Un ensayo Geotaxis negativa iterativo rápido automatizado para analizar comportamiento escalar adulto en un modelo de Drosophila de la neurodegeneración

Wenze Cao; Li Song; Jingjing Cheng; Na Yi; Luyi Cai; Fu-de Huang; Margaret Ho

doi:10.3791/56507

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Artículo de método

Un ensayo Geotaxis negativa iterativo rápido automatizado para analizar comportamiento escalar adulto en un modelo de Drosophila de la neurodegeneración

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DOI:

10.3791/56507

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12 de septiembre de 2017

Wenze Cao^*¹^,²^,³ , Li Song^*¹^,²^,³ , Jingjing Cheng¹^,²^,³ , Na Yi¹^,²^,³ , Luyi Cai¹^,²^,³ , Fu-de Huang⁴^,⁵ , Margaret Ho¹^,²^,³

¹Research Center for Translational Medicine, Tongji University School of Medicine, ²Key Laboratory of Arrhythmias of the Ministry of Education of China, Shanghai East Hospital, Tongji University School of Medicine, ³Department of Anatomy and Neurobiology, Tongji University School of Medicine, ⁴Shanghai Advanced Research Institute, University of Chinese Academy of Sciences, Chinese Academy of Sciences, ⁵Sino-Danish College, University of Chinese Academy of Sciences, Chinese Academy of Sciences

^* These authors contributed equally

En este artículo

Resumen

Este protocolo paso a paso analiza el comportamiento de geotaxis negativa de Drosophila mediante un sistema automatizado de varios cilindro que aloja cientos de moscas y sincroniza su acción por un motor eléctrico. Sobre sincronización, es analizar comportamiento mosca geotaxis negativa, grabados digitalmente y analizados usando el software RflyDetection diseñado.

Resumen

Las enfermedades neurodegenerativas se asocia frecuentemente a una progresiva pérdida de capacidad de movimiento, menor vida útil y neurodegeneración dependiente de la edad. Para entender el mecanismo de estos celulares eventos y sus relaciones causales con otros, Drosophila melanogaster, con sus sofisticadas herramientas genéticas y características conductuales diversas, se utilizan como modelos de enfermedades para evaluar fenotipos de neurodegenerativas. Aquí describimos un método de alto rendimiento para analizar el comportamiento de adultos geotaxis negativa de Drosophila , como una indicación de posibles defectos motor asociado a la neurodegeneración. Una máquina automatizada es diseñado y desarrollado para sincronización de mosca en coche mediante un impulso eléctrico inicial, más adelante lo que permite la grabación de comportamiento geotaxis negativa en un transcurso de segundos a minutos. Imágenes de la video grabado digitalmente luego son procesadas con el software de RflyDetection diseñado para la manipulación de datos estadísticos. A diferencia del ensayo manualmente controlados geotaxis negativa basado en volar sola, este protocolo precisa, rápida y de alto rendimiento permite la adquisición de datos más que centenares de moscas al mismo tiempo, proporcionando un enfoque eficiente para avanzar en nuestra comprensión en el mecanismo subyacente del aparato locomotor déficit asociado a la neurodegeneración.

Introducción

Una variedad de protocolos y métodos han sido desarrollados para analizar comportamiento de escalada adultos de Drosophila . Bastante laborioso, el análisis tradicional sobre todo poner una sola mosca en un frasco individual y utiliza una fuerza manual para moscas abajo de sincronización¹^,²^,³^,⁴. Es tedioso y lento, inadecuado para grandes estudios de alto rendimiento y tiene posibles variaciones de la fuerza manual utilizada para golpear ligeramente las moscas así como otras limitaciones. Para mejorar el análisis, se desarrolló un e....