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Artículo de método

Metodología para el desarrollo de tablas de vida para los insectos sésiles en el campo de la mosca blanca, Bemisia tabaci, en algodón como un modelo de sistema de

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DOI:

10.3791/56150

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1 de noviembre de 2017

 , 
1USDA-ARS, Arid-Land Agricultural Research Center, 2Department of Entomology, Maricopa Agricultural Center, University of Arizona

En este artículo

Resumen

Tablas de vida permiten la cuantificación de las fuentes y las tasas de mortalidad en las poblaciones de insectos y contribuyen a comprender, predecir y manipulación dinámica de la población en los agroecosistemas. Se presentan métodos de realización y análisis de tablas de vida de cohorte basado en el campo para un insecto con estadios inmaduros sésiles.

Resumen

Tablas de vida proporcionan un medio de medición de las listas de nacimiento y muerte de las poblaciones en el tiempo. También pueden ser utilizados para cuantificar las fuentes y las tasas de mortalidad en las poblaciones, que tiene una variedad de aplicaciones en la ecología, incluyendo los ecosistemas agrícolas. Vida horizontal, o en cohorte, tablas proporcionan el método más directo y preciso de cuantificación de las tasas vitales de la población porque siguen un grupo de individuos de una población desde el nacimiento hasta la muerte. Aquí, se presentan los protocolos de realización y análisis de tablas de vida de cohorte basado en el campo que se aprovecha el carácter sésil de los estadios inmaduros de una plaga de insectos global, Bemisia tabaci. Insectos individuales se encuentran en el envés de las hojas de algodón y se caracterizan por dibujar un pequeño círculo alrededor del insecto con una pluma no tóxico. Este insecto entonces se observan repetidamente en el tiempo con la ayuda de lentes de mano para medir el desarrollo de una etapa a la siguiente y para identificar causas específicas de la etapa de muerte asociada a fuerzas de mortalidad naturales e introducidas. Análisis explican cómo correctamente medir mortalidad múltiples fuerzas actúan simultáneamente dentro de cada etapa y cómo utilizar esos datos para proporcionar métricas dinámicas de población significativa. El método no tiene en cuenta directamente para adultos supervivencia y reproducción, lo que limita la inferencia a la dinámica de Estados inmaduros. Un ejemplo se presenta que se centró en la medición del impacto de fondo (calidad de la planta) y descendente (enemigos naturales) efectos sobre la dinámica de la mortalidad de B. tabaci en el sistema de algodón.

Introducción

Tablas de vida son una herramienta común con una larga historia en ecología1,2. Tablas de vida son que esencialmente una lista de los nacimientos y las defunciones en una población en el tiempo y estos datos puede utilizarse para cuantificar un número de parámetros importantes para comprender y predecir la dinámica de la población. Tablas de vida también pueden proporcionar información sobre las causas de muerte que son importantes para entender las interacciones tróficas y en el desarrollo de estrategias de control para la gestión de plagas en sistemas agrícolas y naturales. Se han construido numerosas tablas de vida en el campo de insectos3,4,5, y los análisis han proporcionado penetraciones importantes en la dinámica, Reglamento y predicción de poblaciones de insectos en muchos gestionados y sistemas naturales6,7,8,9,10,11,12,13,14. La tabla de vida de término es también utilizada para describir los estudios de laboratorio basado en gran parte examinar listas de nacimientos y muertes, pero bajo condiciones artificiales que no exponen el insecto a las fuerzas de la mortalidad natural y realista variables ambientales. Generalmente, es el objetivo de los estudios de laboratorio estimar el potencial biotic comparativo de una especie. El enfoque de los métodos descritos aquí es para el campo basado en las investigaciones que definen realizado potencial en relación con el medio ambiente.

Tablas de vida se pueden caracterizar como horizontal, en el que una cohorte real de los individuos edad igual se siguen desde el comienzo de sus vidas hasta la muerte, o vertical, donde se toman muestras frecuentes a través del tiempo de una población con una estructura de edad estable asumido y luego se infieren las tasas vitales de cohortes matemáticamente construida2,15. El tipo de tabla que se puede implementar depende de la naturaleza del insecto. Tablas de vida horizontal se pueden desarrollar a menudo insectos univoltine (una generación por año), mientras que este enfoque puede ser muy difícil para un insecto multivoltine con múltiples y ampliamente superpuestas generaciones cada año. Una serie de métodos analíticos han sido propuestos y utilizados para desarrollar tablas de vida verticales para las poblaciones de insectos (véase Southwood2 ejemplos). La metodología demostrada aquí permite el desarrollo de tablas de vida basado en la cohorte, horizontal en el campo para multivoltine insectos con características de historia de vida específica, en particular, la presencia de etapas de la vida sésil. El método se demuestra para una plaga clave en algodón como sistema modelo.

La mosca blanca, Bemisia tabaci biotipo B (= Bemisia argentifolii, Medio Oriente y Asia menor 116) es una plaga mundial de la agricultura que afecta negativamente el rendimiento y la calidad en muchos cultivos agronómicos y hortícolas, incluyendo protegidos los sistemas agrícolas en regiones templadas17. Impactos se producen debido a líber alimentación que interrumpe el flujo de nutrientes, enfermedades de etiología desconocida, causada por la alimentación de ninfas, transmisión de virus de plantas y numerosos efectos de la calidad del cultivo debido a la deposición de melaza18,19 . El insecto tiene una gama amplia y multivoltine, tener como 12-13 generaciones por año dependiendo de la región y de recursos alimenticios disponibles20. Desafíos de la administración también son exacerbados por su alto potencial reproductivo, su capacidad de dispersar y migrar dentro y entre sistemas agrícolas, la falta de una etapa quiescente (diapausa o veraneo) y su disposición a desarrollar rápidamente resistencia a los insecticidas utilizados para la supresión de21,22.

Ha realizado progresos considerables en desarrollar estrategias de gestión integrada de plagas para administrar con eficacia y económicamente las poblaciones de esta plaga en cultivos afectados23,24,25. Estos sistemas de gestión se basan en una sólida comprensión fundamental de la dinámica poblacional de B. tabaci y tablas de vida han sido una técnica clave que han permitido a esta comprensión. En Arizona, tablas de vida han permitido la estimación y la identificación de fuerzas importantes de la mortalidad de B. tabaci en cultivos múltiples sistemas de13,26, han permitido la medición de la dinámica de la mortalidad relativa a estrategias de gestión de distintos efectos de insecticidas14, han proporcionado un medio de estimación de posibles efectos no funcionales de algodón transgénico productoras de proteínas insecticidas27, han apoyado a riguroso evaluación de un programa de control biológico clásico28 (Naranjo, datos no publicados) y ayudó a explorar los efectos comparativos de arriba hacia abajo y bottom-up efectos sobre plagas dinámica29. Todas estas aplicaciones han implementado la metodología aquí descrita. El enfoque puede ser útil para el estudio de la ecología de la población de insectos en un número de sistemas naturales y gestionados.

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Protocolo

Nota: las técnicas que se describen a continuación consideran vida parcial de las tablas porque no incluyen explícitamente la reproducción o la mortalidad de las etapas del adulto. La cohorte del término es equivalente a generación porque examina la mortalidad del huevo a la etapa adulta.

1. establecer sitios

  1. tablas de vida de conducta en cualquier momento durante el crecimiento del cultivo una vez que los insectos están presentes. La elección de cuándo iniciar estudios dependerá de las metas y objetivos de la investigación.
  2. Seleccione dos filas de cultivo cerca del centro de la parcela para minimizar los efectos de borde de alrededor de parcelas o áreas no cultivadas. Marque la cabeza de cada fila con una bandera de alambre o una estaca de madera para facilitar la fácil reubicación una vez que el cultivo crece.
  3. Mueva 3-4 m del borde de la trama paralela a la fila. Utilizar una fila para establecer cohortes de huevo y el segundo para establecer cohortes de ninfa

2. Establecer cohortes de huevo

  1. uso una 8 X lupa para buscar nuevo puestos huevos en el envés de las hojas en la parte superior del tallo principal de la planta de algodón (generalmente el segundo o tercer nodo desde la cima).
    Nota: Etapas de la vida de B. tabaci generalmente se distribuyen verticalmente en el dosel de la planta con los huevos en la parte superior de la planta y progresivamente mayores estadíos más abajo. Esto se produce porque ninfas de instar 1 st instalarse en la misma hoja como el huevo y la planta añade hojas sobre el sitio de oviposición inicial mientras que crece.
    1. Uso de una energía más alta 15 X lente para observar huevos frescos y verificar identificación antes de usar la lente de 8 x para marcar el insecto. Huevos frescos destacan de huevos que son mayores (figuras 1A y 1B) y tienen una coloración blanca brillante bajo la lente. Huevos se oscurecen hasta un color tannish a medida que maduran.
  2. Use un marcador permanente negro no tóxico, ultra fino punto a dibujar un pequeño círculo alrededor del huevo. Dibujar el círculo pequeño bastante para reducir al mínimo la posibilidad de que una hembra poniendo otro huevo dentro del círculo más tarde.
    1. Corte un agujero o la ranura en el lado del 8 X lente de mano con una sierra para metales o broca para que la pluma se puede insertarse y ver a través de la lente cuando dibujo ( figura 2A).
  3. Repita este proceso en la misma hoja, si es posible, para marcar otros huevos, marcando un total de no más de cuatro huevos en una sola hoja y no más de un huevo por el sector de la hoja. Para el algodón, la hoja se divide en cuatro sectores por tres venas principales de la hoja ( figura 3).
  4. Lazo una pequeña etiqueta de la cartulina ligera alrededor del pecíolo de la hoja que contiene el óvulo marcada. Número de la etiqueta e incluyen notación para el número de parcela o tratamiento dependiendo del diseño experimental ( figura 2B).
  5. Lazo de una longitud de 1 m de cinta marcar alrededor del tallo principal en la parte superior de la planta. Usar una corbata de estilo de arco para que la cinta puede ser fácilmente reubicada según sea necesario para mantenerla visible de repetidas visitas a este lugar en el campo.
    6. Número de
  6. hoja de registro y la información posicional en un análogo o electrónico portátil (tabla 1). Información posicional utiliza los sectores de la hoja a más finalmente nota de ubicación (por ejemplo, 1-1, 1-2, 1-4 indican los huevos en los sectores 1, 2 y 4 en la hoja #1).
  7. Establecer cada cohorte en un solo día.
    Nota: Una cohorte en una determinada parcela se compone de un mínimo de 50 huevos total.
    1. No más de una hoja por planta para la mejor distribución de los miembros de la cohorte de uso.
      Nota: Dependiendo de la densidad de insectos, esto puede abarcar cualquier parte de 13 hojas con 3-4 huevos cada uno o 50 hojas con un huevo. Las plantas individuales se seleccionan para la distribución de las hojas marcadas a lo largo de la fila como sea posible.

3. Establecer cohortes de ninfa

  1. uso una 8 X lupa para buscar recién colocado 1 st instar las ninfas en el envés de las hojas sobre hojas de 3-5 hacia abajo desde la parte superior del tallo principal de la planta de algodón. Utilizar un objetivo de X 15 para verificar la identificación antes de marca usando 8 X lente.
  2. Utilice un marcador permanente negro no tóxico, ultra fino punto para dibujar un pequeño círculo alrededor de la ninfa. Dibujar el círculo pequeño bastante para reducir al mínimo la posibilidad de que una correa eslabonada de colocar dentro del círculo más adelante.
    Nota: Ninfas de instar 1 st recién nacidos se llaman rastreadores, que pueden mover varios centímetros durante las primeras horas después de la portilla de los huevos. Es entonces " se instala " en un sitio donde la alimentación y muda sin moverse nunca otra vez hasta que emerge el adulto. Éstos colocados ninfas de instar 1 st ( figura 1) son distintivas de las correas eslabonadas. En primer lugar, son inmóviles y segundo, son 2 dimensiones y pone estrecha y plana de la hoja y tienen un color ámbar translúcido ligeramente más.
    1. Corte un agujero o la ranura en el lado del 8 X lente de mano con una sierra para metales o broca para que la pluma se puede insertarse y ver a través de la lente cuando dibujo ( figura 2A).
  3. Repita este proceso en la misma hoja, si es posible, para marcar otras ninfas, las ninfas no más de cuatro en una sola hoja y no más de una ninfa por sector de la hoja de la marca. Para el algodón, la hoja se divide en cuatro sectores por tres venas principales de la hoja ( figura 3).
  4. Lazo una pequeña etiqueta de la cartulina ligera alrededor del pecíolo de la hoja que contiene el marcado de la ninfa. Número de la etiqueta e incluyen notación para el número de parcela o tratamiento dependiendo del diseño experimental ( figura 2B).
  5. Lazo de una longitud de 1 m de cinta marcar alrededor del tallo principal en la parte superior de la planta. Usar una corbata de estilo de arco para que la cinta puede ser fácilmente reubicada según sea necesario para mantenerla visible de repetidas visitas a este lugar en el campo.
    6. Número de
  6. hoja de registro y la información posicional en un análogo o electrónico portátil (tabla 1). Información posicional utiliza los sectores de la hoja a más finalmente nota de ubicación (por ejemplo, 1-1, 1-2, 1-4 indican las ninfas en los sectores 1, 2 y 4 en la hoja #1).
  7. Para asegurarse de que 1 st instar ninfas y rastreadores no están marcados, vuelva a cada hoja marcada y observar el insecto marcado sobre 1-2 h después de la configuración inicial. Cambio de nomenclatura de colocado de ninfas pueden ser necesarias.
  8. Establecer cada cohorte en un solo día.
    Nota: Una cohorte en una determinada parcela se compone de un mínimo de 50 ninfas total. Se utiliza no más de una hoja por planta para la mejor distribución de los miembros de la cohorte. Dependiendo de la densidad de insectos, esto puede abarcar cualquier parte de 13 hojas con 3-4 ninfas cada uno o 50 hojas con una ninfa. Las plantas individuales se seleccionan para distribuir las hojas marcadas a lo largo de la fila como sea posible. Debido a la 1 etapa de st instar sobre orugas, los huevos marcados en el protocolo 2 no son los mismo insectos que luego siguen como ninfas. por lo tanto, no hay mortalidad de orugas se mide y la tabla es un poco inconexa en tiempo porque cohortes de huevo y ninfa se establecen típicamente en el mismo día. Investigaciones han demostrado el rastreador mortalidad es insignificante y puede ser esencialmente ignorado 30.

4. Observación y grabación de la portilla de huevo y mortalidad

  1. después de 8-10 d (28-32 ° C, condiciones medias de verano de Arizona) después del establecimiento de cohortes de huevo, recoger hojas que contienen huevos marcados y volver al laboratorio para su observación bajo un microscopio de disección. Huevos son muy pequeños para evaluar claramente la mortalidad y causas de mortalidad en el campo.
  2. Determinar las causas de muerte para los huevos y registrar en el cuaderno iniciado en el establecimiento de la cohorte (tabla 1).
    Nota: La muerte se caracteriza como desprendimiento, depredación o inviabilidad. Desplazamiento: el huevo es que faltan debido a fenómenos meteorológicos (viento, lluvia y polvo que sopla) o masticar depredación. Depredación: depredadores que aspira dejan un corion colapsado ( figura 4 K). Huevos eclosionados pueden aparecer colapsados, pero habrá una raja vertical en el corion del huevo. Utilice un pasador de minuten para el corion en la hoja al microscopio para buscar este hendidura. Inviabilidad: los huevos no eclosionan después del período de 8-10 d y son de un color tan oscuro. En Arizona verano condiciones (28-32 ° C) normalmente salen de los huevos en 5-7 días. Esto puede ser diferente en otras regiones y ajustes necesarios en el tiempo de recogida del campo.

5. Observación y grabación de estadíos de desarrollo y mortalidad

  1. uno o dos días después del establecimiento de la cohorte, utilizar una lente X 15 para evaluar el desarrollo de las ninfas y para asignar una causa de mortalidad si muerto. Hacer observaciones por lo menos tres veces por semana (días alternos).
    1. Uso tamaño relativo ( figura 1 -G) y el tiempo después de establecimiento a evaluar estadio.
      Nota: Hay cuatro estadios de ninfas y el desarrollo es rápido en condiciones de verano de Arizona (28-32 ° C) con cada una de las tres primeras etapas dura alrededor de 2 d y la última etapa dura d 3-5 (total desarrollo ninfa 2 semanas o menos). Nuevos observadores deben aprender tamaños instar por insectos criados en el laboratorio o el efecto invernadero en la planta hospedera de interés. El volumen en el abdomen de los bacteriosomes (órganos que simbionte de la mosca blanca) en relación con el tamaño de cuerpo total es un indicador útil de nymphal instar ( figura 1 -G). Las ninfas recién mudadas son muy planas y translúcido. Listo para muda las ninfas son más turgentes, cúpula de perfil y opaca en apariencia.
    2. Determinar las causas de la muerte de ninfas y registrar en el cuaderno iniciado en el establecimiento de la cohorte (tabla 1).
      Nota: La muerte se caracteriza como desprendimiento, parasitismo, depredación o desconocido según estadio ( figura 4). Desplazamiento: ninfas de cualquier etapa están desaparecidas debido a fenómenos meteorológicos (viento, lluvia y polvo que sopla) o masticar depredación. Estimar la etapa de ninfas desalojadas la etapa media de ninfas muertas y vivas en una fecha determinada observación. Parasitismo: sólo observable en el 4 th instar las ninfas. El bacterisomes amarillento emparejados son desplazados por el desarrollo de la larva parasitoide ( Figura 4A); la etapa larval es a veces visible ( figura 4). La etapa de pupa del parasitoide es distintiva y géneros específicos ( Figura 4B , 4D). Depredación: chupar depredadores será evacuar el contenido de la ninfa y dejar un cadáver colapsado ( figura 4 -4I). Raramente, un depredador de masticación puede dejar evidencia ( figura 4J). Desconocido: la muerte que no se puede atribuir a una de las causas anteriores. En ambientes húmedos, enfermedad fúngica puede ser una causa adicional de muerte. Esta categoría puede incluir también asesinadas por host-alimentación de parasitoides de ninfas. Las ninfas que emergen como adultos dejando una ranura en forma de t distintivo en las exuvias ( figura 1 H)
  2. registro etapa de desarrollo (si está vivo) y la causa de muerte y etapa en el cuaderno iniciado en cohorte establecimiento (cuadro 1).
  3. Una vez que todas las ninfas que se observa en una sola hoja tienen o murió o surgió como una mosca blanca adultos, recoge la hoja y volver al laboratorio. Utilizar el mayor aumento de un microscopio de disección para confirmar que la causa de muerte en el campo es correcta y hacer las correcciones.
    Nota: No cada insecto muerto no desalojar permanecerá sobre la hoja durante el período típico de dos semanas de observación y así algunas verificaciones no será posibles.

6. Resumen de datos y análisis

  1. consultar recursos disponibles para ayudar en la construcción de tablas de vida de los datos recogidos 2 , 8 , 11 , 31. Se presenta una tabla ejemplo tabla 2.
    Nota: Análisis de tabla de vida sólida requieren varias tablas de vida independiente a lo largo de tiempo o en diferentes sitios. Para un insecto multivoltine como B. tabaci puede ser múltiples tablas de vida en el transcurso de una temporada o múltiples estaciones y sitios. Mortalidad real
    1. estimación (d x/l 0) basado en el número de insectos establecido al principio de la generación.
      Mortalidad real = (/l de d x 0)
      donde d x es el número de muertos durante la etapa x y l 0 es el número de insectos en el principio de la generación. Estas tasas de mortalidad son añadido y la suma de d x sobre estimaciones de etapas, la tasa de la mortalidad total para la generación (tabla 2).
    2. Estimar la mortalidad aparente dentro de un escenario (q x) basada en el número de insectos vivos en el inicio de una etapa específica (tabla 2). Estimar la fase específica q x o factor dentro de la fase específica q x. Estas tasas son aditivos solamente dentro de un escenario.
    3. Determinar mortalidad marginal mediante la fórmula:
      M B = d B / (1-d A)
      donde M B es la tasa marginal de factor de mortalidad B, d, B es la aparente tasa de mortalidad de factor B y d A es la velocidad aparente de la mortalidad sumada de todos los factores de mortalidad que pueden sobrepasar el factor B 13 , 32 (tabla 3).
      Nota: Para albar insectos como mosca blanca y muchos otros insectos, las múltiples causas de la muerte dentro de una etapa de la vida particular no son secuenciales. En su lugar actúan al mismo tiempo y así es necesaria la estimación de las tasas marginales de exactamente estimar tasas específicas por etapa de mortalidad de cualquier causan 32 , 34. Por ejemplo, un parásito puede atacar a una ninfa de mosca blanca. El huevo del parasitoide puede eclosionar y las larvas pueden convertirse en el anfitrión. Esta actividad, inicialmente asintomática para el observador,, o más probablemente, matar el insecto anfitrión y deben ser abonados como la causa de la muerte. Pero en algunos casos, un depredador puede atacar a esta misma ninfa o la ninfa puede ser desalojada de la hoja que lleva el observador para señalar la causa de la muerte como la depredación o desprendimiento. Mortalidad marginal corrige esto.
      1. Convertir las tasas específicas por etapa marginales a valores de k 35 k = - ln (1 - M), donde ln < /em> es el logaritmo natural y M es la tasa de mortalidad marginal de interés. k-los valores son aditivos y esto simplifica más análisis. valores de k pueden convertir en respaldo a las tasas de mortalidad proporcional por 1 - e [-k].
    4. Estimación de mortalidad insustituible como [1 - e (-TotalK)]-[1 - e (-{natalidad - kvalue })].
      Nota: Esto da la porción del total mortalidad generacional que no se lograría si se eliminó un factor de mortalidad particular. Por ejemplo, ¿cuánta mortalidad generacional puede perderse si la depredación o el parasitismo fue quitado debido a un aerosol insecticida? Insustituible mortalidad estimada de esta manera asume que no hay ninguna dependencia de la densidad en mortalidad.
      5. Factores de
    5. clave
      1. utilizan un simple análisis gráfico para representar el valor de k para cualquier una etapa, o cualquier factor de mortalidad una (o un factor de mortalidad dentro de una etapa) contra el valor K Total para toda generación (K Total = suma de todos los valores de k).
        Nota: El factor de mortalidad que imita más de cerca posible el patrón de Total-K lo mejor es el factor clave, el factor que contribuyen la mayoría a los cambios en mortalidad generacional 35. Un método cuantitativo más regresa los valores de k en Total K e identifica el factor clave como el uno con el pendiente mayor valor 3.
    6. Prueba de dependencia de la densidad por regresión-valores de k para los factores de interés en el logaritmo natural de la densidad de población de insectos mide independientemente (por ejemplo, 13). Un desnivel positivo significativo sugiere la dependencia directa de la densidad y una dependencia inversa de pendiente negativo.
      Nota: con información de la tabla de vida adicional en supervivencia de adultos y la reproducción, muchos parámetros adicionales (por ejemplo, tiempo de generación, la tasa reproductiva neta, tasas instantáneas de aumento, la esperanza de vida en una etapa determinada, etc.) y Análisis (modelos de matriz elasticidad análisis 36 , 37 puede llevarse a cabo.

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Resultados

Una cohorte de ejemplo se presenta en la tabla 2 para mostrar una presentación típica y cálculo de resultados de la tabla de vida. Los datos más útiles es capturados en las tasas de mortalidad marginal de cada factor dentro de cada etapa. Por convertir estos precios a valores de k (Protocolo, artículo 6), mortalidad etapa sobre todos los factores y factor de mortalidad en todas las etapas se pueden fácilmente calcular, como puede total mortalidad generacional. Esto tambié...

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Discusión

Por lo general, el desarrollo de la vida tablas para insectos multivoltine con amplia superposición de generaciones están limitadas a un enfoque vertical donde una población se muestrea repetidamente en el tiempo y diversas técnicas gráficas y matemáticas se utilizan para estimación de reclutamiento para las diferentes etapas y deducir las tasas de mortalidad de cambio de densidades de la vida diferentes etapas2. La fuerza del enfoque aquí es que navega esta limitación al aislar a un grupo de inse...

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Agradecemos a D. Ashton, V. Barkley, K. Beimforh, F. Bojorquez, Cantrell J., G. Castro, R. Christensen, Fearn J., C. Jara, D. Meade, G. Owens, Rodarte L., D. Sieglaff, A. Sonoqui, M. Stefanek, Stuart B., J. Trejo, A. Slade y Yescas E. asistencia técnica. Apoyo parcial fue proporcionada por USDA-servicio, USDA-nacional Instituto de investigación agrícola para la alimentación y la agricultura extensión IPM programa y plagas manejo alternativas especiales proyectos, Cotton Incorporated, Asociación de productores de algodón de Arizona, algodón Fundaciones, USDA-Cris, NAPIAP (región occidental) y proyectos especiales de la región occidental IPM.

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Cinta de señalizaciónGempler, Janesville, Wisconsin EE. UU.52273Cinco colores
Etiquetas de mercancía de ManilaAmerican Tag Company, Pico Rivera, California EE. UU12-104
Marcador de punto ultrafinoSanford, Bellwood, Illinois, EE. UU451898Disponible en Office Max, Amazon
Peak Loupe 8XAdorama, Nueva York, NY EE. UU2018
Lupa Peak 15XAdorama, Nueva York, NY Estados Unidos19621
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Referencias

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