Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.

Artículo de método

Un protocolo para la producción de nanopartículas gliadina-cianoacrilato para el recubrimiento hidrofílico

6.6K visualizaciones

DOI:

10.3791/54147

8 de julio de 2016

En este artículo

Resumen

Este artículo presenta un protocolo para la producción de nanopartículas basadas en proteínas que cambia la superficie hidrofóbica a hidrófila. La nanopartícula producida es un ensamblaje de copolímeros diblock de gliadina-cianoacrilato. El recubrimiento por pulverización con la nanopartícula producida cambia la superficie del material objetivo a una superficie hidrófila.

Resumen

Este artículo presenta un protocolo para la producción de nanopartículas a base de proteínas que cambia la superficie hidrófoba a hidrófila mediante un simple revestimiento por pulverización. Estas nanopartículas son producidas por la reacción de polimerización de cianoacrilato de alquilo en la superficie de moléculas (gliadina) de proteínas de cereales. Alquil cianoacrilato es un monómero que se polimeriza al instante a TA cuando se aplica a la superficie de los materiales. Su reacción de polimerización se inicia por las trazas de especies débilmente básicos o nucleófilos en la superficie, incluyendo la humedad. Una vez polimerizado, los cianoacrilatos de alquilo polimerizados muestran una fuerte afinidad con los materiales objeto porque grupos nitrilo se encuentran en la cadena principal de poli (cianoacrilato de alquilo). Las proteínas también funcionan como iniciador para esta polimerización, ya que contienen grupos amina que pueden iniciar la polimerización de cianoacrilato. Si la proteína agregada se utiliza como un iniciador, agregado proteico está rodeado por el hidrófobopoli (cianoacrilato de alquilo) cadenas después de la reacción de polimerización de cianoacrilato de alquilo. Mediante el control de la condición experimental, se producen partículas en el rango nanométrico. Las nanopartículas producidas adsorben fácilmente a la superficie de la mayoría de materiales incluyendo vidrio, metales, plásticos, madera, cuero, y telas. Cuando la superficie de un material se pulveriza con la suspensión de nanopartículas producida y se enjuagó con agua, la estructura micelar de nanopartículas cambia su conformación, y las proteínas hidrófilas están expuestos al aire. Como resultado, la superficie recubierta con nanopartículas cambia a hidrófilo.

Introducción

El objetivo de este artículo es mostrar el protocolo para la preparación de suspensión de nanopartículas que modifica la propiedad humectante de los materiales mediante una simple pulverización. La suspensión de nanopartículas presentada está hecha de cianoacrilato de alquilo1 y una proteína de cereal, gliadina2,3. Durante el proceso de fabricación, se forman agregados de proteínas en etanolacuoso 4. La reacción posterior con el monómero (cianoacrilato de alquilo) produce la nanopartícula que está compuesta por un núcleo de proteína rodeado por cadenas poliméricas lineales [poli(cianoacrilato de alquil)]5.

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Protocolo

1. Desengrasante gliadina Comercial

  1. Medir 150 ml de acetona con un cilindro graduado y se vierte en 250 ml matraz Erlenmeyer.
    1. Mientras se agita con una barra magnética en un agitador magnético a temperatura ambiente, añadir 30 g de polvo de gliadina comercial. Sellar la abertura del matraz con papel de aluminio, y mantener en agitación O / N en la campana.
  2. Filtrado de la solución con un papel de filtro.
    1. Se lava el filtrado con acetona fresca (ca. 50 ml). Dejar reposar durante 10 minutos para permitir que la acetona se drene.
    2. Transferir el filtrado junto con el papel de filtro por debajo de un plato grande tal....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Resultados

Las nanopartículas se pueden preparar en diversas condiciones de reacción. Formas de gliadina se agregan en una amplia gama de contenido de etanol 5. Sin embargo, el tamaño de los agregados debe ser lo más pequeño posible, ya que una capa adicional (es decir., La CEPA polimerizado) se añadirá a este agregado y este proceso hará que el tamaño final más grande. Si el tamaño final de partícula es demasiado grande, la partícula será inestable y fácilmente ser precipitado........

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Discusión

Hay varios pasos críticos en la producción de la suspensión de nanopartículas. Si la gliadina purificada contiene impurezas, la reacción con ECA producirá productos secundarios. Aunque estos productos no deseados se pueden eliminar del medio de reacción durante la etapa de centrifugación, reduce el rendimiento del producto principal. Si la solución de gliadina preparada durante el paso experimental 2.3) no muestra una separación clara entre el sobrenadante y el precipitado después de dos días, la solución debe permanecer.......

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Divulgaciones

La mención de nombres comerciales o productos comerciales en esta publicación es únicamente con el propósito de proporcionar información específica y no implica recomendación o respaldo por parte del Departamento de Agricultura de EE. UU. El USDA es un proveedor y empleador que ofrece igualdad de oportunidades.

Agradecimientos

Gracias al Sr. Jason Adkins para la asistencia técnica de expertos.

....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Monómero de cianoacrilato de etilo (ECA)K& R International (Laguna Niguel, CA)I-1605Se puede utilizar cualquier ECA puro.
GliadinMGP Ingredients, Inc (Atchison, KS)El regalo de la empresaGliadin se puede comprar en Sigma-Aldrich (cat #: G3375-25G). En lugar de gliadina, cualquier comercial  Se puede utilizar gluten.
HClCualquieraSe puede utilizar cualquier producto químico de grado reactivo.
AcetonaCualquieraSe puede utilizar cualquier producto químico de grado reactivo.
MetanolCualquieraSe puede utilizar cualquier producto químico de grado reactivo.
Etanol (100%)CualquieraSe puede utilizar cualquier producto químico de grado reactivo.
Papel de filtroCualquieraSe puede utilizar cualquier grado de papel de filtro de más de 10 cm.
Plato cuadrado de cultivo celularCualquieraSe puede utilizar cualquier plato de más de 20 x 20 cm.
Molinillo de caféCualquieraSe puede utilizar cualquier molinillo de café.
Evaporador rotativoCualquieraSe puede utilizar cualquier evaporador rotativo.
LiofilizadorCualquieraCualquier liofilizador que pueda alcanzar -70 & grados; Se puede utilizar C.
CentrífugaCualquieraSe puede utilizar cualquier centrífuga que pueda aplicar 1.000 x g.
Agitador magnéticoCualquieraSe puede utilizar cualquier agitador magnético que pueda girar la barra de giro a 1.000 rpm.
Dispersión dinámica de luz (DLS)analizador de potencial NanoBrook Omni ZetaDLS de Brookhaven Instruments Corporation de cualquier empresa.
Microscopio electrónico de barrido (SEM)Carl Zeiss Inc.Se puede utilizar cualquier SEM.
Ángulo de contacto dinámico (DCA)Thermo CahnSe puede utilizar cualquier DCA.
Se puede utilizar el Instrumentos

Referencias

  1. Vauthier, C., Dubernet, C., Fattal, E., Pinto-Alphandary, H., Couvreur, P. Poly(alkylcyanoacrylates) as biodegradable materials for biomedical applications. Adv. Drug Deliver. Rev. 55, 519-548 (2003).
  2. Wieser, H. Chemistry of gluten proteins. Food Microbiol. 24, 1....

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Nanopartículas de gliadinapolimerización de cianoacrilatoagregados proteicoscianoacrilato de etilodispersión de luz dinámicamedición del ángulo de contactotécnica de recubrimiento por pulverizaciónsuspensión de nanopartículashumectabilidad de la superficie