Condiciones que afectan Espacio Social en Drosophila melanogaster

Summary

El efecto de los genes y el medio ambiente en el espacio social de Drosophila melanogaster se puede cuantificar a través de un paradigma analítico potente pero sencillo. Mostramos aquí diferentes factores que pueden afectar a este espacio social, y por lo tanto deben ser tenidos en cuenta a la hora de diseñar experimentos en este paradigma.

Abstract

El ensayo espacio social descrito aquí puede ser utilizado para cuantificar las interacciones sociales de Drosophila melanogaste r - u otros insectos pequeños - en una manera directa. Como ya hemos demostrado ^1, en ​​una cámara de dos dimensiones, que las moscas primera fuerza para formar un grupo apretado, posteriormente que les permite tomar su distancia preferida entre sí. Después de que las moscas se han asentado, medimos la distancia al vecino más cercano (o espacio social), el procesamiento de una imagen estática con el software en línea gratis (ImageJ). El análisis de la distancia al vecino más cercano permite a los investigadores para determinar los efectos de los factores genéticos y ambientales en la interacción social, mientras que el control de los posibles factores de confusión. Diversos factores, como la capacidad de escalada, la hora del día, el sexo, y el número de moscas, puede modificar el espaciamiento social de las moscas. Por ello, proponemos una serie de controles experimentales para mitigar estos efectos de confusión. Este ensayo puedeser utilizado para al menos dos propósitos. En primer lugar, los investigadores pueden determinar cómo su turno ambiental favorito (como el aislamiento, la temperatura, el estrés o toxinas) afectará el espaciamiento social de ^1,2. En segundo lugar, los investigadores pueden diseccionar las bases genéticas y neuronales de esta forma básica de la conducta social ^1,3. En concreto, se utilizó como una herramienta de diagnóstico para estudiar el papel de los genes ortólogos se cree que participan en el comportamiento social en otros organismos, tales como genes candidatos para el autismo en los seres humanos ^4.

Introduction

Las interacciones sociales son cruciales para el buen desarrollo y la salud de los individuos dentro de un grupo como un todo, y se pueden observar a través de numerosas especies, desde los seres humanos (Homo sapiens) a organismos más simples como la mosca de la fruta (Drosophila melanogaster) ^5,6. Una mosca de la fruta individuo o medios comunes comparten humana para procesar la información sensorial durante estas interacciones, ya sea: auditiva, visual, olfativa, táctil, o gustation. Nosotros y otros la hipótesis de que existe una neurocircuitos potencialmente compartida subyacente respuestas de comportamiento a las interacciones socia....

Protocol

1. Equipos y Reactivos Creado Dentro de la casa (Ver Lista de Materiales de los demás)

1. Preparar un aparato de anestesia frío Drosophila como se describe anteriormente ^8.
2. Preparar un aspirador de mosca como se describió anteriormente ^13.
3. Preparar las cámaras y los titulares de espacios sociales.
   1. Ordenar o hacer cristales y separadores acrílicos para crear las cámaras espaciales sociales. Cada cámara de espacio social consta de dos paneles de vidrio cuadradas (17,6 cm por 17,6 cm, con un espesor de 0,3 cm), dos espaciadores de acrílico triángulo rectángulo (con una altura de 16,5 cm, una base de 8,9....

Results

La cámara de espacio social se puede utilizar como una herramienta para cuantificar el comportamiento social de Drosophila melanogaster. Espaciadores de acrílico y paneles de vidrio se recortan para formar un espacio triangular interior que proporciona un área de dos dimensiones en el que las moscas pueden formar grupos estables sin la presencia de muchas señales de confusión potenciales. Cuando las moscas se trasladan a la arena vertical, que se asustan al ser golpeado ligeramente hacia abajo, y responden por .......

Discussion

En este protocolo, se describe un procedimiento detallado para la cuantificación del espacio social. Algunos pasos cruciales para asegurar el experimento tiene éxito son: 1) Siempre use guantes al limpiar y configurar el aparato, para mantener sus propios aceites y aromas de la cámara interior del aparato, 2) asegurarse de moscas se recogen al menos un día antes el experimento para reducir los posibles efectos de la anestesia frío, 3) 2 h antes del experimento proporciona nuevos viales que contienen los alimentos fresco.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Microscopio estereoscópico con zoom	Nikon	SMZ-645	Cualquier otro visor estándar para el manejo de moscas funcionaría
Pinceles pequeños			para empujar moscas
Jazz-mix	Fisher	33545	cualquier otro alimento estándar para drosophila funcionaría
Mini-Alarma Temporizador/Cronómetro
Bolígrafos
Cinta
Pinzas de carpeta de		Grapas	para mantener las cámaras unidas: Clips medianos de 1-1/4" (32 mm) con capacidad de 5/8"
Soportes	pequeños Carolina	707161	para mantener las cámaras en una orientación vertical
Abrazaderas de bureta	Carolina 707362
Cámara digital	Nikon	Coolpix S8000	para tomar las fotografías fijas
Regla			para poder escalar el cuadro de
tríptico y la tapa			para proporcionar un fondo blanco y una luz homogénea.
Almohadilla de golpeo:	cualquier alfombrilla
Prisma 6	GraphPad Software Inc.	Prisma 6 para Mac OS X	Cualquier software de análisis estadístico con t-test, ANOVA de un factor y de dos vías funcionaría