Puesta a punto del paralelo Columna de flujo segmentado y habilitación de detección de multiplexado

Summary

Aquí, presentamos un protocolo para el funcionamiento y ajuste de columnas de cromatografía de flujo segmentadas paralelas para permitir la detección multiplexada.

Abstract

Tecnología de flujo activo (AFT) es una nueva forma de tecnología de columna que fue diseñada para superar la heterogeneidad del flujo para aumentar el rendimiento de la separación en términos de eficiencia y sensibilidad, y para permitir la detección multiplexada. Esta forma de AFT utiliza una columna de flujo segmentado paralelo (PSF). Un accesorio de extremo de salida de columna PSF consta de 2 o 4 puertos, que se pueden multiplexar para conectar hasta 4 detectores. La columna PSF no solo permite una plataforma para la detección multiplexada, sino también la combinación de detectores destructivos y no destructivos, sin tubos de volumen muerto adicionales, simultáneamente. La cantidad de flujo a través de cada puerto también se puede ajustar a través de la gestión de la presión para adaptarse a los requisitos de un detector o detectores específicos. Para lograr la detección multiplexada utilizando una columna PSF, hay una serie de parámetros que se pueden controlar para garantizar un rendimiento de separación óptimo y la calidad de los resultados; es decir, las dimensiones del tubo para cada puerto, la elección del puerto para cada tipo de detector y el ajuste del flujo. Este protocolo está destinado a mostrar cómo usar y ajustar una columna PSF que funciona en un modo de detección multiplexado.

Introduction

Columnas Tecnología Flow Activo

Tecnología de flujo activo (AFT) columnas de cromatografía fueron desarrollados recientemente para superar la ineficiencia en las separaciones asociados a la heterogeneidad del flujo ^1-6 y también para permitir la detección de multiplexado. En esta comunicación detalle que en particular el proceso operativo del paralelo segmentado flujo (PSF) columna con detección de multiplexado. Las ventajas funcionales clave de la columna de la PSF son: (1) el flujo desde la región central radial del lecho de la columna está aislada de la región periférica o la pared del flujo, (2) el volumen ....

Protocol

Nota: Este protocolo contiene instrucciones sobre cómo utilizar una columna de fibras discontinuas de poliéster en un sistema HPLC junto con múltiples detectores para la detección de multiplexado. El protocolo se ha escrito asumiendo que el lector tiene conocimientos básicos y experiencia en cromatografía y diversos métodos de detección de HPLC.

Precaución: Por favor, consulte las hojas de datos de seguridad de materiales (MSDS) para todos los materiales y los reactivos antes de su uso (es decir, Pedidos de metanol). Asegúrese de que el uso de todas las prácticas apropiadas de seguridad al manejar disolventes y High Performance L....

Results

Un análisis de HPLC multiplexada se llevó a cabo utilizando una columna de AFT en el modo de PSF (Figura 1) y configurar como se ilustra en la Figura 2. Este tipo de configuración permite una muestra de café que va a analizarse simultáneamente usando UV-Vis, DPPH ^• y MS en total Contador de Ion modo (TIC). Los compuestos de la muestra de café que respondió a DPPH ^• podrían entonces ser fácilmente emparejados a los UV-Vis y MS - respuestas TIC basad.......

Discussion

Este estudio consiste en la caracterización y perfiles de café usando HPLC con detección multiplexado empleando una columna paralela flujo segmentado (PSF). Multiplexado HPLC utilizando columnas de PSF permite la caracterización y la identificación de entidades químicas clave mediante la reducción de la complejidad de los datos de la muestra, mientras que la obtención de un mayor grado de información molécula específica dentro de una fracción del tiempo que tarda el uso de procesos convencionales multi-detección. La col.......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Instrumento			Múltiples detectores de elección para la detección multiplexada. Los detectores elegidos pueden requerir instrumentación adicional, p. ej., , bomba.
Columna de HPLC de flujo segmentado paralelo	Thermo Fisher Scientific	No definido	Pronto se comercializará
Metanol	Cualquier marca		de grado HPLC
	Cualquier marca		Varias longitudes y diámetro interior.
Topes de columna	Cualquier marca		Para bloquear puertos periféricos no utilizados.
Cortador de tubos de PEEK	Cualquier marca
Balanza de báscula analítica	Cualquier marca
Cronómetro	Cualquier marca
Recipientes de recolección de eluyentes	Cualquier marca		Los viales de muestra de 1-2 ml se pueden utilizar como recipientes de recolección de eluyentes