Este artículo demuestra el rendimiento de la acupuntura, modelos de epilepsia y el análisis del sueño en roedores. Se describe el procedimiento de acupuntura y la identificación de los puntos de acupuntura. La pilocarpina o pentilenetetrazol (PTZ) se usa para inducir la epilepsia. Para el análisis del sueño se emplean el electrocorticograma (ECoG), el electromiograma (EMG), la temperatura cerebral y los registros de la actividad locomotora.
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Artículo de método
La manipulación de epileptiforme Electrocorticograms (ECoGs) y del sueño en ratas y ratones por acupuntura
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En este artículo
Resumen
Resumen
La antigua literatura china ha documentado que la acupuntura posee efectos terapéuticos eficientes sobre la epilepsia y el insomnio. Sin embargo, hay poca investigación que revele los posibles mecanismos detrás de estos efectos. Para investigar el efecto de la acupuntura sobre la epilepsia y el sueño, es necesario abordar varios problemas. La primera es identificar los puntos de acupuntura, que corresponden entre humanos, ratas y ratones. Además, es necesario determinar la profundidad de inserción de la aguja de acupuntura, el grado de torsión de la aguja en la acupuntura manual con aguja y los parámetros de estimulación para la electroacupuntura (EA). Para evaluar los efectos de la acupuntura sobre la epilepsia y el sueño, se requiere un modelo factible de epilepsia en roedores. Administramos pilocarpina en el núcleo central izquierdo de la amígdala (CeA) para simular la epilepsia del lóbulo temporal focal (TLE) en ratas. La inyección intraperitoneal (IP) de pilocarpina induce epilepsia generalizada y estado epiléptico (EE) en ratas. Cinco inyecciones IP de pentilenetetrazol (PTZ) con un intervalo de un día entre cada inyección induce con éxito la epilepsia generalizada espontánea en ratones. Los registros de electrocorticogramas (ECoGs), electromiogramas (EMG), temperatura cerebral y actividad locomotora se utilizan para el análisis del sueño en ratas, mientras que los ECoGs, EMG y la actividad locomotora se emplean para el análisis del sueño en ratones. Los electrodos ECoG se implantan en las cortezas occipital frontal, parietal y contralateral, y se implanta un termistor sobre la corteza cerebral mediante cirugía estereotáctica. Los electrodos EMG se implantan en los músculos del cuello y un detector de infrarrojos determina la actividad locomotora. Los criterios para categorizar las etapas de vigilancia, incluida la vigilia, el sueño de movimientos oculares rápidos (REM) y el sueño no REM (NREM), se basan en la información de ECoG, EMG, temperatura cerebral y actividad locomotora. Los criterios de clasificación detallados se establecen en el texto.
Introducción
La epilepsia es un trastorno neurológico común en el que se producen convulsiones recurrentes durante toda la vida de un paciente. La mayoría de las recurrencias epilépticos pueden ser bien controlados por los fármacos antiepilépticos (FAE). Sin embargo, aproximadamente 30% de los pacientes epilépticos desarrollar epilepsia refractaria 1. causas de la epilepsia, trastornos del sueño, que pueden exacerbar aún más la recurrencia. La evidencia demuestra que la epilepsia puede perturbar el sueño, ya sea por la noche o puede causar excesiva somnolencia durante el día 2,3. Nuestros estudios previos indican además que la epilepsia se produce en el mome....
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Protocolo
Todos los protocolos experimentales son aprobados por el Comité Institucional de Cuidado de Animales y el empleo (IACUC) de la Universidad Nacional de Taiwán.
1. Cirugía estereotáxica para la implantación de electrodos ECoG, EMG electrodos, Brain termistor, y la Guía de inyección cánula
- Para las ratas (250-350 g, de 6 a 8 semanas de edad, las ratas Sprague-Dawley)
- Anestesiar las ratas por inyección ip con 50 mg / kg Zoletil. Confirmar la profundidad adecuada de la anestesia mediante la observación de una falta de respuesta después de pellizcar la pata trasera. Aplicar ungüento para los ojos, afeite la ....
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Resultados
Existen diferentes modelos de rata y ratón para satisfacer las necesidades de los diferentes tipos de epilepsia. Para inducir la TLE focal, 0,5 l de pilocarpina se administra (2,4 mg / l) en el CEA izquierda. Los ECoGs epileptiformes predominantes se adquieren desde el electrodo de ECoG en el lóbulo parietal del hemisferio izquierdo (Figura 1A: b) se recogen, y las actividades epilépticos raras desde el resto de los electrodos ECoG (Figura 1A: a,.......
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Discusión
La elección de un modelo animal de epilepsia viable es esencial para cada propósito experimental. Uno de nuestros objetivos es dilucidar los efectos de la EA en la supresión de la epilepsia. EA es una medicina alternativa que puede exhibir efecto terapéutico en la epilepsia y ha sido documentado en la literatura china antigua. Sin embargo, hay una falta de evidencia científica para demostrarlo. Para determinar los efectos de la EA en la epilepsia, nos hemos centrado principalmente en los efectos de la EA en la epilepsia.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Este trabajo fue apoyado por las subvenciones del Ministerio de Ciencia y Tecnología (MOST) MOST104-2410-H-002-053 y NSC99-2320-B-002-026-MY3. Este manuscrito fue editado y corregido por el Sr. Brian Chang, quien tiene experiencia en la revisión de documentos profesionales.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Fármacos | |||
| Zoletil | Virbac | 50 mg/kg i.p. | |
| pilocarpina | Sigma-Aldrich | P6503 | 300 mg/kg i.p.; 1,2 mg microinyección |
| PTZ Sigma-Aldrich | P6500 | 0,035 mg/ | |
| polisporina | de ratón Pfizer | ||
| Surgery | |||
| ECoG | electrodo Plásticos Un | electrodo de tornillo | E363/20 |
| Pedestal | Plastics One | MS363 | |
| Canula | Plastics One | C315G/spc | |
| Thermistor | Omega Engineering | 44008 | |
| Acrílico dental | Tempron | ||
| Stereotaxic Instrument | Stoelting | Dural | |
| Recording equipments | |||
| ECoG amplificador | Colbourn Instruments | V75-01 | |
| A/D Board | National Instruments | NI PCI-6033E | |
| Detectores de movimiento basados en infrarrojos | Biobserve GmbH | hecho | |
| ICELUS | G-System | ||
| AxoScope 10 Software | Molecular Devices | ||
| Acupuntura necesidades | |||
| Agujas de acero inoxidable | Shanghai Yanglong Medical Articles Co. | Calibre 32 x 1" | |
| Funciones Estimulador eléctrico | I.T.O., Japan | Trio 300 | |
| AcuPen | Lhasa OMS | Pointer Excel II |
Referencias
- Regesta, G., Tanganelli, P. Clinical aspects and biological bases of drug-resistant epilepsies. Epilepsy Res. 34 (2-3), 109-122 (1999).
- Malow, B. A., Bowes, R. J., Lin, X. Predictors of sleepiness in epilepsy patients. Sleep. 20 (12), 1105-1110 (1997).
- Stores, G., Wiggs, L.....
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Reimpresiones y permisos
