Establecer un modelo de ratón de una neuropatía de fibra pequeña pura con el Ultrapotent agonista de Receptor transitorio potencial vaniloides tipo 1

Yi-Chen Lee; Shui-Chin Lu; Yu-Lin Hsieh

doi:10.3791/56651

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Artículo de método

Establecer un modelo de ratón de una neuropatía de fibra pequeña pura con el Ultrapotent agonista de Receptor transitorio potencial vaniloides tipo 1

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DOI:

10.3791/56651

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13 de febrero de 2018

Yi-Chen Lee¹^,² , Shui-Chin Lu³ , Yu-Lin Hsieh¹^,²

¹Department of Anatomy, School of Medicine, College of Medicine, Kaohsiung Medical University, ²Department of Medical Research, Kaohsiung Medical University Hospital, ³Department of Medical Research, Ultrastructural Laboratory, Kaohsiung Medical University Hospital

En este artículo

Resumen

Este estudio establece un modelo experimental de neuropatía de fibra pequeña pura con la resiniferatoxina (RTX). Una dosis única de RTX (50 μg/kg) es óptimo para el desarrollo de un modelo de neuropatía de fibra pequeña que imita las características de los pacientes y podría ayudar a investigar el significado molecular nociceptivo subyacente dolor neuropático.

Resumen

Pacientes con diabetes mellitus (DM) o experimentar los efectos neurotóxicos de los agentes quimioterapéuticos pueden desarrollar trastornos de la sensibilidad debido a la degeneración y lesión de las neuronas sensoriales de pequeño diámetro, conocido como neuropatía de fibra pequeña. Modelos animales actuales de neuropatía de fibra pequeña afectan tanto las fibras sensoriales de diámetro grande y pequeño y así crean una neuropatología demasiado complejos para evaluar correctamente los efectos de heridas fibras sensoriales de pequeño diámetro. Por lo tanto, es necesario desarrollar un modelo experimental de neuropatía de fibra pequeña pura para examinar adecuadamente estas cuestiones. Este protocolo describe un modelo experimental de neuropatía de fibra pequeña que específicamente afectan nervios sensoriales de pequeño diámetro con resiniferatoxina (RTX), un agonista ultrapotent del receptor transitorio potencial vaniloides tipo 1 (TRPV1), a través de una sola dosis de inyección intraperitoneal, se denomina neuropatía RTX. Esta neuropatía RTX mostró manifestaciones patológicas y anormalidades del comportamiento que imitan las características clínicas de los pacientes con neuropatía de fibra pequeña, incluyendo la degeneración de la fibra del nervio (IENF) de intraepidermal, específicamente lesiones en las neuronas de pequeño diámetro y la inducción de hipoalgesia térmica y alodinia mecánica. Este protocolo probado tres dosis de RTX (200, 50 y 10 μg/kg, respectivamente) y concluyeron que una dosis crítica de RTX (50 μg/kg) es necesaria para el desarrollo de manifestaciones de neuropatía de fibra pequeña típica y preparado un procedimiento modificado de la inmunotinción para investigar IENF degeneración y lesión del soma neuronal. El procedimiento modificado es rápida, sistemática y económica. Evaluación conductual del dolor neuropático es fundamental para revelar la función de los nervios sensoriales de pequeño diámetro. La evaluación de los umbrales mecánicos en roedores experimentales es particularmente desafiante y este protocolo describe una malla metálica modificada para requisitos particulares que es conveniente para este tipo de evaluación en los roedores. En Resumen, la neuropatía RTX es un modelo experimental nuevo y fácilmente establecido para evaluar la significación molecular e intervención subyacente dolor neuropático para el desarrollo de agentes terapéuticos.

Introducción

Neuropatía de fibra pequeña que implicaba el dolor neuropático, que es evidente por la degeneración de IENFs, es común en varios tipos de condiciones, como la DM y como resultado de los efectos neurotóxicos de los agentes quimioterapéuticos¹^,²^, ³^,⁴^,⁵. IENFs son los terminales periféricos de diámetro pequeño de neuronas localizadas en los ganglios de raíz dorsal (GRD) y son afectados en paralelo en los casos de IENF degeneración⁶. Por ejemplo, la transcripción genética upstream alter....