Se requiere una suscripción a JoVE para ver este contenido. Inicie sesión o comience su prueba gratuita.

Artículo de método

Las investigaciones en el complejo Ga (III) de EOB-DTPA y su

9.6K visualizaciones

⸱

DOI:

10.3791/54334

⸱

17 de agosto de 2016

 ,  ,  , 
1Clinic of Nuclear Medicine, University Hospital Jena, 2Friedrich Schiller University

En este artículo

Resumen

Un procedimiento para el aislamiento de EOB-DTPA y la posterior formación de complejos con Ga naturales (III) y 68 Ga se presenta en este documento, así como un análisis exhaustivo de todos los compuestos y las investigaciones sobre el etiquetado de eficiencia, la estabilidad in vitro y el octanol / agua coeficiente de distribución del complejo radiomarcado.

Resumen

Se demuestra un método para el aislamiento de EOB-DTPA (3,6,9-triaza-3,6,9-tris (carboximetil) -4- (etoxibencil) ácido -undecanedioic) de su Gd (III) y los protocolos para la preparación de su novela no radiactivo, es decir, Ga naturales (III), así como radiactivo 68 complejo Ga. El ligando así como el Ga (III) se caracterizaron por espectroscopia de resonancia magnética nuclear (NMR), espectrometría de masas y análisis elemental. 68 Ga se obtuvo por un método de elución estándar de A / 68 generador de Ga 68 Ge. Los experimentos para evaluar la eficiencia de 68 Ga-etiquetado de EOB-DTPA a pH 3,8-4,0 se llevaron a cabo. Establecido de radio técnicas de análisis de TLC (cromatografía en capa fina) y HPLC radio (cromatografía líquida de alto rendimiento) se utilizaron para determinar la pureza radioquímica del trazador. Como una primera investigación de lipofilia los 68 Ga trazadores 'el octanol / agua distribution coeficiente de 68 especies Ga presentes en una solución de pH 7,4 se determinó por un método de extracción. medidas de estabilidad in vitro del trazador en diversos medios a pH fisiológico se realizaron, revelando diferentes tasas de descomposición.

Introducción

Gadoxetato, un nombre común para el complejo de Gd (III) del ligando EOB-DTPA 1, es un agente de contraste utilizado con frecuencia en la imagen hepatobiliar resonancia magnética (MRI). 2,3 Debido a su captación específica por los hepatocitos del hígado y alto porcentaje de excreción hepatobiliar que permite la localización de las lesiones focales y los tumores hepáticos. 2-5 Sin embargo, ciertas limitaciones de la técnica de resonancia magnética (por ejemplo, la toxicidad de los agentes de contraste, la aplicabilidad limitada en pacientes con claustrofobia o de metal implantes), invitan a una herramienta de diagnóstico alternativo .

La tomografía por emisión de positrones (PET) es un método de formación de imágenes molecular, en el que se administra una pequeña cantidad de una sustancia radiactiva (trazador), en la que su distribución en el cuerpo es registrada por un escáner de PET. 6 PET es un método dinámico que permite una alta resolución espacial y temporal de las imágenes, así como la cuantificación de los resultados, sin tener quehacer frente a los efectos secundarios de los agentes de contraste de MRI. El valor informativo de la información obtenida metabólica puede incrementarse aún más mediante la combinación con los datos anatómicos recibidas de los métodos de imagen adicionales, como más comúnmente alcanzada por híbrido de imágenes mediante tomografía computarizada (TC) en los escáneres PET / CT.

La estructura química de un trazador adecuado para el PET debe incluir un isótopo radiactivo que actúa como emisor de positrones. Los positrones tienen una corta vida, ya que casi inmediatamente se aniquilan con los electrones de las capas atómicas de los tejidos circundantes. Por aniquilación dos fotones gamma 511 keV con dirección opuesta de movimiento son emitidos, que se registran por el escáner de PET. 7,8 Para formar un trazador, núclidos PET pueden estar unidos covalentemente a una molécula, como es el caso de 2-desoxi- 2- [18F] fluoroglucose (FDG), el trazador PET utilizado más ampliamente. 7 Sin embargo, un nucleido también puede formar enlaces de coordinación a uno o varios ligandos (por ejemplo,, [68 Ga] -DOTATOC 9,10) o aplicarse en forma de sales inorgánicas disueltas (por ejemplo, [18 F] fluoruro de sodio 11). En total, la estructura del trazador es crucial ya que determina su comportamiento biodistribución, metabolismo y excreción.

A nucleido PET adecuado debe combinar características favorables, como la energía de positrones conveniente y disponibilidad, así como una vida media adecuada para la investigación prevista. El 68 Ga nucleido se ha convertido en una fuerza esencial en el campo de PET en las últimas dos décadas. 12,13 Esto es principalmente debido a su disponibilidad a través de un sistema de generador, lo que permite el etiquetado en el lugar independientemente de la proximidad de un ciclotrón. En un generador, la madre nucleido 68 Ge se absorbe en una columna de la que el nucleido hijo 68 Ga se eluye y posteriormente la etiqueta a un quelante adecuado. 6,14 Desde el 68 Ga nucleido existe como un trivalcación ent al igual que Gd (III) 10,13, quelantes EOB-DTPA con 68 Ga vez produciría un complejo con la misma carga total negativa como gadoxetato. De acuerdo con ello, que el 68 Ga trazador podría combinar una especificidad hepática característica similar con la idoneidad para la formación de imágenes PET. Aunque gadoxetato es comprado y administrado como sal disódica, en el siguiente contexto nos referiremos a ella como Gd [EOB-DTPA] y para el complejo no radiactivo Ga (III) como Ga [EOB-DTPA], o 68 Ga [ EOB-DTPA] en el caso del componente radiomarcado en aras de la conveniencia.

Para evaluar su aplicabilidad como trazadores para PET, complejos de metales radiactivos deben ser examinados extensamente in vitro, in vivo o ex vivo experimentos primero. Para determinar la idoneidad para un problema médico respectivo, diversas características tales como el comportamiento de rastreo biodistribución y perfil de eliminación, la estabilidad, la especificidad de órgano y célula o tissue captación necesita ser investigado. Debido a su carácter no invasivo, determinaciones in vitro se realizan a menudo antes de los experimentos in vivo. En general se reconoce que DTPA y sus derivados son de la idoneidad limitada como quelantes para 68 Ga debido a estos complejos que carecen de inercia cinética, lo que resulta en la descomposición comparativamente rápida cuando se administra in vivo. 14-20 Esto es causado principalmente por apo- transferrina actúa como una competidor para 68 Ga en el plasma. Sin embargo, se determinó este nuevo trazador en relación con su posible aplicación en imágenes hepatobiliar, en el que la información de diagnóstico puede proporcionarse en cuestión de minutos después de la inyección 3,4,21-23, con lo que no necesariamente requieren estabilidad trazador a largo plazo. Con este fin hemos aislado EOB-DTPA de gadoxetato e inicialmente realizó la formación de complejos con Ga natural (III), que existe como mezcla de dos isótopos estables, 69 Ga y 71 Ga. El complejo así obtenido sirvió como norma no radiactivo para el siguiente quelación de 68 Ga. Se utilizaron los métodos elaborarse y evaluarse simultáneamente su idoneidad para determinar la eficiencia de 68 Galabeling EOB-DTPA y para investigar la lipofilia del nuevo trazador 68 Ga y su estabilidad en diferentes medios.

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Protocolo

1. Preparación de EOB-DTPA y Ga [EOB-DTPA]

Precaución: Por favor, consulte a todas las hojas de datos de seguridad de materiales (MSDS) correspondientes de los disolventes orgánicos, ácidos y alcalinos utilizados antes de su uso. Realizar todos los pasos en una campana de extracción y el uso de equipo de protección personal (gafas de seguridad, guantes, bata de laboratorio).

  1. Aislamiento de EOB-DTPA de gadoxetato
    1. Ponga 3 ml de solución inyectable gadoxetic ácido 0,25 M en un matraz. Añadir 500 mg (5,6 mmol) de ácido oxálico a la solución agitada.
    2. Después de agitar durante 1 h, se filtra la suspensión a través de una frita usando presión reducida. Lavar el residuo tres veces con 3 ml de agua, respectivamente.
    3. Combinar los filtrados acuosos y equipar la solución con un electrodo de pH. Añadir ácido clorhídrico 12 M al filtrado hasta que el pH es de aproximadamente -0,1.
    4. Se elimina el disolvente a vacío para dar un residuo incoloro. Almacenar en atmósfera de gas inerte.
    5. Lavar el residuo a fondo (al menos tresveces) con acetato de etilo para eliminar el exceso de ácido oxálico. Secar el residuo al vacío.
    6. Se vuelve a disolver el residuo en 2 ml de agua a temperatura ambiente y después enfriar la solución en un baño de hielo. Sin retirar el baño de hielo, añadir 0,5 M de hidróxido de sodio acuoso gota a gota solución hasta la formación de un sólido incoloro que se observa pegajosa.
    7. Eliminar el agua por decantación. Se lava el sólido dos veces más con 1 ml de agua fría. Se seca el sólido al vacío para producir la primera fracción de producto.
    8. Aislar una fracción de segundo producto de las fracciones combinadas de agua decantada a través de cromatografía en columna (sílice, metanol / agua 4/1). 24 Se elimina el disolvente a vacío.
    9. Si el sólido así obtenido no es blanco puro, disolver en 1 ml de agua, añadir 10 ml de etanol y, posteriormente, 10 ml de éter dietílico para precipitar el producto. Se filtra a través de una frita usando presión reducida y se seca al vacío.
    10. Combinarambas fracciones sólidas de EOB-DTPA y realizar espectroscopia NMR, 25 de espectrometría de masas 26 y 27 elementales análisis.
  2. Síntesis de Ga [EOB-DTPA]
    PRECAUCIÓN: sólido cloruro de tienda Ga (III) en una atmósfera inerte seca, ya que al contacto con el aire, la humedad o la descomposición de grasa se lleva a cabo, lo que resulta en vapores corrosivos y formación de impurezas de color amarillo, marrón o negro.
    1. Preparar una solución 0,11 M de stock de la disolución de 1,94 g (11,0 mmol) de cloruro de Ga (III) en 100 ml de agua. Diluir 1 ml de solución de amoniaco acuoso al 25% con 4 ml de agua.
    2. Disolver 80 mg (0,15 mmol) de EOB-DTPA en un matraz en 10 ml de agua. Si es necesario, calentar el disolvente para lograr la disolución completa.
    3. Añadir 1,4 ml (0,15 mmol) de la solución de cloruro de stock Ga (III). Equipar el matraz con un agitador y electrodo de pH. Añadir una solución de amoníaco diluido gota a gota acuosa hasta que el pH de la solución es de aproximadamente 4,1. Se agita a rotemperatura om para 30 min.
    4. Se elimina el disolvente a vacío. Coloque el residuo en un matraz, equipado con un stillhead con un cuello lateral central y paralelo. Equipar el cuello central con un dedo de refrigeración y la del lateral del cuello con una salida de la bomba de vacío
    5. Calentar el residuo bajo presión reducida (125 ° C, 0,6 mbar). Periódicamente eliminar el cloruro de amonio sublimada (visible como revestimiento blanco de la superficie de cristal) del dedo de refrigeración y todavía cabeza, así como de las partes superiores del matraz con un paño ligeramente húmedo. Continuar el proceso hasta que no hay formación visible de nuevo sublimado.
    6. Para eliminar las trazas finales de cloruro de amonio lavar el residuo tres veces con 0,5 ml de metanol caliente, respectivamente. Se seca el residuo incoloro a vacío. Realizar espectroscópicos de RMN, espectrometría de masas 25 26 y 27 elementales análisis.

2. Procedimiento general de etiquetado

PRECAUCIÓN: Todas las exexperimentos que incluyen el contacto directo o indirecto con sustancias radiactivas deben llevarse a cabo únicamente por personal capacitado. Por favor, utilice el equipo de protección adecuado. Recoger los residuos radiactivos por separado y almacenar y disponer de acuerdo con la normativa vigente.

  1. La elución del generador
    Se utilizó un Ge / 68 Ga generador de 40 mCi 68 con el nucleido madre obligado como óxido de sílice en dodecil-3,4,5-trihidroxibenzoato: Nota. La elución y purificación pueden llevarse a cabo manualmente o, como fue el caso en este procedimiento, como un proceso automatizado combinado usando una bomba peristáltica y la unidad de dispensador.
    1. Se preparan soluciones de 5,5 M, 1,0 M y ácido clorhídrico 0,05 M. Preparar una solución de cloruro de 5,0 M de sodio que contiene 25 l de ácido clorhídrico 5,5 M por ml. Preparar una solución tampón de pH 4,6 mediante la combinación de 4,1 g de acetato de sodio, 1 ml de HCl (30%) y 2,5 ml de ácido acético glacial y diluyendo la mezcla con agua hasta 50 ml.
    2. precondition A la PS-H + cartucho por lavado lentamente con 1 ml de ácido clorhídrico 1,0 M y posteriormente 5 ml de agua.
    3. Eluir la columna de sílice del generador con 4 ml 0,05 M HCl. 12 carga el 68 Ga eluato en el PS-H + cartucho.
    4. Enjuague el cartucho con 5 ml de agua y posteriormente se seca con 5 ml de aire. Eluir el 68 Ga desde el cartucho con 1 ml de 5,0 M solución acidificada de cloruro de sodio. 28
  2. Etiquetado de EOB-DTPA con 68 Ga
    1. Disolver 1 mg (1,9 mmol) de EOB-DTPA en 1 ml de agua. A partir de esta solución llevará 100 l (0,19 mmol) y se diluye con 9,9 ml de agua para preparar una 19 M (10 mg / ml) solución madre de EOB-DTPA.
    2. Retire 50 l (que equivale a 22-29 MBq) de la solución que contiene 68 Ga y poner en un vial. Añadir 50 l (0,5 g) de una solución madre 19 mM de EOB-DTPA y 300 l of tampón para elevar el pH a 4,0. Agitar brevemente y se incuba la solución a temperatura ambiente durante 5 min. Retirar una alícuota de 1-5 l y poner a HPLC o análisis de TLC.
    3. Realizar análisis de HPLC de radio en una fase inversa (RP) C18 columna 29 Usar la siguiente fase móvil:. A - agua / ácido trifluoroacético (99,9% / 0,1%), B - acetonitrilo / ácido trifluoroacético (99,9% / 0,1%), gradiente : 06 min 80% A → 0% A (0,5 ml / min), 610 min 0% A (0,5 ml / min).
    4. Determinar las intensidades de los picos de las señales de radio de HPLC como área bajo la curva. Calcular el rendimiento de marcado como la pureza radioquímica (RCP) del trazador como sigue:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A + A Ga Ga-EOB-DTPA) ∙ 100%
      Un Ga-EOB-DTPA: área bajo la curva de 68 Ga [EOB-DTPA]
      Un Ga: área bajo la curva de la libertad de 68 Ga

3. Eficiencia de etiquetado

  1. Realizar procedimientos de etiquetado tal como se described en la sección 2. Uso de un rango consistente de inicio de la actividad de 68 Ga eluato, por ejemplo, 22 a 29 MBq (40 a 140 l, dependiendo de la frescura del eluido).
  2. Añadir la cantidad requerida de solución tampón para ajustar el pH a 3,8 hasta 4,0 (40 a 190 l, dependiendo del volumen de 68 Ga eluato). Añadir la cantidad requerida de solución de ligando (10 a 70 l de una solución 19 mM).
  3. Añadir las cantidades necesarias de agua para ajustar el volumen general de cada sonda de etiquetado de 1,75 ml. Mezclar bien y dejar reposar la muestra durante 5 min a temperatura ambiente. Realizar análisis de HPLC como se describe en la sección 2 para determinar el rendimiento de marcaje.
  4. Realizar procedimientos de etiquetado con cantidades de ligando entre 0,1 mg y 0,7 mg en intervalos de 0,1 g. Realizar experimentos por triplicado para cada concentración de ligando. Calcular el rendimiento medio y la desviación estándar.

4. Estabilidad In Vitro

  1. p generalrocedimiento y preparaciones
    1. Disolver una tableta de tampón fosfato salino (PBS) en 200 ml de agua desionizada para preparar una solución de PBS con una concentración de fosfato de 10 mM.
    2. Realizar un etiquetado de 22-29 MBq 68 Ga con 0,5 l de EOB-DTPA solución de reserva, tal como se describe en la sección 2. En función del volumen del eluato 68 Ga, ajustar la cantidad de tampón, como se describe en la sección 3. Se toman muestras de solución de etiquetado que contiene 6-12 MBq de trazador para la realización de medidas de estabilidad.
    3. Realizar análisis de TLC de radio en placas de aluminio recubiertas de gel de sílice 80 mm usando citrato de sodio acuoso 0,1 M como eluyente y analizar las placas con un escáner de radioactividad TLC. 30 determinar las intensidades de las señales de TLC como área bajo la curva. Calcular la RCP del trazador como sigue:
      RCP = A Ga-EOB-DTPA / (A-Ga Ga libre + A-EOB-DTPA + A Ga-coloidal) ∙ 100%
      Un Ga-EOB-DTPA: área bajo la curva de 68 Ga [EOB-DTPA]
      Un Ga-libre: área bajo la curva de la libertad de 68 Ga
      Un Ga-coloidal: área bajo la curva de 68 Ga coloidal
    4. Calcula RCP t / RCP 0 para cada punto de tiempo. Trazar la RCP por lo tanto normalizada vs diferencia de tiempo desde el punto de partida t = 0 min.
      RCP t = RCP de 68 Ga [EOB-DTPA] en el punto de tiempo t.
      RCP = 0 RCP de 68 Ga [EOB-DTPA] en t = 0 min.
  2. Estabilidad en solución salina tamponada con fosfato (A)
    1. A 65 l de solución de etiquetado añadir 150 l de PBS solución madre y 60 l de solución de hidróxido de sodio (0,1 M) para elevar el pH a 7,4. Mezclar bien.
    2. Retirar una alícuota de 1-5 l para realizar el análisis de TLC ( "punto de partida"). Inmediatamente almacenar la solución en una incubadora a 37 ° C y retirar alícuotas para realizar análisis de TLC en representarAtive puntos de tiempo durante 3 horas.
  3. Estabilidad frente a un exceso de apo transferrina en PBS (B)
    1. A 120 l de solución de etiquetado añadir 50 l de PBS solución madre y 430 l de solución de hidróxido de sodio (0,1 M) para elevar el pH a 7,4. Añadir 40 l de una solución de apo transferrina (25 mg / ml). Mezclar bien.
    2. Retirar una alícuota de 1-5 l para realizar el análisis de TLC ( "punto de partida"). Inmediatamente almacenar la solución en una incubadora a 37 ° C y retirar alícuotas para realizar análisis de TLC en puntos de tiempo representativos sobre 3 hr.
  4. Estabilidad en suero humano (C)
    1. Para 500 l de suero humano añadir 25 l de solución de etiquetado y 45 l de solución de hidróxido de sodio (0,1 M) para elevar el pH a 7,4. Mezclar bien.
    2. Retirar una alícuota de 1-5 l para realizar el análisis de TLC ( "punto de partida"). Inmediatamente almacenar la solución en una incubator a 37 ° C y retirar alícuotas para realizar análisis por TLC en puntos de tiempo representativos sobre 3 hr.

5. Determinación del coeficiente de distribución LÖGD

  1. Realizar procedimientos de etiquetado tal como se describe en el apartado 2. 50 l de solución de etiquetado añadir 20 l de PBS solución de reserva y 170 l de solución de hidróxido de sodio (0,1 M) para elevar el pH a 7,4.
  2. Retirar 200 l de esta solución y ponerla en un frasco de plástico-V. Añadir 200 l de n- octanol. Cerrar el vial y agitar durante 2 min. Centrifugar a continuación la muestra a 1600 xg durante 5 min.
  3. Retire triplicados de 40 l de la fase de n-octanol y la fase acuosa cada uno y ponerlos en V-viales separados. Tenga cuidado de no mezclar las capas.
  4. Medir la actividad de cada muestra en un contador gamma bien durante 30 segundos. Para cada muestra de repetir inmediatamente la medición de la misma dos veces y calcular la actividad Ᾱ media t en cuentas por minuto (cpm). Listar la así obtenida Ᾱ t, W1, Ᾱ t, W2 y Ᾱ t, W3 (tipo de actividades en muestras acuosas) y Ᾱ t, O1, Ᾱ T, O2, T Ᾱ, O3 (actividades en octanol) a lo largo de las respectivas punto de tiempo t de su determinación.
  5. Definir el punto de la medición de la última muestra como t 0 tiempo. Determinar y hacer una lista? T en min calculando? T = 0 tt. Realizar la corrección de la descomposición de Ᾱ t, utilizando la siguiente fórmula:
    Ᾱ 0 = Ᾱ t · 2 (Dt / 68 min).
  6. Calcular Ᾱ 0, W como la media de Ᾱ 0, W1, Ᾱ 0, W2 y Ᾱ 0, W3, así como Ᾱ 0, O como la media de Ᾱ 0, O1, Ᾱ 0, O2 y Ᾱ 0, O3. Calcular logD utilizando la siguiente fórmula:
    logD = log [(Ᾱ 0, O · 40 g) / (Ᾱ 0, W · 33 g)].
  7. Realizar todo el experimento por triplicado y calcular la media logD junto con su desviación estándar.

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Resultados

El ligando EOB-DTPA y Ga no radiactivo (III) se analizaron a través de 1 H y 13 C {1} H espectroscopía de RMN, espectrometría de masas y análisis elemental. Los resultados enumerados en la Tabla 1 y representadas en las figuras 1-6 verificar la pureza de las sustancias.

La elución del generador Ga Ge 68/68 proporcionó soluciones d...

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Discusión

EOB-DTPA es accesible a través de una síntesis de múltiples pasos 33, pero puede muy bien ser aislado a partir de agentes de contraste que contienen disponibles gadoxetato. Para este propósito, el ion central Gd (III) se puede precipitar con un exceso de ácido oxálico. Después de retirar Gd oxalato (III) y ácido oxálico el ligando puede ser aislado mediante precipitación en agua fría a pH 1,5. Sin embargo, con el fin de mejorar los rendimientos de cromatografía en columna del filtrado se puede realizar en lug...

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Los autores no tienen agradecimientos.

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
primovistM
cloruro de galio (III)Sigma-Aldrich Co.
agua (desionizada)--equipo de desionización de agua del grifo por Auma-Tec GmbH
ácido clorhídrico 12 MVWR20252.29
hidróxido de sodioPolskie Odczynniki Chemiczne S.A.
Ácido oxálicoSigma-Aldrich Co.75688
acetato de etiloBrenntag GmbH10010447
gel de síliceMerck KGaA1.10832.9025Geduran Si 60 0.063-0.2  mm
TLC gel de sílice 60 F254Merck KGaA1.16834.0001
metanolVWR20903.55
etanolBrenntag GmbH10018366
eiethyletherVWR23807.468almacenado sobre placas de KOH
solución de amoníaco (25%)VWR1133.1
electrodo de pHVWR662-1657
unidad de agitación y calentamientoHeidolph505-20000-00
bombaIlmvac GmbH322002
fritadediseño
personalizado espectrómetro de RMNBruker Coorporation-UltraShield 400
espectrómetro de masasThermo Fisher Scientific Inc.-
analizador elementalHekatech GmbH Analysentechnik-EuroVectorEA 3000 CHNS
agua deuterada D2Oeuriso-topD21499.90% D
Material/Equipo necesario para los procedimientos de etiquetado
68Ge/68GaITG Isotope Technologies Garching GmbHA150
sistema de bombeo y dispensaciónScintomicsGmbH-Variosystem
ácido clorhídrico 30% (suprapur)Merck KGaA1.00318.1000
agua (ultrapur)Merck KGaA1.01262.1000
cloruro de sodio (suprapur)Merck KGaA1.06406.0500
acetato de sodio (suprapur)Merck KGaA1.06264.0050
ácido acético glacial (suprapur)Merck KGaA1.00066.0250
citrato de sodio dihidratadoVEB Laborchemie Apolda10782>98.5%
PS-H+ Cartucho (S)Macherey-Nagel731867Chromafix
apo-TransferrinSigma-Aldrich Co.T2036
Tampón PBS (tabletas)Sigma-Aldrich Co.79382
suero humanoSigma-Aldrich Co.H4522de plasma AB masculinos humanos
, columnas, etc.electrodo de
Knick Elektronische Messgerä te GmbH & Co. KG765-Set
binaria (HPLC)Hewlett-PackardG1312A (HP 1100)
Detector UV Vis (HPLC)Hewlett-PackardG1315A (HP 1100)
detector radiactivo (HPLC)EGRC Berthold
HPLC C-18-PFP columnaAdvanced Chromatography Technologies Ltd.ACE-1110-1503/A100528
Viales de vidrio para HPLCGTG Glastechnik Graefenroda GmbH8004-HP-H/i3µ
pipetaEppendorf-vialesde
plásticoSarstedt AG & Co.6542.007
viales de plásticoGreiner Bio-One International GmbH717201
activímetroMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed2010
pinzasdiseño
Heraeus Instruments GmbH51008815
mezclador de vórticeFisons-Whirlimixer
centrífugaHeraeus Instruments GmbH75003360
contador de pozos gammaMED Nuklear-Medizintechnik DresdenGmbH-Isomed2100
agua para cromatografíaMerck KGaA1.15333.2500
acetonitrilo para cromatografíaMerck KGaA1.00030.2500
ácido trifluoroacéticoSigma-Aldrich91707
Escáner de radiactividad TLCraytest Isotopenmessgerä te GmbHB00003875equipado con detector de plástico beta
Bayer-0.25 450898810925429 de matraces pH de diseño personalizadobomba incubadora de a medida

Referencias

  1. Weinmann, H. J., et al. A new lipophilic gadolinium chelate as a tissue-specific contrast medium for MRI. Magn. Reson. Med. 22, 233-237 (1991).
  2. Stroszczynski, C., et al. Aktueller Stand der MRT-Diagnostik mit leberspezifischen Kontrastmitteln. Radiologe. 44, 1185(2004).
  3. Van Beers, B. E., Pastor, C. M., Hussain, H. K. Primovist, Eovist - what to expect. J. Hepatol. 57, 421-429 (2012).
  4. Zech, C. J., Herrmann, K. A., Reiser, M. F., Schoenberg, S. O. MR Imaging in Patients with Suspected Liver Metastases: Value of Liver-specific Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Magn. Reson. Med. Sci. 6, 43-52 (2007).
  5. Leonhardt, M., et al. Hepatic Uptake of the Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA: Role of Human Organic Anion Transporters. Drug Metab. Dispos. 38, 1024-1028 (2010).
  6. Wadas, T. J., Wong, E. H., Weisman, G. R., Anderson, C. Coordinating Radiometals of Copper, Gallium, Indium, Yttrium, and Zirconium for PET and SPECT Imaging of Disease. J. Chem. Rev. 110, 2858-2902 (2010).
  7. Ametamey, S. M., Honer, M., Schubiger, P. A. Molecular Imaging with PET. Chem. Rev. 108, 1501-1516 (2008).
  8. Cutler, C. S., Hennkens, H. M., Sisay, N., Huclier-Markai, S., Jurisson, S. S. Radiometals for Combined Imaging and Therapy. Chem. Rev. 113, 858-883 (2013).
  9. Henze, M., et al. PET Imaging of Somatostatin Receptors Using [68GA]DOTA-D-Phe1-Tyr3-Octreotide: First Results in Patients with Meningiomas. J. Nucl. Med. 42, 1053-1056 (2001).
  10. Hofmann, M., et al. Biokinetics and imaging with the somatostatin receptor PET radioligand 68Ga-DOTATOC: preliminary data. Eur. J. Nucl. Med. 28, 1751-1757 (2001).
  11. Blau, M., Nagler, W., Bender, M. A. Fluorine-18: a new isotope for bone scanning. J. Nucl. Med. 3, 332-334 (1962).
  12. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium Radiopharmaceutical Chemistry. Int. J. Radiat. Appl. Instrum. B. 16, 435-448 (1989).
  13. Rösch, F. Past, present and future of 68Ge/68Ga generators. Appl. Radiat. Isot. 76, 24-30 (2013).
  14. Liu, S. The role of coordination chemistry in the development of target-specific radiopharmaceuticals. Chem. Soc. Rev. 33, 445-461 (2004).
  15. Haubner, R., et al. Development of (68)Ga-labelled DTPA galactosyl human serum albumin for liver function imaging. Eur. J. Nucl. Med. Mol. Imaging. 40 (68), 1245-1255 (2013).
  16. Yang, W., Zhang, X., Liu, Y. Asialoglycoprotein Receptor-Targeted Radiopharmaceuticals for Measurement of Liver Function. Curr. Med. Chem. 21, 4-23 (2014).
  17. Chauhan, K., et al. 68Ga based probe for Alzheimer's disease: synthesis and preclinical evaluation of homodimeric chalcone in β-amyloid imaging. Org. Biomol. Chem. 12, 7328-7337 (2014).
  18. Chakravarty, R., Chakraborty, S., Dash, A., Pillai, M. R. A. Detailed evaluation on the effect of metal ion impurities on complexation of generator eluted 68Ga with different bifunctional chelators. Nucl. Med. Biol. 40, 197-205 (2013).
  19. Clevette, D. J., Orvig, C. Comparison of ligands of differing denticity and basicity for the in vivo chelation of aluminum and gallium. Polyhedron. 9, 151-161 (1990).
  20. Prinsen, K., et al. Development and evaluation of a 68Ga labeled pamoic acid derivative for in vivo visualization of necrosis using positron emission tomography. Bioorg. Med. Chem. 18, 5274-5281 (2010).
  21. Vogl, T. J., et al. Liver tumors: comparison of MR imaging with Gd-EOB-DTPA and Gd-DTPA. Radiology. 200, 59-67 (1996).
  22. Reimer, P., et al. Phase II clinical evaluation of Gd-EOB-DTPA: dose, safety aspects, and pulse sequence. Radiology. , 177-183 (1996).
  23. Ba-Ssalamah, A., et al. MRT der Leber. Radiologe. 44, 1170-1184 (2004).
  24. Scott, R. P. W. Journal of Chromatography Library. 22A, Elsevier Scientific Publishing Co. A137-A160 (1983).
  25. Reichenbaecher, M., Popp, J. Strukturanalytik organischer und anorganischer Verbindungen. , 1st, B. G. Teubner Verlag. Wiesbaden. (2007).
  26. Gross, J. H. Mass Spectrometry: A Textbook. , Springer. (2004).
  27. Ma, T. S., Rittner, R. C. Modern Organic Elemental Analysis. , Marcel Dekker, Inc. (1979).
  28. Mueller, D., et al. Simplified NaCl Based 68Ga Concentration and Labeling Procedure for Rapid Synthesis of 68Ga Radiopharmaceuticals in High Radiochemical Purity. Bioconjugate Chem. 23, 1712-1717 (2012).
  29. Roberts, T. R. Radio-column chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 103-132 (1978).
  30. Roberts, T. R. Radio-thin-layer chromatography. Journal of Chromatography Library. 14, 45-83 (1978).
  31. Green, M. A., Welch, M. J. Gallium radiopharmaceutical chemistry. Nucl. Med. Biol. 16, 435-448 (1989).
  32. Notni, J., Plutnar, J., Wester, H. J. Bone-seeking TRAP conjugates: surprising observations and their implications on the development of gallium-68-labeled bisphosphonates. EJNMMI Res. 2, 13(2012).
  33. Schmitt-Willich, H., et al. Synthesis and Physicochemical Characterization of a New Gadolinium Chelate: The Liver-Specific Magnetic Resonance Imaging Contrast Agent Gd-EOB-DTPA. Inorg. Chem. 38, 1134-1144 (1999).
  34. 68Ga generator for positron emission tomography. , DE102010037964B3 (2012).
  35. Simecek, J., Hermann, P., Wester, H. J., Notni, J. How is 68Ga Labeling of Macrocyclic Chelators Influenced by Metal Ion Contaminants in 68Ge/68Ga Generator Eluates? ChemMedChem. 8, 95-103 (2013).
  36. Baur, B., et al. Synthesis, Radiolabelling and In Vitro Characterization of the Gallium-68-, Yttrium-90- and Lutetium-177-Labelled PSMA Ligand, CHX-A''-DTPA-DUPA-Pep. Pharmaceuticals (Basel). 7, 517-529 (2014).
  37. Boros, E., et al. RGD conjugates of the H2dedpa scaffold: synthesis, labeling and imaging with 68Ga. Nucl. Med. Biol. 39, 785-794 (2012).
  38. Beck, W. S. Hematology. , 5th, MIT press. Cambridge, Massachusetts. (1998).
  39. Patel, V., Morrissey, J. Practical and Professional Clinical Skills. , 1, Oxford University Press Inc. New York. (2001).
  40. Bartke, A., Constanti, A. Basic Endocrinology. , 1, CRC Press. (1998).
  41. Bernstein, L. R. Mechanisms of Therapeutic Activity for Gallium. Pharmacol. Rev. 50, 665-682 (1998).
  42. Clausen, J., Edeling, C. J., Fogh, J. 67Ga Binding to Human Serum Proteins and Tumor Components. Cancer Res. 34, 1931-1937 (1974).
  43. Dumont, R. A., et al. Novel 64Cu- and 68Ga-Labeled RGD conjugates show improved PET imaging of αvβ3 integrin expression and facile radiosynthesis [Erratum to document cited in CA156:116856. J. Nucl. Med. 52, 1498(2011).
  44. Pohle, K., et al. 68Ga-NODAGA-RGD is a suitable substitute for 18F-Galacto-RGD and can be produced with high specific activity in a cGMP/GRP compliant automated process. Nucl. Med. Biol. 39, 777-784 (2012).
  45. Notni, J., Pohle, K., Wester, H. J. Be spoilt for choice with radiolabelled RGD peptides: Preclinical evaluation of 68 Ga-TRAP(RGD)3. Nucl. Med. Biol. 40, 33-41 (2013).

Acceso restringido. Inicie sesión o comience una prueba gratuita para ver este contenido.

Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Trazador de galio-68complejo EOB-DTPAmarcaje radiactivoanálisis por radio-HPLCanálisis por radio-TLCcoeficiente de distribuciónestabilidad in vitroaislamiento del ligandopureza radioquímica
Las investigaciones en el complejo Ga (III) de EOB-DTPA y su
Contáctenos
Recomendar a la biblioteca

Privacidad

Términos de uso

Políticas

Copyright © 2026 MyJoVE Corporation. Todos los derechos reservados.