1.6x3
Jodosept PVPVetoquinol435678/E04
Mepivacaína 1%AstraZenecaPZN03338515
EpinefrinaSanofi-AventisPZN00176118
Clorhidrato de TramadolRotexmedica38449.00.00

Referencias

  1. Kumar, R., Lang, A. E., et al. Deep brain stimulation of the globus pallidus pars interna in advanced Parkinson’s disease. Neurology. 55 (12 Suppl 6), S34-S39 (2000).
  2. Volkmann, J., Allert, N., Voges, J., Weiss, P. H., Freund, H. -J., Sturm, V.

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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Implantación de microelectrodosestereotaxia cerebral de rataguía de registro de electrodosfijación con cemento dentalestimulación a largo plazoregistro de la actividad neuronalverificación histológicaprocedimiento quirúrgico