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Síntesis de Cd-libre EAD / ZnS puntos cuánticos Adecuado para aplicaciones biomédicas

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DOI:

10.3791/53684

6 de febrero de 2016

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Resumen

En este protocolo, se detalla la síntesis de puntos cuánticos (QDs) InP/ZnS libres de Cd. Los QD basados en InP están ganando popularidad debido a la toxicidad de los iones Cd2+ que pueden liberarse a través de la degradación de nanopartículas. Después de la síntesis, los QD se solubilizan en agua utilizando un polímero anfifílico para su uso en aplicaciones biomédicas.

Resumen

Los nanocristales fluorescentes, específicamente los puntos cuánticos, han sido una herramienta útil para muchas aplicaciones biomédicas. Para un uso exitoso en sistemas biológicos, los puntos cuánticos deben ser altamente fluorescentes y de tamaño pequeño/monodisperso. Si bien los puntos cuánticos basados en cadmio de uso común poseen estas cualidades, son potencialmente tóxicos debido a la posible liberación de iones Cd2+ a través de la degradación de nanopartículas. Los puntos cuánticos basados en indio, específicamente InP/ZnS, se han explorado recientemente como una alternativa viable a los puntos cuánticos basados en cadmio debido a sus características de fluorescencia y tamaño relativamente similares. La síntesis presentada aquí utiliza técnicas estándar de inyección en caliente para un crecimiento efectivo de nanopartículas; Sin embargo, las propiedades de las nanopartículas, como el tamaño, la longitud de onda de emisión y la intensidad de la emisión, pueden cambiar drásticamente debido a pequeños cambios en las condiciones de reacción. Por lo tanto, las condiciones de reacción, como la temperatura, la duración de la reacción y la concentración de precursores, deben mantenerse con precisión para producir productos reproducibles. Debido a que los puntos cuánticos no son inherentemente solubles en soluciones acuosas, también deben someterse a una modificación de la superficie para impartir solubilidad en agua. En este protocolo, se utiliza un polímero anfifílico para interactuar tanto con ligandos hidrofóbicos en la superficie del punto cuántico como con moléculas de agua solvente a granel. Aquí, se proporciona un protocolo detallado para la síntesis de puntos cuánticos InP/ZnS altamente fluorescentes que son adecuados para su uso en aplicaciones biomédicas.

Introducción

Los puntos cuánticos (QDs) son semiconductores nanocristales que exhiben propiedades fluorescentes cuando se irradian con luz 1. Debido a su pequeño tamaño (2-5 nm), que es similar a muchas biomoléculas más grandes, y la facilidad de biofuncionalización, los puntos cuánticos son una herramienta muy atractiva para aplicaciones biomédicas. Ellos han encontrado uso en el etiquetado biológica, una sola molécula de imágenes de células vivas, la administración de fármacos, de formación de imágenes in vivo, la detección de patógenos, y el seguimiento de la célula, entre muchos otros usos 2-8.

Los puntos cuánticos b....

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Protocolo

1. Síntesis de fosfuro de indio / sulfuro de zinc (InP / ZnS) Quantum Dots

  1. Síntesis de fosfuro de indio (InP) Quantum Dot Núcleos
    1. Montar un fondo redondo de 100 ml, de 3 bocas, con un condensador de 12 pulgadas. Añadir 30 ml de oleilamina (OLA), cloruro de 0,398 g de indio (III) (incl 3), 0,245 g de cinc (II) cloruro (ZnCl2) y se agita durante la evacuación a temperatura ambiente usando un vacío durante 1 hora. La solución debería aparecer incoloro con un precipitado blanco.
    2. El uso de una manta de calentamiento con un termopar y controlador de temperatura proporcional-integral-derivativo (PID), aume....

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Resultados

Los núcleos no recubiertos InP no demuestran fluorescencia visible por el ojo sustancial. Sin embargo, InP / ZnS (core / shell) puntos cuánticos fluorescentes brillantes parecen a simple vista bajo irradiación UV. La fluorescencia de InP / ZnS los puntos cuánticos se ha caracterizado mediante espectroscopía de fluorescencia. El espectro de fluorescencia de los puntos cuánticos en hexanos (Figura 1) se excita a 533 nm muestra un pico principal centrado a 600 nm con una an.......

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Discusión

Este protocolo se detalla la síntesis de los puntos cuánticos InP / ZnS altamente fluorescentes que se pueden utilizar en muchos sistemas biológicos. Los productos sintetizados QD aquí exhiben un solo pico de emisión de fluorescencia centrada en 600 nm con una FWHM de 73 nm (Figura 1), que es comparable a otras síntesis anteriormente descritos 12. El tiempo de reacción y la temperatura de reacción son pasos muy importantes debido a su profundo efecto sobre la calidad de la síntesis de QD y re.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Los autores agradecen el Departamento de Química y la Escuela de Graduados de la Universidad Estatal de Missouri por su apoyo a este proyecto. También reconocemos el Laboratorio de Microscopía Electrónica en el Laboratorio Nacional de Investigación del Cáncer de Frederick para el uso de su microscopio electrónico de transmisión y rejillas recubiertas de carbono.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
OleylaminaAcros129540010
Cloruro de zinc (II)Sigma030-003-00-2
Cloruro de indio (III)Chem-Impex24560
Tris(dimetilamino)fosfinaEncompass50-901-10500
1-dodecanetiolAcros117625000
HexanosFisher SciH292-4
AcetonaTransChemicalUN 1090
Estearato de zincAldrich Chem307564-1KG
TetrahidrofuranoAcros34845-0010
Agua molecularFisher SciBP2470-1
Poli(anhyrdride-maleico-alt-1-tetradeceno), 3-(dimetilamino)-1-propilamina derivado Sigma90771-1G
Ácido bóricoFisher SciBP168-500
Tetraborato de sodio DecahidratoFisher SciBP175-500
Rhodamina BAldrich ChemR95-3
Gas nitrógenoAirgasUN1066
Azul tripánThermo SciSV30084.01
Jeringa Luer-lock de plástico de 3 mlBD309657
Luer-lock NeedleAir-Tite83000144714 pulgadas, calibre 22
Tubo de centrífuga de polipropileno de 50 mlFalcon352098
Botella de centrífuga de 250 mlThermo Sci05-562-23 Tubos deNalgene PPCO
5 mlArgos-TechT2076
Tubos de microcentrífuga de 1,5 mlBio Plas4150
0.1 μ m Filtro de jeringaWhatman6786-1301Puradisc Filtro de nylon de 13 mm
Slide-A-Lyzer MINI Unidad de diálisisThermo Sci6959020,000 MWCO
Evaporador rotativoHeidolph
Centrífuga 5072EppendorfCubo oscilante con 50  Adaptadores de tubo ML
Espectrómetro UV/VIS Lambda 650Perkin ElmerEspectrofotómetro UV-Vis
LS 55 Espectrómetro de fluorescenciaPerkin ElmerFluorímetro
Axio Observer.A1Microscopio de epifluorescenciaZeiss
AxioCam MRmCámara CCD Zeiss
Microscopio Tecnai TF20FEIMiscroscopio de electrones Transmisison
Cámara TEM Eagle CCDFEITEM CCD
NanoBrook Omni DLSBrookhavenInstrumento dinámico de dispersión de luz
centrífuga

Referencias

  1. Alivisatos, A. P. Semicondictor clusters, nanocrystals, and quantum dots. Science. 271 (5251), 933-937 (1996).
  2. Michalet, X., et al. Quantum dots for live cells, in vivo imaging, and diagnostics. Science. 307 (5709), 538-544 (2005).
  3. Jaiswal, J. K., Mattouss....

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Formal Correction: Erratum: Synthesis of Cd-free InP/ZnS Quantum Dots Suitable for Biomedical Applications
Posted by JoVE Editors on 2/29/2016. Citeable Link.

A correction was made to: Synthesis of Cd-free InP/ZnS Quantum Dots Suitable for Biomedical Applications. There was an error with an author's given name. The author's name was corrected to:

Katye M. Fichter

from:

Kathryn M. Fichter

Etiquetas

S ntesis de puntos cu nticost cnica de inyecci n en calientemodificaci n de superficiesolubilidad en aguaespectroscopia UV visiblemicroscop a electr nica de transmisi nensayo de viabilidad celularespectroscopia de fluorescencia

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