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Método fiable para evaluar la germinación de semillas, dormancia y mortalidad en condiciones de campo

DOI:

10.3791/54663

November 6th, 2016

In This Article

Summary

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Aquí se presenta un protocolo para evaluar la supervivencia de semillas, germinación y la latencia en condiciones de campo utilizando enterrados, tiras de semillas etiquetadas y pruebas de viabilidad cloruro de tetrazolio (TZ).

Abstract

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Describimos técnicas para aproximar la dinámica de los bancos de semillas a lo largo del tiempo utilizando Helianthus annuus como especie de estudio de ejemplo. Las tiras de tela de poliéster permeable y pegamento se pueden doblar y pegar para construir una tira de compartimentos que albergan semillas e información de identificación, al tiempo que permiten el contacto con el lixiviado del suelo, el agua, los microorganismos y la temperatura ambiente. Las tiras pueden construirse con una amplia gama de números y tamaños de compartimentos y permiten al investigador albergar una variedad de genotipos dentro de una sola especie, diferentes especies o semillas que han experimentado diferentes tratamientos. A diferencia de los paquetes de semillas individuales, las tiras se recuperan más fácilmente como una unidad. Si bien los paquetes replicados se pueden incluir dentro de una tira, diferentes tiras pueden actuar como bloques o se pueden recuperar en diferentes momentos para observar el comportamiento de la semilla a lo largo del tiempo. Utilizamos una pistola de pegamento de alta temperatura para delinear los compartimentos y sellamos las tiras una vez que se insertaron la semilla y las etiquetas que identifican los tiempos de bloqueo y eliminación. A continuación, las tiras de semillas se enterraron en el campo a la profundidad deseada, con el lugar marcado para su posterior retirada. Los depredadores animales de madriguera se excluyeron eficazmente mediante el uso de una cubierta de tela metálica en la superficie del suelo. Después del intervalo de tiempo seleccionado para el entierro, se desenterraron las tiras y se evaluó la germinación, latencia y mortalidad de las semillas. Si bien las semillas muertas a menudo se pueden distinguir claramente de las vivas no germinadas a simple vista, las semillas inactivas se identificaron de manera concluyente utilizando una prueba colorimétrica estándar de cloruro de tetrazolio para la viabilidad de las semillas.

Introduction

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El objetivo general de este método es evaluar de forma fiable la supervivencia de semillas con el tiempo en condiciones de campo.

Bancos de semillas son una reserva de semillas dispersadas, viables aún no germinadas distribuidos ya sea en la superficie del suelo, dentro de hojarasca superficial, o dentro del perfil del suelo, que pueden persistir de forma transitoria o durante muchos años 1,2. Cuando los métodos de enterramiento de semillas similares a los aquí presentados se aplicaron a un estudio de 17 años el uso de varias docenas de especies, se encontraron semillas viables en muchas de las especies ensayadas 3. ....

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Protocol

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1. Reunir Semillas de Especies Múltiples o cruces controlados de una sola especie

Nota: En este ejemplo se utiliza la semilla de 15 tipos cruzado dentro de la especie Helianthus annuus (girasol) usando salvaje, híbrido, y los tipos de cultivos como el (productores de semillas) matriz materna.

  1. Al final de la temporada de crecimiento, recoger cabezas de semillas maduras en bolsas etiquetadas. Semilla limpia de la paja y el lugar de semillas en sobres etiquetados con el tipo de cruz de los padres en formato estándar (es decir, x materna paterna).
  2. semillas a granel juntos en sobres grandes usando cantidades iguales de semill....

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Results

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Tipos cruzadas con variadas porcentaje de filiación y de los cultivos alelo materno (Tabla 1) diferían través de las fechas de eliminación en porcentaje germinó, sin germinar, y semillas muertas (Fig. 2 y 3). El uso de pruebas de semillas germinadas de TZ, hemos encontrado algunas semillas de verdad latentes en la segunda extracción (primavera) (Tabla 2), mientras que todas las semillas germinadas en la tercera extracció.......

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Discussion

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Aquí presentamos métodos para el uso de tiras de enterramiento de semillas para observar la germinación de semillas, la latencia y la mortalidad de las semillas diversas en períodos de tiempo preseleccionados en el campo. Las ventajas de usar las tiras en lugar de los paquetes individuales se encuentran en (1) la velocidad de la tira y la construcción compartimento sobre la creación de paquetes individuales; y (2) la facilidad y la velocidad de eliminación de múltiples compartimentos en un movimiento sin el peligro de o.......

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Disclosures

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Los autores no tienen nada que revelar.

Acknowledgements

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Este trabajo fue financiado por el Programa de Subvenciones para la Evaluación de Riesgos de Biotecnología n.º 2006-39454-17438 a A. Snow, K. Mercer y H. Alexander del Instituto Nacional de Alimentación y Agricultura del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos. Los experimentos que utilizaron este método se llevaron a cabo y contaron con el apoyo de la Estación de Campo de la Universidad de Kansas, una unidad de investigación de la Encuesta Biológica de Kansas y la Universidad de Kansas. Los autores desean agradecer a P. Jourdan y E. Regnier por sus útiles revisiones sobre versiones anteriores de este manuscrito. Además, este trabajo contó con la ayuda del p....

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Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
Sobres de monedas pequeñosCualquier
Sobres de monedas grandesCualquier
mosquitera de poliéster de malla finaCualquier
pistola de pegamento de alta temperaturaCualquier
recambio de barra de pegamento de alta temperaturaCualquier
marcador permanente industrialCualquiera
etiquetas de jardín de plásticoCualquier
tijeraCualquier
palaCualquier
Tela dura de malla metálicaCualquier
Banderas de topógrafo, varios coloresCualquiera
Periódico mojadoCualquier
hieleraCualquiera
Papel secanteCualquier
placa de PetriCualquier
cámara de crecimiento controladoa temperatura Cualquier
hoja de afeitarCualquier
placa de PetriCualquier
cloruro de tetrazolioCualquier
aguaCualquier
calor incubadoraCualquiera

References

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  1. Walck, J. L., Baskin, J. M., Baskin, C. C., Hidayati, S. N. Defining transient and persistent seed banks in species with pronounced seasonal dormancy and germination patterns. Seed Sci Res. 15 (3), 189-196 (2005).
  2. Alexander, H. A., Schrag, A. M.

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Tags

Seed GerminationSeed DormancySeed MortalityField ConditionsTetrazolium ChlorideSeed ViabilitySeed Bank DynamicsHelianthus AnnuusSeed Strip MethodBurial Trials

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