Este manuscrito describe varios protocolos para la administración de agentes farmacológicos para las abejas, incluyendo métodos no invasivos simples para las abejas de vuelo libre, así como variantes más invasivos que permiten el tratamiento localizado precisa de abejas restringidos.
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Artículo de método
La manipulación de neurofarmacológico restringida y de vuelo libre abejas de la miel,
* These authors contributed equally
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Resumen
Resumen
Las abejas de miel demuestran sorprendentes capacidades de aprendizaje y el comportamiento social avanzada y la comunicación. Además, su cerebro es pequeño, fácil de visualizar y estudiar. Por lo tanto, las abejas han sido durante mucho tiempo un modelo favorecida entre los neurobiólogos y neuroethologists para el estudio de las bases neuronales del comportamiento social y natural. Es importante, sin embargo, que las técnicas experimentales utilizadas para estudiar las abejas no interfieren con los comportamientos que se estudian. Debido a esto, ha sido necesario desarrollar una serie de técnicas para la manipulación farmacológica de las abejas melíferas. En este trabajo se demuestra métodos para el tratamiento de las abejas de miel o restringidas de vuelo libre con una amplia variedad de agentes farmacológicos. Estos incluyen tanto métodos no invasivos, tales como los tratamientos orales y tópicos, así como métodos más invasivos que permiten la administración de fármacos precisa, ya sea en la manera sistémica o localizada. Finalmente, se discuten las ventajas y desventajas de cada método y describimosobstáculos comunes y la manera de superar la mejor manera. Se concluye con una discusión sobre la importancia de adaptar el método experimental a las cuestiones biológicas en lugar de al revés.
Introducción
Desde Karl von Frisch dilucidado su lenguaje de la danza 1, las abejas de miel han mantenido una especie de estudio populares para los investigadores en el comportamiento animal y la neurobiología. En los últimos años un gran número de nuevas disciplinas han surgido en la intersección de estos dos campos, y varias otras disciplinas (por ejemplo, la biología molecular, la genómica y la informática) han surgido junto a ellos. Esto ha llevado a un rápido desarrollo de nuevas teorías y modelos para entender cómo se traduce el comportamiento de la actividad dentro de los sistemas nerviosos. Debido al estilo de vida único, rico repertorio de conducta, y....
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Protocolo
1. Administración de Medicamentos para abejas Enjaezó
- El tratamiento oral
- Preparar la solución de 1,5 M de sacarosa mediante la mezcla de 257 g de sacarosa con 500 ml de agua (que es más fácil de disolver esta cantidad de sacarosa en agua hirviendo). Almacenar solución de sacarosa a 4 ° C hasta su uso.
Nota: La solución de sacarosa proporciona un ambiente muy hospitalario para ciertos microorganismos, y por lo tanto se convierte fácilmente contaminada y desagradable para las abejas. solución de sacarosa a granel se puede dividió en alícuotas y se almacenó a -20 ° C hasta su uso. - Decidir sobre una dosis de fármaco ....
- Preparar la solución de 1,5 M de sacarosa mediante la mezcla de 257 g de sacarosa con 500 ml de agua (que es más fácil de disolver esta cantidad de sacarosa en agua hirviendo). Almacenar solución de sacarosa a 4 ° C hasta su uso.
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Resultados
Una selección de los resultados representativos de los métodos descritos anteriormente se muestran, principalmente para demostrar que los métodos permiten a los agentes farmacológicos para alcanzar el cerebro y afectan el comportamiento abeja de la miel.
efectos específicos sobre los procesos cerebrales se pueden obtener fácilmente después de la inyección tórax.
Dado q.......
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Discusión
Los métodos descritos anteriormente permiten un tratamiento sencillo, eficaz y robusta de cualquiera de vuelo libre o abejas de la miel con arnés. Estos métodos son compatibles con muchos paradigmas experimentales y cuestiones biológicas (Tabla 1). Todos los métodos de vuelo libre puede aplicarse fácilmente a las abejas con arnés. La inversa es menor éxito, sin embargo, ya que la restricción temporal y métodos de tratamiento invasivo a menudo pueden comprometer la capacidad de vuelo de las abejas.
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este proyecto fue financiado por el DP0986021 de subvenciones de ARC y el 585442 de subvenciones del NHMRC. ABB cuenta con el apoyo de una beca ARC Future Fellowship (FT140100452). JAP cuenta con el apoyo de una beca iMQRES otorgada por la Universidad de Macquarie y por un DAAD-Doktorandenstipendium otorgado por el Servicio Alemán de Intercambio Académico. JMD cuenta con el apoyo del CNRS y de la Universidad Paul Sabatier.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Sacarosa | Sigma-Aldrich | S8501 | Cualquier proveedor hará |
| Cloruro de sodio | Sigma-Aldrich | S7653 | |
| Cloruro de potasio | Sigma-Aldrich | P9333 | |
| Cloruro de magnesio hexahidratado | Sigma-Aldrich | M2670 | |
| Cloruro de calcio dihidratado | Sigma-Aldrich | C8106 | |
| Dextrosa monohidratado | Sigma-Aldrich | 49159 | |
| Tampón de fosfato salino (PBS) | Sigma-Aldrich | P4417 | |
| Cera de protección | Dentaurum | 124-305-00 | |
| HEPES | Sigma-Aldrich | H3375 | |
| dimetilformamida | Sigma-Aldrich | D4551 | |
| 95% Etanol | Sigma-Aldrich | 493511 | |
| Capilar de vidrio | WPI | 1B100F-3 | |
| 23 G Aguja NanoFil | WPI | NF33BV-2 | |
| Forsceps muy fino | Electrodo Dumont | 0208-55-PO | |
| tirador | SRI | 2001 | |
| FemtoJet Microinyector | Eppendorf | 5247 000.01 | |
| Eicosane | Sigma-Aldrich | 219274 | |
| micromanipulador manual | Brinkmann Instrumentenbau | MM-33 | |
| micromanipulador electrónico | Luigs & Neumann Feinmechanik + Elektortechnik | Junior unidad XYZ | |
| microscopio estereoscópico | Leica | M80 | |
| soldador | Weller | WESD51 | |
| Dextran, Alexa Fluor 546, 10.000 MW | ThermoFisher Scientific | D-22911 | |
| Dextran, Alexa Fluor 568, 10.000 MW | ThermoFisher Scientific | D-22912 | |
| placa de Petri pequeña | Aceite mineral Sigma-Aldrich | P5481 | |
| Sigma-Aldrich | M5904 | ||
| 50 ml Tubo de centrífuga | Pinzas ThermoFisher Scientific | 339652 | |
| Suministros Entomológicos Australianos Portacuchillas | |||
| y rompedor | Suministros Entomológicos Australianos | E130 | |
| Hoja de afeitar de doble filo de | plumaThermoFisher Scientific | 50-949-135 | |
| Alambre | Cualquier proveedor lo hará | ||
| Cables | Cualquier proveedor lo hará | ||
| Pintura de modelo | Tamiya USA | Depende del color | |
| Dispensador repetido Hamilton | company | PB-600-1 | |
| Jeringa de vidrio | WPI | NANOFIL | |
| sistema de visualización de fluorescencia | Nightsea | retícula SFR-GR | |
| ProSciTech | S8014-24 | ||
| microcapilar con soporte | Drummond | 1-000-0010 | |
| Silicona | Cualquier proveedor lo hará | ||
| Termopar | Digitech | QM-1324 | |
| Micropipeta | Eppendorf |
Referencias
- Frisch, K. . von B. ees Their Vision, Chemical Senses, and Language. , Cornell University Press. Itacha, NY. (1971).
- Giurfa, M. The amazing mini-brain: lessons from a honey bee. Bee World. 84 (1), 5-18 (2003).
- Giurfa, M.
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Reimpresiones y permisos
