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Artículo de método

Usando a láser Doppler Imaging y seguimiento para analizar la microcirculación de la médula espinal en ratas

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DOI:

10.3791/56243

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30 de mayo de 2018

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* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Aquí presentamos una combinación de perfusión Doppler laser imaging (LDPI) y Láser Doppler perfusión monitorización (LDPM) para medir espinal cordón flujos de sangre local y saturación de oxígeno (SO2), así como un procedimiento estandarizado para la introducción de la médula espinal trauma en rata.

Resumen

Flujometría Doppler láser (LDF) es un método no invasivo para la medición de flujo (BF) de sangre, que hace que sea preferible para medir micro circulatorio alteraciones de la médula espinal. En este artículo, nuestro objetivo era utilizar imágenes de láser Doppler y monitoreo para analizar el cambio de BF después de lesión de la médula espinal. El escáner de imagen Doppler laser y el punta de prueba/monitor se emplearon para obtener en cada lectura. Los datos de LDPI proporcionan una distribución local de BF, que dio un panorama de perfusión alrededor del sitio de lesión y había hecho accesible para el análisis comparativo de BF entre diferentes ubicaciones. Midiendo intensamente la zona de sondeo sobre un período de tiempo, una sonda combinada fue utilizada para medir simultáneamente la saturación BF y el oxígeno de la médula espinal, mostrando el total de la médula espinal de la perfusión y suministro de oxígeno. LDF tiene algunas limitaciones, tales como flujo relativa, sensibilidad al movimiento y el cero biológico de la señal. Sin embargo, la tecnología ha sido aplicada en el estudio clínico y experimental debido a su configuración simple y rápida medición de BF.

Introducción

El tejido de la médula espinal es altamente vascularizado y extremadamente sensible a la hipoxia inducida por la lesión de la médula espinal (SCI). Nuestros estudios anteriores demostraron que el flujo de sangre de la médula espinal fue disminuyó significativamente después de conmoción cerebral lesión1,2, que podría estar relacionado con el déficit de la función motora. Estudios recientes han demostrado que la integridad de los vasos sanguíneos después de SCI es bien correlacionada con la mejoría de la función motora sensorial3. Se ha divulgado que vascularidad mejorada podría rescatar ....

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Protocolo

Protocolos animales que involucran animales de experimentación siguieron las pautas establecidas por los institutos nacionales de salud (NIH) y fueron aprobados por el cuidado Animal y uso Comité Capital médica de la Universidad de.

Los procedimientos de introducción de SCI y medición BF de la médula espinal mediante láser Doppler equipo se describen a continuación fueron utilizados en un estudio publicado1.

1. preparación para la cirugía

  1. Preparar solución 3% (p/v) de pentobarbital sódico en solución salina y administrar a la dosis de 35 mg/kg.
    PRECAUCIÓN: pentobarbital sódico....

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Resultados

LDPI fue utilizado para medir el BF en la médula espinal, que a lo largo del eje rostral caudal de la médula espinal se cuantificó mediante la extracción de perfiles lineales (figura 4). Figura 5A y figura 5B representan la proyección de imagen del flujo de la médula espinal del grupo sham y grupo SCI, respectivamente. Figura 5 y figura 5 re.......

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Discusión

Algunos detalles deben ser notados al realizar este protocolo. En primer lugar, el proceso de anestesia y la cirugía debe llevarse a cabo más rápida y elegante como sea posible para reducir al mínimo la tensión introducida al animal. Para reducir el disturbio a los resultados, mantener el animal en un estado relativamente Pacífico y estable. En segundo lugar, debe prestarse más atención al sangrado durante la medición con equipos de láser Doppler, ya que sangre potencialmente puede interferir con la lectura. Por último, .......

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Divulgaciones

Los autores no tienen nada que revelar.

Agradecimientos

Los autores no tienen ninguna agradecimientos.

....

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Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo
NombreEmpresaNúmero de catálogoComentarios
Escáner de línea Doppler láserMoor InstrumentsmoorLDLS2
Monitor Doppler láserMoor InstrumentsmoorVMS-LDF
Sonda para monitorMoor InstrumentsVP3Sonda de entrega de extremo de aguja roma
ImpactorSistemas de Precisión e InstrumentaciónIH-0400
Fenobarbital sódicoSigma-AldrichP3761
BuprenorfinaSigma-AldrichB-908
JeringaBecton Dickinson Medica (s) Pte.Ltd300841
Agujas quirúrgicas de sutura con hiloShanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd18T0329 (número de lote) /4-0
BisturíFábrica de instrumentos de operación de Shanghai Medical Instrument Co., Ltd.J11030 4 #
Fábrica de instrumentos de operación de hoja de bisturíde Shanghai Medical Instrument Co., Ltd.J12130 20 #
pinzas oftálmicasde Shanghai Medical Instrument Co., Ltd.JD1040
pinzas hemostáticasde Shanghai Medical Instrument Co., Ltd.J31050
Penicilina bencil sódicaNorth China Pharmaceutical Co., LtdF6072116 (número de lote)
75% de alcoholProductos de desinfección Dezhou Anjie Gaoke Co., Ltd150421R (número de lote)
YodoShandong Lierkang Medical Technology Co., Ltd20170102 (número de lote)
Centro de animales de laboratorio de ratas, la Academia de Medicina Millitery CienciasSprague-Dawly (cepa de
Fábrica de instrumentos de operación de Fábrica de instrumentos de operación de rata)

Referencias

  1. Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H. Meliorating microcirculatory with melatonin in rat model of spinal cord injury using laser Doppler flowmetry. Neuroreport. 27 (17), 1248-1255 (2016).
  2. Jing, Y. L., Bai, F., Chen, H., Dong, H.

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Reimpresiones y permisos

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