La pérdida de colonias de abejas representa un desafío para los servicios de polinización de cultivos. Las prácticas actuales de protección de los polinizadores justifican un enfoque alternativo para minimizar el contacto de las abejas melíferas con los plaguicidas dañinos usando químicos repelentes. Aquí, proporcionamos métodos detallados para un protocolo de rastreo visual para detectar impedimentos para las abejas.
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Artículo de método
Protocolo de seguimiento de vídeo a la pantalla Químicos de disuasión para las abejas de miel
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Resumen
Resumen
La abeja melífera europea, Apis mellifera L. , es un polinizador económico y agrícola importante que genera miles de millones de dólares anualmente. El número de colonias de abejas ha ido disminuyendo en los Estados Unidos y en muchos países europeos desde 1947. Varios factores juegan un papel en esta disminución, incluida la exposición no intencional de las abejas melíferas a los plaguicidas. El desarrollo de nuevos métodos y regulaciones se justifica para reducir la exposición de los pesticidas a estos polinizadores. Un enfoque es el uso de químicos repelentes que disuaden a las abejas melíferas de un cultivo recientemente tratado con pesticidas. Aquí, describimos un protocolo para discernir la disuasión de las abejas de miel expuestas a ciertas sustancias químicas repelentes. Los recogedores de abejas se recolectan y pasan hambre durante la noche en una incubadora 15 h antes de la prueba. Las abejas individuales se colocan en placas de Petri que tienen un cubo de azúcar-agarosa (tratamiento de control) o un cubo de azúcar-compuesto de agarosa (tratamiento repelente) colocado enA la mitad del plato. La placa de Petri sirve como la arena que se coloca debajo de una cámara en una caja ligera para registrar las actividades de la locomotora de la abeja de la miel usando software que sigue del vídeo. Se analizaron un total de 8 tratamientos de control y 8 repelentes durante un periodo de 10 min con cada tratamiento se duplicó con nuevas abejas melíferas. Aquí, demostramos que las abejas melíferas se disuaden de los cubos de azúcar-agarosa con un tratamiento compuesto, mientras que las abejas se atraen a los cubos de azúcar-agarosa sin un compuesto añadido.
Introducción
La abeja europea, Apis melliferaL. , Es un insecto económico y agrícola importante que proporciona servicios de polinización que se valoran en más de $ 200 mil millones en todo el mundo 1 . En los Estados Unidos y Europa, el número de colonias de abejas ha ido disminuyendo. Los Estados Unidos han perdido ca. El 60% de las colonias de abejas melíferas administradas desde 1947-2008, mientras que Europa ha perdido ca. 27% desde 1961-2007 2 , 3 . Hay una serie de factores que podrían ser responsables del aumento del número de pérdidas de colonias, incluyendo pero....
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Protocolo
1. Preparar cubos de azúcar-agarosa
- Se pesan 8 g de azúcar y se colocan en un matraz Erlenmeyer de 50 ml.
- Llenar el matraz Erlenmeyer con 20 ml de agua desionizada. Disolver el azúcar haciendo girar el frasco.
- Pesar 170 mg de agarosa y añadirlo a la solución de azúcar.
- Calentar la solución de azúcar-agarosa en un microondas en la parte superior durante 25 s. Disolver la agarosa en la solución de azúcar.
- Dejar enfriar el frasco y la solución de azúcar-agarosa.
NOTA: El frasco debe estar frío al tacto, pero no permita que la solución se solidifique.- Para preparar un cubo de azúcar-agaro....
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Resultados
Se desarrolló un protocolo de seguimiento visual para registrar la cantidad de tiempo que las abejas de miel pasaron en una zona objetivo con azúcar-agarosa (tratamiento de control) o cubo de azúcar-compuesto de agarosa (tratamiento disuasorio). El tiempo registrado se analizó utilizando un programa de software estadístico y el tiempo medio invertido ± error estándar en la zona objetivo se indica como un gráfico de barras. En este protocolo se utilizó el DEET, el patrón oro para pruebas .......
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Discusión
Este protocolo de rastreo visual proporciona un enfoque sencillo para detectar disuasiones químicas para las abejas de la miel de una manera relativamente rápida y fácil. No existen protocolos recomendados para las pruebas de laboratorio de disuasivos químicos para las abejas melíferas. Los estudios previos semi- y de campo completo han examinado los repelentes de abejas 14 , 15 ; Sin embargo, los protocolos descritos consumen mucho tiempo, requieren mucho traba.......
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Divulgaciones
Los autores no tienen nada que revelar.
Agradecimientos
Nos gustaría agradecer al Dr. Thomas Kuhar por el uso del software y equipo de seguimiento visual. Damos las gracias a James Wilson y Scott O'Neal por su asistencia técnica.
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Materiales
| Nombre | Empresa | Número de catálogo | Comentarios |
|---|---|---|---|
| Matraz Erlenmeyer de 50 mL | Kimax | 26500-50 | utilizado para hacer los terrones de azúcar/agarosa |
| Sugar | Kroger | , cualquier producto similar será suficiente, | |
| agua desionizada | adquirida internamente | ||
| Agarose | Apex | 20-102 | utilizada para hacer los terrones de azúcar/agarosa |
| Molde para cubos de agarosa (Weigh Boat) | cualquier molde que proporcione al investigador un terrón de azúcar/agarosa de 1,5 cm x 1,5 cm x 0,3 cm será suficiente: | ||
| software de seguimiento visual | EthoVision XT | Noldus | |
| LED de 633 nm, Cyron | HTP904E | Estas luces se colocaron en una caja de luz construida para iluminar las arenas desde abajo. La caja era una simple estructura de madera con una cubierta de plástico esmerilado/plexiglás que permitía que la luz se dispersara hacia arriba sin ningún deslumbramiento. | |
| Portátil o PC | Dell | Inspiron One 2305 | necesario para el software de seguimiento de vídeo. Cualquier dispositivo de PC capaz de ejecutar el software de seguimiento visual será suficiente. |
| Sons Inc | V0126 | cualquier capucha y chaqueta protectora será suficiente | |
| con la herramienta Hive | Dadant & Sons Inc | M00757 | utilizado para abrir la colmena de abejas melíferas |
| Contenedor para abejas melíferas | cualquier recipiente adecuado para albergar y almacenar abejas melíferas será suficiente | ||
| Pinzas de peso pluma punta estrecha | Bioquip | 4748 | utilizado para seleccionar abejas melíferas individuales 9 |
| cm (diámetro) Placa de Petri | Fisher Scientific | S01778 | arena utilizada para contener abejas melíferas individuales durante el seguimiento de video |
| Dispositivo de grabación (cámara) | Basler | acA-1300-60gm | cualquier dispositivo que pueda grabar el sujeto claramente y transferir el archivo a una computadora será suficiente |
| GraphPad Prisma | Graphpad | cualquier paquete de software estadístico será suficiente |
Referencias
- Gallai, N., Salles, J. M., Settele, J., Vaissière, B. E. Economic valuation of the vulnerability of world agriculture confronted with pollinator decline. Ecol Econ. 68 (3), 810-821 (2009).
- van Engelsdorp, D., Meixner, M. D. A historical review of managed honey bee populations in Europe and the United States and th....
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Reimpresiones y permisos
