Procedimiento transuretral instilación en ratón macho adulto

Resumen

La instilación transuretral es un procedimiento difícil y no ha sido bien descrita en la literatura. El objetivo de este manuscrito es describir una técnica para la inserción transuretral de un catéter para la administración intravesical de líquidos con sustancias activas en la vejiga o la próstata en ratones macho adultos.

Resumen

Instilación transuretral puede utilizarse para ofrecer diferentes soluciones con principios activos (p. ej., drogas, productos químicos, bacterias y virus) localmente en la vejiga urinaria para inducir modelos animales de patologías de vejiga o evaluar la efectividad de los tratamientos intravesical. Más roedores modelos de patologías de vías urinarias (LUT) inferiores son inducidos en ratones hembra debido a la facilidad de instilación intravesical de las sustancias a través de la uretra femenina. Sin embargo, debido a las diferencias anatómicas entre el LUT femenina y masculina, instilación transuretral en un ratón macho ha sido considerada un procedimiento muy difícil, y no se ha descrito previamente. En este manuscrito, nos proporcionan una descripción detallada de cómo preparar tubería de polietileno (PE) para la posterior inserción en la uretra de un ratón macho. Además, discutimos los tipos ideales de la tubería de PE a utilizar dependiendo del sitio deseado de la inoculación. Además, se describe punto por punto cómo preparar un animal para un exitoso instilación transuretral evitar lesiones en la uretra y asegurar la entrega de la solución a la ubicación deseada. El procedimiento es iniciado por retraer el prepucio y el glande para exponer la apertura del meato uretral. A continuación, el glande son tomados por Roma fórceps no machacar para estabilizar el pene y la tubería de PE. La tubería de PE se inserta por primera vez en el meatus uretral paralelo al cuerpo animal, entonces su ángulo está ajustado inclinando el catéter para maniobrarlo para seguir la curvatura natural de la uretra. Esta técnica puede utilizarse en modelos murinos inducidos de patologías de vejiga o evaluar la efectividad de los tratamientos intravesical en ratones machos.

Introducción

El enfoque de instilación transuretral se ha utilizado en estudios anteriores como uno de los métodos para crear modelos de roedores de vejiga patologías^1,2,3,4 y puede usarse para evaluar la efectividad de los tratamientos locales entregados en ratones. Aunque los modelos animales no pueden recapitular completamente patologías humanas, identificación de los mecanismos subyacentes en los estudios animales proporciona una mejor comprensión de los trastornos humanos de LUT como síndrome de dolor de la cistitis intersticial, vejiga, neurogénico....

Protocolo

todos los procedimientos con animales, incluyendo el método y la duración de la anestesia, así como cuidados postoperatorios, se habla con un veterinario y aprobados por la atención institucional Animal y el Comité uso (IACUC) en el institución afiliada. En este manuscrito, todos los procedimientos se realizaron con 8 a ratones machos de 15 semanas de edad C57BL/6 y el protocolo sigue las pautas de cuidado de los animales aprobadas por el IACUC en la Universidad de Colorado.

1. preparación de la tubería

Nota: para infundir el inóculo, una aguja conectada a la tubería de polietileno (PE) ( fi....

Resultados

Instilación transuretral de colorante azul a través de tubería de PE 50 dio lugar a la instilación de contraste en la vejiga urinaria (Figura 4A) y a través de 10 PE tubo de coloración de la SV y AP (Figura 4B), respectivamente. Para evaluar si la instilación transuretral realizada provoca un reflujo inmediato del inóculo a los riñones o no, el riñón y el uréter se observaron seguida por la instilación de 100 μl del colorante azu.......

Discusión

Este manuscrito describe detalladamente un método de instilación transuretral en ratón macho adulto. Área siembra primaria diferencial puede llegar mediante el uso de tubería de PE de diferentes diámetros. PE-50 se recomienda para llegar con éxito a la luz de la vejiga urinaria, mientras que un diámetro mayor que PE-10 se utiliza para llegar a la AP y la SV (Figura 3A-B). Además de la elección del tamaño de la tubería de PE y órgano Diana para la inoculación, otros factores .......

Materiales

Lista de materiales utilizados en este artículo

Nombre	Empresa	Número de catálogo	Comentarios
BD INTRAMEDIC Tubo de polietileno/ PE 10	BD Medical	63019-004
BD INTRAMEDIC Tubo de polietileno/ PE 50	BD Medical	63019-048
BD Insyte-N Autoguard/ Angiocath	BD Medical	311411
Etanol (EtOH)	Fisher Scientific	BP2818500
BD Aguja Solo calibre 22 (G) 1 pulgada	Becton Dickson
Aguja BD solamente, calibre 27 (G), 1/2 pulgada	Becton Dickson	305129
Luer stub, 22 G X 0.5 in / Aguja roma	Instech	LS22
Luer stub, 27 G X 0.5 in / Aguja roma	Instech	LS27
6" de largo x 2" de ancho x 1" de grosor, piedra de afilar de óxido de aluminio / piedra de aceite	Norton	40204034
Lubricante quirúrgico estéril bacteriostático Folilpac	Surgilube	281020543
isoflurano	Fluriso	13985-528-60
SomnoSuite Sistema de anestesia de bajo flujo	Kent Scientific	SS-01
Pinza de disección, curvada	VWR	82027-392
BD Jeringa de 1 ml	BD Medical	309626
solución de tinta china., 0.2% en tampón PBS	Alfa Aesar	J61007
8 ~ 12 semanas de edad macho C57B/6 Ratones	Jackson Lab	#000664

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