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Artículo de método

Neurodesarrollo pruebas de reflejos neonatales en crías de rata

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DOI:

10.3791/55261

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24 de abril de 2017

En este artículo

Resumen

las pruebas de comportamiento es el estándar de oro para la determinación de los resultados después de una lesión cerebral, y puede identificar la presencia de discapacidades del desarrollo en los bebés y los niños. reflejos del neurodesarrollo son un indicador precoz de estas anomalías. Una gran cantidad de pruebas de reflejos de desarrollo logra fácilmente en el roedor neonatal se desarrollaron y se describe aquí.

Resumen

prueba de reflejo del desarrollo neurológico se utiliza comúnmente en la práctica clínica para evaluar la maduración del sistema nervioso. reflejos del desarrollo neurológico también se les conoce como los reflejos primitivos. Son sensibles y coherentes con los resultados posteriores. Reflejos anormales se describen como una ausencia, la persistencia, la reaparición, o latencia de los reflejos, que son índices de predicción de los bebés que están en alto riesgo para los trastornos del neurodesarrollo. Los modelos animales de discapacidades del desarrollo neurológico, como parálisis cerebral, a menudo muestran reflejos de desarrollo aberrantes, como sería observado en los bebés humanos. Las técnicas descritas en evaluar una variedad de reflejos del desarrollo neurológico en ratas neonatales. prueba de reflejo del desarrollo neurológico ofrece al investigador un método de prueba que no está disponible de otra manera en este tipo de animales jóvenes. La metodología que aquí se presenta tiene como objetivo ayudar a los investigadores en el examen de los hitos del desarrollo en ratas recién nacidas como un método de detección de ancho de inicio tempranolesión ain y / o la determinación de la efectividad de las intervenciones terapéuticas. La metodología que aquí se presenta tiene como objetivo proporcionar una guía general para los investigadores.

Introducción

reflejos del desarrollo neurológico, o hitos del desarrollo, son una de las primeras evaluaciones que se usan en los recién nacidos y los bebés humanos. reflejos neurológicos son movimientos involuntarios y repetitivos que demuestran tronco cerebral y los reflejos de la médula espinal. La maduración de las redes corticales superiores caracterizadas por la evolución de la migración, la mielinización, y la sinaptogénesis promover el control voluntario y la inhibición cortical. Las alteraciones en la progresión normal de la evolución del sistema nervioso central pueden interrumpir el desarrollo del cerebro, lo que resulta en el cableado anormal cortical, el funcionamien....

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Protocolo

El Cuidado de Animales y el empleo, Ciencias de la Salud de la Universidad de Alberta aprobaron todos los estudios con animales.

Nota: Mientras que este protocolo se puede adaptar a otras especies y cepas, este protocolo está escrito para ratas Long-Evans. Estas ratas se ha demostrado que tienen actuaciones de motor superiores y la agudeza visual en comparación con otras cepas de roedores. 25, 26 El protocolo para embarazos cronometrados, los suplementos dietéticos, la inflamación de la madre y los reflejos del desarrollo neurológico es el siguiente.

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Resultados

La línea de tiempo de este diseño experimental se presenta en la Figura 2. Han sido publicados previamente 30 Los métodos y resultados. 30 El objetivo del estudio fue evaluar si la suplementación dietética con brotes de brócoli durante la gestación y el período predestete protegida la descendencia de retraso del desarrollo neurológico inducido por exposición en el útero a LPS. ratas preñad.......

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Discusión

prueba de reflejo del desarrollo neurológico es una medida predictiva del desarrollo cortical anormal y la maduración, que puede ser de importancia en circunstancias en neuropatología abierta no es evidente. Durante las pruebas de neurodesarrollo, es fundamental para asegurar que los cachorros son examinados al mismo tiempo diario. Las ratas son nocturnos y por lo tanto, su ritmo circadiano pueden alterar el rendimiento si la prueba se realiza en diferentes momentos durante el día. 34 La prueba d.......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Los autores desean agradecer a los organismos de financiación, que incluyen NeuroDevNet (unos centros nacionales de excelencia), la Fundación ALVA, el Instituto de Investigación de Salud Infantil y de la Mujer, y la Universidad de Alberta.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Breeding
Pipetas de transferenciaFisherbrand12-711-9AMSe utiliza para los lavados vaginales.
Solución salina estérilHospira 7983254La solución utilizada para recolectar células durante los lavados vaginales.
400 y micro; L Tubos de microcentrífugaFisherbrand05-408-120Se utilizan para contener la solución salina.
Microscopio ópticoLeica LeicaATC 2000Para la observación de la solución salina. Puede ser cualquier microscopio óptico utilizado en el laboratorio.
PortaobjetosFisherbrand12-552-5La solución salina se coloca en el portaobjetos. Puede ser cualquier portaobjetos utilizado en el laboratorio.
CubreobjetosFisherbrand12-545-FPara cubrir los portaobjetos. Puede usar cualquier cubreobjetos que se use en el laboratorio.
Dietético  Suplementación
Semillas de brotes de brócoli Las semillas de brotes debrócoli de Mumm se ordenan y cultivan en el laboratorio.
Caja germinadora de semillas de encimeragerminadas de MummSe utiliza una caja para germinar y cultivar las semillas antes de la cosecha.
Vaso de precipitadosEl vaso de precipitados se utiliza para remojar la semilla. Se puede utilizar cualquier tamaño de vaso de precipitados que quepa.
Inflamación materna
Lipoplysaccharide (LPS)SigmaL3129La endotoxina utilizada para imitar la inflamación materna.
Jeringa de 1 mlBD Jeringa309659utiliza para inyectar a la rata preñada.
Calibre (30 G x 1/2)Aguja BD PrecisionGlide305106Utilice la aguja más pequeña para evitar dolores y molestias.
Solución salina estéril (cloruro de sodio al 0,9%, USP)La solución salina de Hospirase utiliza para disolver el LPS.
Weights
ScaleDenver InstrumentPara registrar los pesos. Puede ser cualquier escala con 2 decimales utilizada en el laboratorio.
Reflejos del neurodesarrollo
VarillaPuede ser un clip o un palillo de dientes. Esto es para el agarre de las extremidades anteriores y traseras.
Papel de filtro redondoWhatman1001 150 Papelde 15 cm de diámetro utilizado para el análisis de la marcha.
TemporizadorFisher Scientific06-662-51Para cronometrar el tiempo asignado al enderezamiento y la marcha.
SuperficiePuede ser el borde de una mesa. Esto es para la colocación de las extremidades traseras y para evitar los acantilados.
Aterrizaje dePara cuando los cachorros realizan un enderezamiento acelerado.
Grabadora de vídeoSonyVCT-D580RMPara grabar todos los reflejos probados. Debe ser capaz de grabar a 1/1,000 fps
BellPara sobresalto auditivo. 
Lámpara o almohadillapara mantener la temperatura corporal de los cachorros bajo examen.
Semillas de 250 ml delgada y roma roma espuma de calor

Referencias

  1. Farber, J. M., Shapiro, B. K., Palmer, F. B., Capute, A. J. The diagnostic value of the neurodevelopmental examination. Clin Pediatr (Phila. 24 (7), 367-372 (1985).
  2. Zafeiriou, D. I. Primitive reflexes and postural reactions in the neurodevelopmental examination).

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Reimpresiones y permisos

Etiquetas

Reflejo de agarre de las extremidades anterioresReflejo de agarre de las extremidades posterioresPrueba del reflejo de enderezamientoReflejo de colocación de las extremidades posterioresPrueba de evitación de precipiciosAnálisis de la marchaRespuesta de sobresalto auditivoPrueba de enderezamiento acelerado