Una manera sencilla de medir alteraciones en el comportamiento de búsqueda de recompensa Uso<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Resumen

Se describe un protocolo para inducir gratificante y nonrewarding experiencias en moscas de la fruta (Drosophila melanogaster), utilizando el consumo voluntario de etanol como una medida de los cambios en los estados de recompensa.

Resumen

Se describe un protocolo para la medición de la autoadministración de etanol en las moscas de la fruta (Drosophila melanogaster) como sustituto de los cambios en los estados de recompensa. Demostramos una forma sencilla de aprovechar el sistema de recompensa mosca, modificar las experiencias relacionadas con la recompensa natural, y utilizar el consumo voluntario de etanol como una medida de los cambios en los estados de recompensa. El enfoque sirve como una herramienta importante para estudiar las neuronas y los genes que juegan un papel en la experiencia mediada por los cambios de estado interno. El protocolo se compone de dos partes bien diferenciadas: la exposición de las moscas a las experiencias gratificantes y nonrewarding, y ensayando el consumo voluntario de etanol como una medida de la motivación para obtener una recompensa de las drogas. Las dos partes se pueden usar independientemente para inducir la modulación de la experiencia como un paso inicial para más ensayos de aguas abajo o como un ensayo de alimentación de dos elección independiente, respectivamente. El protocolo no requiere una instalación complicada y por lo tanto se puede aplicar en cualquier laboratory con las herramientas básicas de cultivo de mosca.

Introducción

La modificación del comportamiento en respuesta a la experiencia permite a los animales para ajustar su comportamiento a los cambios en su entorno ^1. Durante este proceso, los animales integrar su estado fisiológico interno con las condiciones cambiantes del entorno externo y, posteriormente, elegir una acción sobre otro para aumentar sus posibilidades de supervivencia y reproducción. Evolucionaron los sistemas de recompensa para motivar comportamientos que son necesarios para la supervivencia de los individuos y de las especies mediante el refuerzo de los comportamientos que mejoran la supervivencia inmediata, tales como comer o beber, o las que aseguran ....

Protocolo

Nota: Visión general del diseño experimental: El diseño experimental incluye un protocolo adaptado para la supresión de cortejo ^7-9 en el que las moscas macho están expuestos a experiencias gratificantes y nonrewarding en 3 sesiones de entrenamiento consecutivas en el transcurso de 4 d. Al final de la fase de la experiencia, las moscas se ponen a prueba en un ensayo de consumo de etanol voluntaria de dos elección para 3-4 d. El protocolo de la presente memoria incluye varios pasos preparatorios, algunos de los cuales se pueden hacer de antemano para ser utilizado en más de un experimento, mientras que otros deberían tener lugar de una manera oportuna antes del comienzo del exp....

Resultados

FPreviously, Devineni et al. mostraron que cuando moscas de la fruta se les da la opción de consumir alimentos que contiene etanol, muestran una fuerte preferencia por los alimentos que contiene etanol sobre nonethanol que contiene los alimentos ^6. Aquí se presentan algunos resultados representativos que obtuvimos cuando el ensayo de la preferencia innata de etanol de moscas machos no tratados previamente que no se sometieron al protocolo de entrenamiento.

Discusión

Aquí, ilustramos los detalles de un enfoque integrado para medir las alteraciones en el comportamiento de búsqueda de recompensas, basado en trabajos previos descritos por Devineni et al.⁶ y Shohat-Ophir et al⁵. La primera sección del protocolo utiliza diferentes tipos de interacciones sexuales como entrada de experiencia, y la segunda sección utiliza un ensayo de alimentación de dos opciones para evaluar el efecto de la experiencia en la preferencia por consumir etanol.

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
Poliestireno 25 x 95 mm Viales FlyStuff		32-109
viales de plástico estrechos flugs	FlyStuff	42-102
Aguja estéril desechable 18 g y 27 g	puede ser adquirido por cualquier empresa		1,20 X 38 mm (18 G x 1 1/2") , 0,40 X 13 mm (27 G x 1/2")
10 x 75 mm Tubos de cultivo desechables de vidrio de borosilicato	kimble chase	73500-1075
pipetas calibradas 5 μ L	VWR	53432-706	codificado por colores blanco para contener 5 μ
L Aceite mineral	Sigma-Aldrich	M5904
Sacarosa, Grado de Biología Molecular	CALBIOCHEM	573113
Extracto de levadura en polvo para microbiología	puede ser adquirido por cualquier empresa
	Etanol Sigma-Aldrich	32221
pipeta estándar Puntas (micropipetas)	ThermScientific	T114R-Q	volumen: 0,1 - 20 μ L (ultramicro)
IDENTI-PLUGS (Tapones para tubos de espuma)	Jaece	L800-A se adapta a	apertura de 6 - 13 mm
IDENTI-PLUGS (Tapones para tubos de espuma)	Jaece	L800-D	se adapta a la apertura de 35 - 45 mm
	Bloomington Drosophila Stock Center	#24638
Viales estrechos, paquete de bandejas (PS)	Genesee Scientific Corporation	# 32-109BR
Drosophila Media Recetas y métodos	Bloomington Drosophila Stock Center	http://flystocks.bio.indiana.edu/Fly_Work/media-recipes/molassesfood.htm
ácido propiónico	Sigma-Aldrich	P5561
ácido fosfórico	Sigma-Aldrich
Methl 4-hidroxibenzoato	Sigma-Aldrich	H3647
Agar Agar	puede ser adquirido por cualquier empresa
harina de maíz	puede ser adquirida por cualquier empresa
La melaza de la abuela	B& G Foods, Inc	no indica
que la levadura seca instantánea	pueda ser adquirida por cualquier empresa

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