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Artículo de método

Uso Individual sensillum grabación para detectar respuestas olfativo neurona de chinches de cama a Semioquímicos

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DOI:

10.3791/53337

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18 de enero de 2016

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En este artículo

Resumen

Las chinches dependen de las neuronas receptoras olfativas alojadas en su sensibilidad olfativa antenal para detectar semioquímicos en el medio ambiente. Utilizando el registro de un solo sensillum, demostramos un método para evaluar la respuesta de las chinches a los semioquímicos y exploramos el proceso de codificación involucrado.

Resumen

El sistema olfativo insecto desempeña un papel importante en la detección de semioquímicos en el ambiente. En particular, la sensilla antenal que alojan las neuronas individuales o múltiples en el interior, se consideran para hacer la mayor contribución en la respuesta a los estímulos químicos. Al registrar directamente potencial de acción en el sensillum olfatoria después de la exposición a los estímulos, grabación sensillum sola técnica (SSR) ofrece un enfoque poderoso para investigar las respuestas neurales de los insectos a los estímulos químicos. Para el insecto de la cama, que es un conocido parásito humano, se han caracterizado múltiples tipos de sensillum olfativo. En este estudio, hemos demostrado respuestas neurales de chinches sensilla olfativa a dos estímulos químicos y las respuestas dependientes de la dosis a una de ellas por el método de la RSS. Este enfoque permite a los investigadores para llevar a cabo la detección temprana de los estímulos químicos individuales en el olfativo sensilla chinches, que proporcionarían información valiosa para el desarrollo de nuevos atrayentes o repelentes de chinches y los beneficios de los esfuerzos de control de chinches.

Introducción

La chinche de cama común Cimex lectularius L (Hemiptera: Cimicidae), como un ectoparásito temporal, es un insecto hematófago obligado, lo que significa su supervivencia, desarrollo y reproducción requieren fuentes de sangre de los ejércitos, incluidos los seres humanos y los animales 1,2. Aunque la transmisión del virus rara vez ha sido reportado por C. lectularius, las molestias morder generada por una infestación afecta gravemente a los ejércitos, tanto física como psicológicamente 3. La introducción y el uso generalizado de insecticidas químicos, especialmente DDT, bajaron el riesgo de plagas y para el final de las ....

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Protocolo

1. Preparación de Instrumentos, Soluciones de estímulos, y los insectos de cama

  1. Preparar una solución de 50% KNO 2 (w / v) en una botella de 20 ml.
  2. Afilar dos microelectrodos de tungsteno en solución KNO 2 a 5 V por inmersión en repetidas ocasiones los electrodos de tungsteno dentro y fuera de la solución.
    1. Aproximadamente afilar el alambre de tungsteno por inmersión de aproximadamente 10 mm del alambre de tungsteno dentro y fuera de la solución de KNO 2 a la velocidad de 2 inmersiones / seg durante aproximadamente 5 min, lo que puede consumir en gran medida el extremo frontal del alambre de tungsteno.

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Resultados

Grabación individual sensillum es una poderosa técnica de investigación utilizada en los estudios de ecología química de insectos y fisiología neuronal. La investigación de las respuestas neurales de los insectos a los diferentes compuestos volátiles, especialmente los que piensa que es ecológico relacionado con la supervivencia y el desarrollo de los insectos, no sólo nos da una visión muy valiosa en el proceso de olfato de insectos, pero también abre nuevas vías prometedoras que potenc.......

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Discusión

La técnica individual sensillum grabación ha sido ampliamente utilizado en la prueba de las respuestas neurales de insectos como las moscas de la fruta, mosquitos y chinches a diferentes estímulos químicos en el medio ambiente. Estos estímulos químicos a menudo se disuelven y se diluyen en un disolvente común a fin de preparar diferentes dosis de los tratamientos. Sin embargo, diferentes disolventes pueden producir muy diferentes tasas de liberación de los estímulos. Estudios anteriores sobre algunos insectos estudiados.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

El proyecto fue apoyado por la Adjudicación AAES 461Hatch/Multistate Grants ALA08-045 y ALA015-1-10026 a N.L.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Alambre de tungstenoA-M SYSTEMS#716500Se utiliza para preparar el electrodo
KNO2Sigma#310484Se utiliza para afilar el alambre de tungsteno
Fuente de alimentación de CABK Precision1653AProporcionar el voltaje en el afilado del alambre de tungsteno
Microscopio Leica Z6 APOLeica10447424 Se utiliza para observar la sensibilidad en las antenas
Controlador SimulusSyntech CS-55Se utiliza para controlar la aplicación
estímulos Controlador de adquisición USB de 4 canalesSyntechIDAC-4Visualización en pantalla en tiempo real de todas las señales antes y durante la grabación Fuente de
luzSCHOTTA20500Proporcionar fuentes de luz para la observación
MicromanupuladorLeica 115378Se utiliza para movimientos menores de
electrodo AltavozJuster95aConectado con el controlador de adquisición IDAC-4 y que proporciona sonido para la señal
Soporte magnéticoNarishigeGJ-1Se utiliza para sujetar el electrodo de referencia, la chinche estabilizada y el tubo de suministro de estímulos
TMC Mesa de aislamiento de vibracionesTMC63-500Se utiliza para aislar la vibración de los equipos
CoverslipTedpella2225-1Se utiliza para sujetar la chinche
Cinta adhesiva de doble cara3MXT6110Se utiliza para estabilizar la chinches en el clip de cubierta
Cera dentalDentakitDK-R012Se utiliza para sostener el clip de cobertura donde se estabiliza la chinche 
de

Referencias

  1. Bartonicka, T., Gaisler, J. Seasonal dynamics in the numbers of parasitic bugs (Heteroptera, Cimicidae): a possible cause of roost switching in bats (Chiroptera, Vespertilionidae). Parasitol Res. 100 (6), 1323-1330 (2007).
  2. Thomas, I., Kihiczak, G. G., Schwartz, R. A.

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Reimpresiones y permisos

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